用于判定危险期的肾损伤的标志物

本发明涉及用于判定手术和/或重症监护治疗中的危险期的肾损伤的标志物、用于确定手术和/或重症监护治疗中的危险期的肾损伤的分析方法、及用于判定手术和/或重症监护治疗中的危险期的肾损伤的分析系统。

背景技术：

手术和/或重症监护治疗医疗的目的是对构成人体的各器官系统的重症功能障碍运用高度的医疗技术使它们恢复或稳定化，从而实现生命维持。另一方面，肾脏在生命体内的作用是通过排出代谢物、调节血压、调节体液量和离子的功能来维持体内的稳态，肾疾病在手术和/或重症监护治疗中的并发会引起和扩大其它的器官衰竭。将在手术和/或重症监护治疗的危险期呈现不稳定的循环动态的中毒多重器官衰竭、败血症中肾功能急剧降低的状态称为急性肾损伤(aki)，有报道如果并发aki则死亡率显著上升。随着医疗进步，能目前为止对于属于高风险、不适合侵入性治疗的超高龄者等病例提供手术和/或重症监护治疗也成为危险期的aki增加的一个原因。在重症监护治疗室(icu)组中验证了aki在40～60％的病例中发病。虽然aki是肾脏产生的病况，但在多重器官衰竭、败血症这样的全身性疾病中的作用受到关注，也有除肾脏专科医师以外也要面对诊疗的特征。

认识到aki有必要更早期进行诊断、通过治疗干预来改善预后，提倡了rifle分类、akin诊断基准、kdigo诊断基准。已知在这些分类、基准中采用的血清肌酐在早期aki中的上升灵敏度低。另外，血清肌酐强烈受到肌肉量的影响，因此对于超高龄者中大量羸弱、长期卧床的患者特别不稳定，不能说是特异性的诊断标志物(非专利文献1)，因此，希望利用灵敏度、特异度不同的多个生物标志物的早期诊断，ngal、l-fabp被实用化。

逐渐明确了以往认为在哺乳类的活体内不存在的d-氨基酸存在于各种各样的组织中，承担生理功能。另外显示人血液中的d-氨基酸之中，d-丝氨酸、d-丙氨酸、d-脯酰胺、d-谷氨酸、d-天冬氨酸的量与血清肌酐的量相关，可以成为肾脏病的诊断标志物(非专利文献3、非专利文献4、非专利文献5)。进而公开了选自d-丝氨酸、d-苏氨酸、d-丙氨酸、d-天冬酰胺、d-别苏氨酸、d-谷胺酰胺、d-脯酰胺及d-苯丙氨酸中的一种或两种以上氨基酸为肾脏病的病况指标值(专利文献1)。此外显示，小鼠血液中的d-丝氨酸通过缺血再灌注处理会上升、以及小鼠尿中的d-丝氨酸通过缺血再灌注处理会减少(专利文献2、非专利文献6)。这些文献虽然是对于以小鼠为对象的急性肾损伤模型进行缺血再灌注处理，但经该处理受到肾损伤的小鼠都没有恢复肾功能而死亡，因此不是正确反映在人中有肾功能的可逆性的aki的病况的模型。另外，对于慢性肾脏病的预后预测，进行了识别血液中氨基酸的光学异构体的分析(非专利文献7)，但没有对于人的aki分析血液中的氨基酸光学异构体、发现生物标志物这样的先例。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2013/140785号

专利文献2：国际公开第2015/087985号

非专利文献

非专利文献1：slocum,j.l.等,translres.159:277(2012)

非专利文献2：kdigo2012clinicalpracticeguidelinefortheevaluationandmanagementofchronickidneydisease,kidneyinternationalsupplements1(2013)

非专利文献3：fukushima,t.等,biol.pharm.bull.18：1130(1995)

非专利文献4：nagata.yvivaoriginovol.18(no.2)(1990)第15次学术演讲会演讲要旨集

非专利文献5：ishida等,北里医学23：51～62(1993)

非专利文献6：sasabej.等,plosone(2014)vol.9,issue1,e86504

非专利文献7：kimurat.等,scientificreports6：26137doi:10.1038/srep26137

技术实现要素：

发明要解决的课题

目的在于，提供代替或补充血清肌酐等原有的急性肾损伤的诊断标志物的危险期的肾损伤的诊断标志物。

用于解决课题的手段

本发明者们对于能够用于诊断在重症监护治疗室治疗中的患者中的危险期的肾损伤的生物标志物进行了探索，令人惊奇地发现了由血液中的d-丙氨酸量或血液中的d-丙氨酸和l-丙氨酸量求得的指标与血清肌酐显示出极高的相关。由此，发现了由血液中的d-丙氨酸量或血液中的d-丙氨酸和l-丙氨酸量求得的指标成为危险期的肾损伤的诊断标志物，从而完成了本发明。因此，本发明涉及以下发明：

