用气相色谱法检测水稻中除草剂含量的检测方法与流程

本发明涉及水稻中残留的检测，尤其涉及一种用气相色谱法检测水稻中除草剂含量的检测方法。
背景技术：
：农田杂草一直是阻碍农业快速发展的重要因素，除草技术的应用对控制农田草害、保障农作物高产具有重要作用。但是，在除草剂的应用过程中，药剂对土壤中的污染问题也越来越突出：一方面土壤中农药残留对后茬作物的药害问题时有发生；另一方面，农药残留也可通过污染土壤和地表水从而进入食物链，对人体健康造成严重危害。大鼠体内实验研究表明，酰胺类除草剂可通过一系列酶反应生成具有致癌作用的二烷基醌亚胺。部分酰胺类除草剂(如乙草胺)已被美国环保署列为b-2类致癌物。目前，酰胺类除草剂在土壤中的残留受到人们广泛的关注，但我国尚无水稻中除草剂的环境质量标准和配套的国家或行业标准监测分析方法。因此，建立一种有效测定水稻中除草剂残留量的分析方法具有重大意义。目前除草剂在土壤中残留分析的方法有毛细管电泳法(ce)、气相色谱法(gc)、高效液相色谱法(hplc)、气相色谱-质谱法(gc-ms)、液相色谱-串联质谱法(lc-ms/ms)。lc法与gc法相比，分离度差，缺乏专一性，灵敏度不高，不能满足低水平残留测定要求；lc/ms法由于仪器成本较高，应用还不是很广泛。加速溶剂萃取具有萃取时间短、萃取效率高、溶剂用量少和样品回收率高等优点，近年来已被广泛应用于土壤和沉积物中各类有机污染物的提取，但未见其用于水稻中多种除草剂提取的报道。本文将加速溶剂萃取与固相萃取小柱联合应用于水稻中除草剂分析，首次探究了加速溶剂萃取水稻中6种除草剂的提取效率，通过gc法同时测定水稻中丙草胺、敌草隆、环丙津、氟乐灵、吡氟禾草灵、异噁草酮的残留量。该方法灵敏度高、快速准确，可以满足水稻中6种除草剂测定的要求，能为批量水稻样品的检测提供科学的方法。技术实现要素：本发明的目的在于克服上述现有技术的缺点和不足，提供一种用气相色谱法检测水稻中除草剂含量的检测方法。本发明通过加速溶剂萃取法对上述化合物进行有效提取，大孔吸附树脂柱净化，并利用气相色谱法，来快速测定含量，提供了一种简便、成本较低、准确性好的检测方法。本发明通过下述技术方案实现：一种用气相色谱法检测水稻中除草剂含量的检测方法，包括如下步骤：步骤(1)：加速溶剂萃取称取适量水稻样品置于萃取池中，加入经活化处理的硅藻土和无水硫酸钠，混合均匀；萃取溶剂为甲醇和乙酸乙酯的混合溶剂，静态萃取，取上清液。步骤(2)：净化取d101型大孔吸附树脂柱，采用正己烷、乙酸乙酯预淋洗，向萃取柱加入上述上清液，采用甲醇进行洗脱，收集洗脱液，浓缩，复溶。步骤(3)：样品检测：将步骤(2)中溶液采用自动进样器进样，通过气相色谱检测，记录除草剂的气相信号值；步骤(4)：结果分析根据色谱图中的峰面积及其质量浓度的关系，标准曲线法定量。上述步骤(1)中水稻样品的质量是5g，加入的硅藻土是5g，萃取池的体积是50ml。上述步骤(1)中甲醇和乙酸乙酯的混合溶剂的体积比为1:3，加入体积为20ml。上述步骤(1)中萃取条件为温度80℃、压强1800pa，静态萃取时间10min。上述步骤(2)中的净化条件如下：正己烷和乙酸乙酯淋洗各2次，每次5ml，控制样品液流速3ml/min，甲醇洗脱用量30ml。上述步骤(2)中的浓缩复溶步骤为：水浴旋转蒸发，残留物采用甲醇复溶。上述步骤(3)中的气相色谱条件如下：色谱柱：db-35，30m×0.25mm×2.65μm；升温程序：初始温度为80℃，以20℃/min的速率升至160℃，保持1min，再以30℃的速率升至230℃；进样口温度为220℃；进样量为1μl，分流模式，分流比为10:1。上述步骤(3)中的检测条件如下：fid检测器，检测器温度250℃，载气为氮气，流速为1.2ml/min。本发明通过上述技术方案，建立了一种用气相色谱法检测水稻中除草剂含量的检测方法，该方法具有较好的精确度，并且快速、自动、实用；补充了现有技术的空白。d101型大孔吸附树脂柱能够很好的对水稻样品进行净化，得到较好的精度(rsd<3.20％)和准确性(回收率范围90.5％–104.8％)，本发明的气相色谱条件成功对6种除草剂进行有效分离，因此，适用于水稻中除草剂的分析。附图说明图1为6种除草剂标准品的色谱图，其中，1-6分别是丙草胺、敌草隆、环丙津、氟乐灵、吡氟禾草灵、异噁草酮。具体实施方式本发明的设计思想或同类物质的简单替代属于本发明的保护范围。下述所使用的实验方法若无特殊说明，均为本
技术领域：
现有常规的方法，所使用的配料或材料，如无特殊说明，均为通过商业途径可得到的配料或材料。下面通过实施例1-3对本发明进一步具体描述。所使用的仪器设备与试剂：安捷伦7890a气相色谱仪，带有氢火焰离子化检测器，db-35，db-35，30m×0.25mm×2.65μm；ase-200快速萃取仪(美国dionex公司)；d101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长12cm)。实验中除草剂标准品和其他试剂均为市售商品。实施例1样品的制备及测定一、萃取称取5g水稻样品置于50ml萃取池中，加入5g经活化处理的硅藻土和无水硫酸钠，混合均匀；萃取溶剂为甲醇和乙酸乙酯的混合溶剂(1:3)，温度80℃、压强1800pa，静态萃取10min，取上清液。二、净化取d101型大孔吸附树脂柱，采用正己烷和乙酸乙酯预淋洗(各5ml×2)，向萃取柱加入上述上清液，控制样品液流速3ml/min，采用30ml甲醇进行洗脱，收集洗脱液；水浴旋转蒸发，残留物采用甲醇复溶。色谱柱：db-35，30m×0.25mm×2.65μm；升温程序：初始温度为80℃，以20℃/min的速率升至160℃，保持1min，再以30℃的速率升至230℃；进样口温度为220℃；进样量为1μl，分流模式，分流比为10:1。fid检测器，检测器温度250℃，载气为氮气，流速为1.2ml/min。根据色谱图中的峰面积及其质量浓度的关系，标准曲线法定量。实施例2在0.01～1mg/l内，6种除草剂的线性方程及相关系数如表1所示。表1化合物线性方程相关系数丙草胺y＝0.8895x+0.36620.9994敌草隆y＝2.5856x-0.22540.9996环丙津y＝1.366x-0.0.89870.9997氟乐灵y＝0.9686x+0.03690.9998吡氟禾草灵y＝2.857x-0.59870.9998异噁草酮y＝0.6339x+0.33210.9993实施例3方法的精度及准确性本方法的精度是通过对水稻样品进行三次平行检测来衡量的。结果表明检测的相对标准偏差(rsd)低于3.20％，其中包括取样和gc检测的误差。本方法的准确性是通过加标回收率来衡量的。回收率的范围为90.5％–104.8％。本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12