本发明属于载玻片
技术领域：
，尤其涉及一种防脱载玻片的制备方法。
背景技术：
：近些年来，免疫组化在体外检测中广泛应用，石蜡切片制作植物切片和组织切片时需用粘贴剂，将切成的蜡带粘附在玻片上而且经染色和各种处理后要保证不脱落。常规切片染色用蛋白粘贴剂，明胶粘贴剂，火棉胶粘贴剂即可，但在一些特殊组化染色，如免疫组化往往经不起反复振荡洗涤、胰酶消化等处理过程，造成脱片，影响观察与结果分析。为保证免疫组化实验的正常进行，要求在贴片前对载玻片作适当处理，必须在清洗干净的玻片上进行粘贴剂的处理以防脱片。因此为了解决该问题，我们设计了一种防脱载玻片的制备方法。技术实现要素：本发明目的在于提供一种防脱载玻片的制备方法，以解决组织免疫学实验过程中样本脱片的问题，以及提高细胞免疫学实验过程中细胞的吸附效率及吸附稳定性。为实现上述目的，本发明的一种防脱载玻片的制备方法的具体技术方案如下：本发明使用一种防脱载玻片的制备方法，具体制备过程如下：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将甲壳素称取一定量溶于相应体积水中。再加入相应体积的无水乙醇，充分搅拌均匀使之充分溶解无絮状物。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。3：烘干将上完胶液的玻片放入恒温干燥箱内干燥，干燥条件：50℃，15～20min。其中最优的方案为：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将0.1g-0.4g甲壳素溶于1.5-6ml水，加入90ml-360ml无水乙醇，搅拌15min，充分溶解至无絮状。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。3：烘干将上完胶液的玻片放入恒温干燥箱内干燥，干燥条件：50℃，15～20min。本发明的一种防脱载玻片的制备方法具有以下优点：利用甲壳素的黏附性将样品有效的保存于玻片上，且利用最优配方提高样品的吸附效率以及样品吸附后的稳定性；组织免疫学实验中样品脱片率大大降低；细胞免疫学实验中细胞的吸附效率大大提高，且吸附牢固。具体实施方式为了更好地了解本发明的目的、结构及功能，下面结合实施例，对本发明一种防脱载玻片的制备方法做进一步详细的描述。实施例1：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将0.2g甲壳素溶于3ml水。再加入180ml无水乙醇。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。3：烘干将上完胶液的玻片放入恒温干燥箱内干燥，干燥条件：50℃，15～20min。实施例2：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将0.1g甲壳素溶于3ml水。再加入180ml无水乙醇。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。3：烘干将上完胶液的玻片放入恒温干燥箱内干燥，干燥条件：50℃，15～20min。实施例3：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将0.3g甲壳素溶于3ml水，再加入180ml无水乙醇。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。实施例4：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将0.4g甲壳素溶于3ml水。再加入180ml无水乙醇。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。实施例5：1：处理玻片将纯化水加热至70℃，按洗衣粉(立白无磷洗衣粉)：纯化水质量比为1:500的比例将洗衣粉加入热水中，搅拌至全溶，溶解后静置。使载玻片完全浸泡在洗衣粉水中。浸泡30分钟，整个浸泡过程保持水温在50℃以上。浸泡完成后，立刻放在活水下冲洗，直到冲洗至无泡沫，无印记残留。将清洗干净的载玻片放入95％乙醇中脱水1-2分钟，取出。待载玻片上的醇自然挥发，放入烘箱中保存备用。2：上胶a:防脱胶液配置，将0.5g甲壳素溶于3ml水，再加入180ml无水乙醇。b:载玻片正面朝上，水平放置在有机玻璃板上，每摆满一块有机玻璃板检查玻片摆放的正反，避免上胶时出现点反的情况，同时控制环境湿度：低于60％，准备上胶。用微量移液器吸取(20±5)μl防脱胶液，将其点于载玻片圆形区域内，使防脱胶液在载玻片上自然展开。测试方法如下：将上述制得的防脱载玻片吸附剂，均匀涂抹于普通载玻片上特定部位，烘干将上述具有吸附剂的防脱载玻片用于组织及细胞免疫学实验，组织免疫学主要是在样片吸附稳定性进行测定。石蜡切片，冷冻切片等样品吸附于防脱载玻片上，进行后续组织免疫学实验，完成后观察样品吸附情况。细胞免疫学实验主要是在首次细胞吸附效率，以及吸附细胞的稳定性进行测定。将一定数目的细胞沉降5min、10min、20min于防脱载玻片上，显微镜下观察计数。后续进行常规he染色，巴氏染色，细胞免疫学实验，完成后再次显微镜下观察计数。测试结果如表1所示：表1.实验组组织样品吸附稳定性细胞样品吸附稳定性细胞样品吸附效率实施例199％99％95％实施例295％96％90％实施例393％92％87％实施例496％95％85％实施例590％89％82％组织免疫学实验中，样品吸附稳定性为99％。细胞免疫学实验中吸附效率为98％，吸附稳定性97％。可以理解，本发明是通过一些实施例进行描述的，本领域技术人员知悉的，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以对这些特征和实施例进行各种改变或等效替换。另外，在本发明的教导下，可以对这些特征和实施例进行修改以适应具体的情况及材料而不会脱离本发明的精神和范围。因此，本发明不受此处所公开的具体实施例的限制，所有落入本申请的权利要求范围内的实施例都属于本发明所保护的范围内。当前第1页12