[1]用于判定危险期的肾损伤的标志物，通过基于血液中的d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值，来判定危险期的肾损伤。

[2]根据项目1所述的标志物，基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值是比或百分率。

[3]根据项目1或2所述的标志物，在接受手术和/或重症监护治疗的患者中判定危险期的肾损伤。

[4]根据项目1所述的标志物，接受手术和/或重症监护治疗的患者处于选自脱水、肾病综合征、肾小球肾炎、急进性肾小球肾炎、血压降低中的状态。

[5]接受手术和/或重症监护治疗的患者中的血液分析方法，该血液分析方法包括以下工序：

测定血液中的d-丙氨酸量、或d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的工序，

将基于d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值与危险期的肾损伤进行关联的工序。

[6]根据项目5所述的血液分析方法，基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值是比或百分率。

[7]根据项目5或6所述的血液分析方法，接受手术和/或重症监护治疗的患者处于选自脱水、肾病综合征、肾小球肾炎、急进性肾小球肾炎、血压降低中的状态。

[8]根据项目5～7中任一项所述的血液分析方法，通过进一步与肾功能标志物组合，从而用于断定危险期的病期或病况。

[9]根据项目8所述的血液分析方法，所述肾功能标志物是选自尿中ngal、血液中ngal、尿中il-18、尿中kim-1、尿中l-fabp、血液中肌酐、尿中肌酐、血液中半胱氨酸蛋白酶抑制剂c、尿蛋白、尿中白蛋白、尿中β2-mg、尿中α1-mg、尿中nag、egfr(肌酐、半胱氨酸蛋白酶抑制剂c)、血液中尿素氮中的至少一种标志物。

[10]诊断接受手术和/或重症监护治疗的患者中的危险期的肾损伤、然后治疗的方法，所述方法包括以下工序：

测定血液中的d-丙氨酸量或d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的工序，

由d-丙氨酸量、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值判断危险期的肾损伤的工序，

针对患有危险期的肾损伤的患者进行治疗干预的工序。

[11]根据项目10所述的方法，所述治疗干预是选自生活习惯改善、膳食指导、有效循环血量和/或血压的维持、肾功能替代疗法、血压管理、血糖值管理、免疫管理和脂肪管理中的至少一个。

[12]根据项目10或11所述的方法，作为所述治疗干预，对所述对象施与选自利尿剂、髓质液、等渗性晶体液、输液、升压药、钙拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂、交感神经阻滞剂、sglt2抑制剂、磺酰脲类药物、噻唑烷类药物、双胍类药物、α-葡糖苷酶抑制剂、格列奈类药物、胰岛素制剂、nrf2激活剂、免疫抑制剂、他汀类药物、贝特类药物、贫血治疗药、促红细胞生成素制剂、hif-1抑制剂、铁剂、电解质调节剂、钙受体激动剂、磷吸附剂、尿毒素吸附剂、dpp4抑制剂、epa制剂、烟酸衍生物、胆固醇转运蛋白抑制剂和pcsk9抑制剂中的至少一种药剂。

[13]用于确定接受手术和/或重症监护治疗的患者中的危险期的肾损伤的血液分析系统，该血液分析系统包括存储部、分析测定部、数据处理部和病况信息输出部，

所述存储部存储用于判定危险期的肾损伤的阈值，

所述分析测定部分离并定量所述血液中的d-丙氨酸量、或d-丙氨酸量和l-丙氨酸量，

所述数据处理部将基于所述患者的d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值与存储部所存储的所述阈值进行比较，判定危险期的肾损伤，

所述病况信息输出部输出关于危险期的肾损伤的信息。

[14]根据项目13所述的血液分析系统，基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值是比或百分率。

[15]根据项目13或14所述的血液分析系统，接受手术和/或重症监护治疗的患者处于选自脱水、肾病综合征、肾小球肾炎、急进性肾小球肾炎、血压降低中的状态。

[16]使包括输入部、输出部、数据处理部和存储部的信息处理装置确定危险期的肾损伤的程序，所述程序包括用于使所述信息处理装置执行以下工序的指令：

使从输入部输入的指标值的算式、和指标值的阈值存储在存储部，

使从输入部输入的d-丙氨酸的血液中的量、或d-丙氨酸和l-丙氨酸的血液中的量存储在存储部，

使数据处理部读取所存储的d,l-丙氨酸的血液中的量和指标值的算式，计算出指标值并存储在存储部，

使数据处理部读取所存储的指标值和指标值的阈值，将指标值与阈值进行比较，使输出部输出有无危险期的肾损伤。

发明的效果

根据本发明，能够判定危险期的肾损伤。

附图说明

图1：图1a是显示血液中的d-丙氨酸/l-丙氨酸比与血清肌酐的相关的散点图，图1b是显示血液中的d-丙氨酸/l-丙氨酸比与由血清肌酐求得的推算肾小球滤过量(egfr)的相关的散点图。

图2：图2a是显示血液中的d-丙氨酸量与血清肌酐的相关的散点图，图2b是显示血液中的d-丙氨酸量与由血清肌酐求得的推算肾小球滤过量(egfr)的相关的散点图。

图3：图3显示本发明的试样分析系统的构成图。

图4：图4是显示用于通过本发明的程序确定肾小球滤过率的动作的例子的流程图。

具体实施方式

本发明涉及用于通过基于血液中的d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值来判定危险期的肾损伤的标志物，还涉及住院患者和/或手术和/或重症监护治疗时的血液分析方法、输出关于危险期的肾损伤的信息的血液分析系统、及其动作程序。

所谓危险期的肾损伤，是指对急剧的肾功能降低通过利用肾功能替代疗法、血压管理、药剂的干预来控制尿毒症等症状，由此可以改善生命预后的状态。危险期的肾损伤也可以称为手术和/或重症监护治疗中的肾损伤，还可以称为与多重器官衰竭和/或败血症并发的肾损伤。

在重症监护治疗室(icu)住院的患者伴有心脏病(心力衰竭、心律不齐、瓣膜疾病、冠状动脉疾病、主动脉疾病等)、消化器官疾病(食道癌、胰腺癌、肝癌等)、脑疾病(脑梗塞、脑出血、蛛网膜下腔出血、痉挛、癫痫、脑肿瘤、脑动脉瘤等)、颈椎疾病、肾移植、肺炎、败血症等急剧的脱水和/或血压降低，如果发生肾损伤，则会引起和/或扩大进一步的其它器官衰竭。这样即使重症监护治疗中的急性肾损伤(aki)作为单一器官损伤发病，也可能并发多重器官衰竭，还可能作为多重器官衰竭的一个分症发生。

多数危险期的肾损伤根据kdigo指南通过尿量的降低和血清肌酐的上升来诊断。具体而言按照下述表进行急性肾脏病(aki)的分类。

表1.aki的疾病严重程度分类

另一方面，血清肌酐是肌肉的磷酸肌酸的代谢产物，已知它的量依赖于肌肉量。有研究指出血清肌酐在生成和排泄不是稳定状态的急性肾损伤发病时不会灵敏地反映精确的肾功能变化，在损伤的早期不会增加。另外，作为目前为止各种各样的治疗干预试验以失败告终的原因之一，推测是由于基于血清肌酐基准的aki诊断的准确度不够。

本发明的基于血液中d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值与接受重症监护治疗的患者的血清肌酐具有高的相关。这显示这些指标值成为用于判定危险期的肾损伤的标志物。已知通常对于健康正常者，血液中的d-丙氨酸量通过利用丙氨酸消旋酶、d-氨基酸氧化酶等酶的代谢系统(合成、分解)被精密控制，另一方面，在肾脏的肾小球滤过和/或再吸收能力有变化的情况下会变动，可以通过与血清肌酐不同的机制成为更灵敏的标志物。由于危险期的肾损伤由肾脏专科医师处理的情况少，因此早期适当的干预对生命预后影响较大，所以利用灵敏度高变动机制不同的多个标志物、通过面板化进行的诊断是有用。

急性肾损伤的原因大致分成肾前性、肾性、及肾后性的原因。所谓肾前性的原因，是指由全身性的疾病导致向肾脏的血流降低从而引起的情况，可能由脱水、休克、烧伤、大量出血、血压降低、充血性心力衰竭、肝硬化、肾动脉狭窄等造成。所谓肾性的原因，是指肾脏自肾有原因的情况，可以举出肾脏中的血液循环障碍、肾小球疾病、肾小管/间质疾病。作为引起肾脏中的血液循环障碍的疾病，可以举出双侧肾梗塞、肾动脉血栓、弥散性血管内凝血综合征、血栓性血小板减少性紫癜、溶血性尿毒症综合征等。作为肾小球疾病，可以举出肾病综合征、急性肾小球肾炎、急进性肾小球肾炎、狼疮肾炎(系统性红斑狼疮)、anca相关性血管炎、结节性多动脉炎等。这些原因都可能成为引起危险期的肾损伤的主要原因，特别是肾前性例如脱水症状、血压降低、出血、由心力衰竭带来的缺血、和/或肾性例如肾病综合征、急性肾小球肾炎、急进性肾小球肾炎、狼疮肾炎可能成为危险期的肾损伤的主要原因。

本发明中使用的指标值可以使用血液中的d-丙氨酸量本身，或者也可以使用基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值。所谓基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值，作为一例，可以用d-丙氨酸量与l-丙氨酸量之比(d-ala/l-ala或l-ala/d-ala)、d-丝氨酸量的百分率(d-ala/(d-ala+l-ala)×100等，只要能够判定危险期的肾损伤，就可以将任意的常数或年龄、体重、性别、bmi、egfr等任意变量进行加、减、乘、和/或除。在使用与氨基酸的光学异构体的量比作为指标值的情况下，有不需要根据试样的量和/或体积进行校正的优点。

可以通过将本发明的指标值与预先设定的阈值进行比较，来判定危险期的肾损伤。进一步也可以通过使用几个阶段的阈值来确定病期。阈值只要能够进行大规模调查就可以适当设定。另外，关于血清肌酐或推算肾小球滤过量，也可以通过与现在使用的基准相对应来设定。从灵敏度更好地判定危险期的肾损伤的观点考虑，优选对于基于d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值实施大规模调查。

根据本发明，判定危险期的肾损伤的对象可以是任意的对象，但从判定危险期的肾损伤的观点考虑，优选接受手术和/或重症监护治疗的患者。作为接受重症监护治疗的患者，可以举出病房中表现严重的症状的患者、急诊患者之中需要持续的状态管理的患者、在手术后需要高度的状态管理的患者等。血液试样可以在手术前、术中和术后任意时机获得。也可以经时地获得血液试样。

本发明的其他方案涉及手术和/或重症监护治疗中的血液分析方法，所述血液分析方法包括以下工序：

测定血液中的d-丙氨酸量、或d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的工序，

将基于d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值与危险期的肾损伤进行关联的工序。

本发明中的分析方法可以提供用于医师进行诊断的预备数据，也可以称为诊断的预备方法。使用这样的预备数据可以由医师来诊断急性肾损伤，但该分析方法可以由非医师的医疗协助者等进行，也可以由分析机构等进行。因此，本发明的分析方法也可以称为诊断的预备方法。该分析方法可以进一步包括将指标值与危险期的肾损伤的病况进行关联的工序。这样的分析方法可以由分析公司、分析技术者进行，并提供与肾损伤的病况相关联的结果。更优选在住院患者、特别是接受手术和/或重症监护治疗的患者中经时地分析。

本发明的其他方案中，通过将本发明的标志物进一步与肾功能标志物组合，可以进一步断定危险期的病期或病况。组合中使用的肾功能标志物可以是已知或开发中的标志物，作为一例，可以使用选自尿中ngal、血液中ngal、尿中il-18、尿中kim-1、尿中l-fabp、血液中肌酐、尿中肌酐、血液中半胱氨酸蛋白酶抑制剂c、尿蛋白、尿中白蛋白、尿中β2-mg、尿中α1-mg、尿中nag、egfr(肌酐、半胱氨酸蛋白酶抑制剂c)、血液中尿素氮中的至少一种标志物。通过使用多个标志物，能够适当地判定肾损伤开始期、肾损伤扩大期、肾损伤持续期、以及肾损伤修复期。

将指标值与危险期的肾损伤进行关联的工序可以将关于基于d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值的阈值、与计算出的指标值进行比较，在超过阈值的情况下确定伴有危险期的肾损伤。

在本发明中血液中的氨基酸量是将光学异构体分别分离而测定的氨基酸的量，可以指特定的血液量中的氨基酸量，也可以以浓度表示。血液中的氨基酸量在采取的血液中作为进行了离心分离、沉淀分离、或用于分析的前处理的试样中的量来测定。因此，血液中的氨基酸量可以作为采取的全血、血清、血浆等来自血液的血液试样中的量来测定。作为一例，在利用hplc的分析的情况下，规定量的血液所包含的特定光学异构体的氨基酸以色谱表示，可以根据对于峰的高度、面积、形状通过与标准品的比较和/或校准进行的分析来定量。另外，可以利用酶法，通过利用标准品的标准曲线的定量分析而计算出氨基酸浓度。

d-丙氨酸和l-丙氨酸量可以通过任意方法测定，例如可以通过手性柱色谱、利用酶法的测定、以及利用识别氨基酸的光学异构体的单克隆抗体的免疫学手法来定量。本发明中的试样中的d-丙氨酸和l-丙氨酸量的测定可以利用本领域技术人员周知的任何方法来实施。例如有色谱法、酶法(y.nagataetal.,clinicalscience,73(1987),105.analyticalbiochemistry,150(1985),238.,a.d'anielloetal.,comparativebiochemistryandphysiologypartb,66(1980),319.journalofneurochemistry,29(1977),1053.,a.bernemanetal.,journalofmicrobial&biochemicaltechnology,2(2010),139.,w.g.gutheiletal.,analyticalbiochemistry,287(2000),196.,g.mollaetal.,methodsinmolecularbiology,794(2012),273.,t.itoetal.,analyticalbiochemistry,371(2007),167.等)、抗体法(t.ohgusuetal.,analyticalbiochemistry,357(2006),15.,等)、气相色谱(gc)(h.hasegawaetal.,journalofmassspectrometry,46(2011),502.,m.c.waldhieretal.,analyticalandbioanalyticalchemistry,394(2009),695.,a.hashimoto,t.nishikawaetal.,febsletters,296(1992),33.,h.bruckneranda.schieber,biomedicalchromatography,15(2001),166.,m.jungeetal.,chirality,19(2007),228.,m.c.waldhieretal.,journalofchromatographya,1218(2011),4537.等)、毛细管电泳法(ce)(h.miaoetal.,analyticalchemistry,77(2005),7190.,d.l.kirschneretal.,analyticalchemistry,79(2007),736.,f.kitagawa,k.otsuka,journalofchromatographyb,879(2011),3078.,g.thorsenandj.bergquist,journalofchromatographyb,745(2000),389.等)、高效液相色谱(hplc)(n.nimuraandt.kinoshita,journalofchromatography,352(1986),169.,a.hashimotoetal.,journalofchromatography,582(1992),41.,h.bruckneretal.,journalofchromatographya,666(1994),259.,n.nimuraetal.,analyticalbiochemistry,315(2003),262.,c.mulleretal.,journalofchromatographya,1324(2014),109.,s.einarssonetal.,analyticalchemistry,59(1987),1191.,e.okumaandh.abe,journalofchromatographyb,660(1994),243.,y.gogamietal.,journalofchromatographyb,879(2011),3259.,y.nagataetal.,journalofchromatography,575(1992),147.,s.a.fuchsetal.,clinicalchemistry,54(2008),1443.,d.gordesetal.,aminoacids,40(2011),553.,d.jinetal.,analyticalbiochemistry,269(1999),124.,j.z.minetal.,journalofchromatographyb,879(2011),3220.,t.sakamotoetal.,analyticalandbioanalyticalchemistry,408(2016),517.,w.f.visseretal.,journalofchromatographya,1218(2011),7130.,y.xingetal.,analyticalandbioanalyticalchemistry,408(2016),141.,k.imaietal.,biomedicalchromatography,9(1995),106.,t.fukushimaetal.,biomedicalchromatography,9(1995),10.,r.j.reischletal.,journalofchromatographya,1218(2011),8379.,r.j.reischlandw.lindner,journalofchromatographya,1269(2012),262.,s.karakawaetal.,journalofpharmaceuticalandbiomedicalanalysis,115(2015),123.,等)。

本发明中的光学异构体的分离分析系统可以组合多种分离分析。更具体而言，可以通过利用光学异构体的分析方法来测定试样中的d-/l-氨基酸量，所述分析方法的特征在于包括以下步骤：使包含具有光学异构体的成分的试样，与作为流动相的第一液体一起通过作为固定相的第一柱填充剂，从而分离所述试样的所述成分的步骤；在多回路单元中分别保留所述试样的各个所述成分的步骤；将在所述多回路单元中各自保留的所述试样的各个所述成分，与作为流动相的第二液体一起，通过流路供于作为固定相的具有光学活性中心的第二柱填充剂，从而分割所述试样的各个成分所包含的所述光学异构体的步骤；以及检测所述试样的各个成分所包含的所述光学异构体的步骤(专利第4291628号)。hplc分析有时会预先用邻苯二甲醛(opa)、4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑(nbd-f)这样的荧光试剂将d-和l-氨基酸衍生物化、或用n-叔丁氧羰基-l-半胱氨酸(boc-l-cys)等进行非对映异构体化(浜濑健司和财津洁，分析化学，53卷，677-690(2004))。代替地可以通过利用识别氨基酸的光学异构体的单克隆抗体、例如与d-丙氨酸、l-丙氨酸等特异性结合的单克隆抗体的免疫学手法来测定d-氨基酸。另外，以d-型异构体和l-型异构体的合计量为指标的情况下，不需要分离d-型异构体和l-型异构体进行分析，可以不区别d-型异构体和l-型异构体地分析氨基酸。这种情况下也可以通过酶法、抗体法、gc、ce、hplc分离和定量。

图2是本发明的试样分析系统的构成图。图2所示的本发明的试样分析系统10以能够实施本发明的分析方法和检查方法的方式构成。这样的试样分析系统10包括存储部11、输入部12、分析测定部13、数据处理部14、输出部15，能够分析血液试样，输出关于危险期的肾损伤的信息。更具体而言涉及血液分析系统，在本发明的试样分析系统10中，

存储部11存储用于判别从输入部12输入的危险期的肾损伤的指标值的阈值，

分析测定部13分离定量血液中的d-丙氨酸量、或d-丙氨酸量和l-丙氨酸量，

数据处理部14基于血液中的d-丙氨酸量、或d-丙氨酸量和l-丙氨酸量计算出指标值，

数据处理部14通过与在存储部11中存储的阈值进行比较来判别危险期的肾损伤的信息，

输出部15输出关于危险期的肾损伤的信息。

存储部11具有ram、rom、闪存等存储装置、硬盘驱动器等固定盘装置、或软盘、光盘等可移动的存储装置等。除经分析测定部测定的数据、从输入部输入的数据和指示、经数据处理部进行的演算处理结果等以外，存储部还存储信息处理装置的各种处理中使用的计算机程序、数据库等。计算机程序可以介由例如cd-rom、dvd-rom等计算机可读取的记录介质、和/或互联网安装。计算机程序用公知的安装程序等安装在存储部。

输入部12是接口(interface)等，也包括键盘、鼠标等操作部。由此输入部能够输入经分析测定部13测定的数据、由数据处理部14进行的演算处理的指示等。另外，例如在分析测定部13位于外部的情况下，输入部12可以与操作部分开地，包括能够介由网络和/或存储介质输入测定的数据等的接口部。

分析测定部13进行血液试样中的氨基酸的d-型异构体和l-型异构体的量的测定工序。因此，分析测定部13具有能够分离和测定氨基酸的d-型异构体和l-型异构体的构成。氨基酸可以逐个分析，也可以对于一部分或全部种类的氨基酸汇总分析。没有意图要将分析测定部13限定于以下形式，例如可以是具备试样导入部、光学拆分率柱、检测部的高速液相色谱系统。分析测定部13可以与试样分析系统分别地构成，也可以将测定数据等用网络和/或存储介质介由输入部12输入。本发明的分析测定部13可以进一步具备样品获得部，可以从样品获得部经时地获得样品，将获得的样品供于分析测定部。

数据处理部14根据存储部所存储的程序，对经分析测定部13测定而存储在存储部11中的数据执行各种演算处理。演算处理通过数据处理部所包含的处理器或cpu进行。该处理器或cpu包括控制分析测定部13、输入部12、存储部11、及输出部15的功能模块，能够进行各种控制。这些各部可以由各自独立的集成电路、微处理器、固件等构成。数据处理部14按照算式计算出基于d-丙氨酸量的指标值、或基于d-丙氨酸量和l-丙氨酸量的指标值，与存储部中存储的指标值的阈值进行比较，从而判定危险期的肾损伤。

输出部15以输出作为经数据处理部进行演算处理的结果的有无危险期的肾损伤的方式构成。输出部15可以是直接显示演算处理的结果的液晶显示器等显示装置、打印机等输出单元，也可以是用于向外部存储装置输出或介由网络输出的接口部。

本发明的进而其他方案涉及使上述血液分析系统、信息处理装置动作的程序。图3是显示用于使程序输出有无危险期的肾损伤和/或程度的动作的例子的流程图。具体而言，本发明的程序是使包括输入部、输出部、数据处理部、存储部的信息处理装置确定肾小球滤过率的程序。本发明的程序包括用于使所述信息处理装置执行以下工序的指令：

使从输入部输入的指标值的算式、和指标值的阈值存储在存储部，

使从输入部输入的d-丙氨酸的血液中的量、或d-丙氨酸和l-丙氨酸的血液中的量存储在存储部，

使数据处理部读取所存储的d,l-丙氨酸的血液中的量和指标值的算式，计算出指标值并存储在存储部，

使数据处理部读取所存储的指标值和指标值的阈值，将指标值与阈值进行比较，使输出部输出有无危险期的肾损伤和/或程度。

本发明的程序可以存储在存储介质中，也可以介由互联网或lan等电信线路提供。

在信息处理装置具备分析测定部的情况下，代替从输入部输入d-丙氨酸量的值，可以包括用于使信息处理装置执行分析测定部从血液试样中测定该值并存储在存储部的指令。

在通过本发明弄清楚了对象患有危险期的肾损伤的情况下，可以通过监测生物标志物进行治疗方针的确定和/或治疗效果的判定。不限定于以下的情况，在判定了危险期的肾损伤发病的情况下，进行治疗干预以便维持有效循环血液量和血压。另外，在施与了具有肾毒性的药物的情况下，可以进行药物施与的中止。为了维持有效循环血液量和/或血压，可以施与利尿剂、髓质液、等渗性晶体液、输液、升压药(去甲肾上腺素、辛弗林、苯福林、甲氧明、美芬丁胺等)。进而作为治疗干预，可以为了生活习惯改善、膳食指导、血压管理、贫血管理、电解质管理、尿毒素管理、血糖值管理、免疫管理、脂肪管理而进行指导或利用给药的治疗。作为生活习惯改善，推荐戒烟及向bmi值小于25的减重等。作为膳食指导，进行减盐及蛋白质限制。作为血压管理，管理以使其为130/80mmhg以下，可以根据情况施与高血压治疗药。作为高血压治疗药，可以使用利尿剂(噻嗪系利尿剂例如三氯噻嗪、苄氢氯噻嗪、氢氯噻嗪，类噻嗪系利尿剂例如美替克仑、吲达帕胺、曲帕胺、美夫西特，袢利尿剂例如呋塞米，保钾性利尿剂/醛固酮拮抗剂例如氨苯蝶啶、螺内酯、依普利酮等)、钙拮抗剂(二氢吡啶系例如硝苯地平、氨氯地平、依福地平、西尼地平、尼卡地平、尼索地平、尼群地平、尼伐地平、巴尼地平、非洛地平、贝尼地平、马尼地平、阿折地平、阿雷地平，苯二氮卓系、地尔硫卓等)、血管紧张素转换酶抑制剂(卡托普利、依那普利、阿拉普利、地拉普利、西拉普利、赖诺普利，贝那普利、咪达普利、替莫普利、喹那普利、群多普利、培哚普利叔丁胺等)、血管紧张素受体拮抗剂(血管紧张素ⅱ受体拮抗剂例如氯沙坦、坎地沙坦、缬萨坦、替米沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、阿齐沙坦等)、交感神经阻滞剂(β阻滞剂例如阿替洛尔、比索洛尔、倍他洛尔、美托洛尔、醋丁洛尔、塞利洛尔、普萘洛尔、纳多洛尔、卡替洛尔、吲哚洛尔、尼普地洛、氨磺洛尔、阿罗洛尔、卡维地洛、拉贝洛尔、贝凡洛尔、乌拉地尔、特拉唑嗪、哌唑嗪、多沙唑嗪、布那唑嗪等)等。作为贫血治疗药，使用促红细胞生成素制剂、铁剂、hif-1抑制剂等。作为电解质调节剂，使用钙受体激动剂(西那卡塞、依特卡肽等)、磷吸附剂。作为尿毒素吸附剂，使用活性炭等。管理血糖值以使其小于hba1c6.9％，根据情况施与降糖药。作为降糖药，使用sglt2抑制剂(伊格列净、达格列净、鲁格列净、托格列净、坎格列净、恩格列净等)、dpp4抑制剂(西他列汀磷酸、维格列汀、沙格列汀、阿格列汀、利拉利汀、特力利汀、曲格列汀、阿拉格列汀、奥格列汀等)、磺酰脲类药物(甲苯磺丁脲、醋酸己脲、氯磺丙脲、格列吡脲、格列本脲、格列齐特、格列美脲等)、噻唑烷类药物(吡格列酮等)、双胍类药物(二甲双胍、丁福明等)、α-葡糖苷酶抑制剂(阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇等)、格列奈类药物(那格列奈、米格列奈、瑞格列奈等)、胰岛素制剂、nrf2激活剂(甲基巴多索隆等)等。作为免疫管理，使用免疫抑制剂(类固醇类、他克莫司、抗cd20抗体、放线酮、霉酚酸酯(mmf)等)。脂肪管理时，管理以使其小于ldl-c120mg/dl，根据情况使用脂质异常症治疗药，例如他汀类药物(瑞舒伐他汀、匹伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀他汀、辛伐他汀他汀、普伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀等)、贝特类药物(氯贝特、苯扎贝特、非诺贝特、克利贝特等)、烟酸衍生物(生育酚烟酸酯、尼可莫尔、戊四烟酯等)、胆固醇转运蛋白抑制剂(依泽替米贝等)、pcsk9抑制剂(依洛尤单抗等)epa制剂等。任何药剂的剂型都可以是单剂也可以是合剂。

肾功能降低显著而对生命预后造成危险的情况下，可以施行腹膜透析、血液透析、持续血液透析滤过、血液置换(血浆交换、血浆吸附等)、肾移植这样的肾代替疗法

本说明书中所提到的全部文献其整体通过引用援引到本说明书中。

以下说明的本发明的实施例仅以例示为目的，不是限定本发明的技术范围。本发明的技术范围仅通过权利要求范围的记载来限定。以不脱离本发明的主旨为条件，可以进行本发明的变更，例如本发明的构成要件的追加、删除及替换。

实施例

材料和方法

材料

氨基酸的标准品和hplc级的乙腈从ナカライテスク(京都)购买。hplc级的甲醇、三氟乙酸、硼酸等从和光纯药(大阪)购买。水用mill-qgradienta10系统纯化。

受检者集合

在2013年～2017年于金泽大学医院住院、患有急性肾脏病(aki)接受了重症监护治疗的患者中，获得血液试样。排除接受了利用免疫抑制剂和抗生素的治疗的患者。急性肾脏病患者的临床信息如以下表2所述。对于全部的患者检查基线时和aki时有无血清肌酐、尿蛋白、尿潜血、糖尿病。另外，按照下述d-氨基酸的测定法，测定血液中的d-ala浓度和d-ala/l-ala比。全部患者通过aki时的治疗干预而生命预后良好。

血液中的d-氨基酸的测定

样品制备

来自人血浆的样品制备如下所述进行：

将20倍体积的甲醇添加到血浆中完全混合。离心后，将由甲醇匀浆得到的上清10μl的转移到褐色管中，使其减压干燥。在残渣中添加20μl的200mm硼酸钠缓冲液(ph8.0)和5μl的荧光标记试剂(无水mecn中有40mm的4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑(nbd-f))，接着在60℃加热2分钟。加入75μl的0.1％tfa水溶液(v/v)终止反应，然后将2μl的反应混合液供于二维hplc。

利用二维hplc的氨基酸光学异构体的定量

用以下二维hplc系统定量氨基酸光学异构体。用反相柱(ksaarp，1.0mmi.d.×400mm；株式会社资生堂)通过流动相(5～35％mecn、0～20％thf、及0.05％tfa)分离、溶出氨基酸的nbd衍生物。设定柱温为45℃，流动相的流速为25μl/分钟。对分离出来的氨基酸的级分用多回路阀进行分级，连续用手性柱(ksaacsp-001s，1.5mmi.d.×250mm；资生堂)进行光学拆分。根据氨基酸的保留使用包含柠檬酸(0～10mm)或甲酸(0～4％)的meoh-mecn的混合用液作为流动相。nbd-氨基酸用470nm的激发光在530nm下进行荧光检测。nbd-氨基酸的保留时间通过氨基酸光学异构体的标准品鉴定，通过标准曲线定量。

将aki时的血清肌酐与d-丙氨酸/l-丙氨酸比制图成散点图，求得相关系数，结果为r＝0.9(图1a)。另外，将由aki时的血清肌酐求得的推算肾小球滤过量与d-丙氨酸/l-丙氨酸比制图成散点图，求得相关系数，结果为r＝0.93(图1b)。另外，将血清肌酐与d-丙氨酸量制图成散点图，求得相关系数，结果为r＝0.8(图2a)。将由aki时的血清肌酐求得的推算肾小球滤过量与d-丙氨酸量制图成散点图，求得相关系数，结果为r＝0.93(图2b)。由这些结果，与在危险期作为肾损伤的标志物的血清肌酐同样地，能够使用血液中的d-丙氨酸/l-丙氨酸比和d-丙氨酸量作为标志物。