一种用于检测Vav3蛋白的试剂盒及其应用的制作方法

文档序号:23312695发布日期:2020-12-15 11:44阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于检测vav3蛋白的试剂盒,其特征在于,包括vav3蛋白抗体、封闭液、抗小鼠生物素化二抗、hrp标记的链亲和素和dab显色液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述封闭液为10%的山羊血清。

3.权利要求1~2任一所述的试剂盒在胃癌预后中的应用。

4.一种胃癌患者的预后方法,其特征在于,包括如下步骤:

(a)获取胃癌患者肿瘤组织并进行石蜡切片、脱蜡、水化、抗原修复,得到组织切片;

(b)将组织切片置于3%h2o2-甲醇液中浸泡、清洗;

(c)在清洗后的组织切片上滴加封闭液并进行孵育;

(d)去除组织切片表面液体,并滴加vav3蛋白抗体进行孵育、清洗;

(e)在清洗后的组织切片上滴加抗小鼠生物素化二抗进行孵育、清洗;

(f)将dab显色液滴加置清洗后的组织切片上进行显色、冲洗、复染、盐酸酒精分化、脱水、透明、封片、镜检;

(g)根据镜检结果对胃癌患者进行预后。

5.根据权利要求4所述的预后方法,其特征在于,所述根据镜检结果对胃癌患者进行预后包括:镜检结果若为阳性,则该胃癌患者存活寿命<5年;若为阴性,则该胃癌患者寿命≥5年。

6.根据权利要求4所述的预后方法,其特征在于,所述步骤(a)中还包括:采用pbs溶液浸泡组织切片10min。

7.根据权利要求4所述的预后方法,其特征在于,所述步骤(b)中,浸泡时间为8~12min,清洗为采用pbs进行清洗3次,每次清洗时间为2min。

8.根据权利要求4所述的预后方法,其特征在于,所述步骤(c)中,封闭液滴加至能够覆盖组织切片,孵育时间为8~12min。

9.根据权利要求4所述的预后方法,其特征在于,所述步骤(d)中,孵育时间为30~60min,清洗为采用pbs进行清洗3次,每次清洗时间为2min。

10.根据权利要求4所述的预后方法,其特征在于,所述步骤(e)中,孵育时间为8~12min;清洗为采用pbs进行清洗3次,每次清洗时间为2min;所述步骤(f)中,显色时间为2~5min。


技术总结
本发明公开了一种用于检测Vav3蛋白的试剂盒,其特征在于,包括Vav3蛋白抗体、封闭液、抗小鼠生物素化二抗、HRP标记的链亲和素和DAB显色液;本发明试剂盒能够基于免疫组织化学法实现对患者肿瘤组织中Vav3蛋白的检测,通过对固定在基底上的Vav3抗体和抗原进行结合、显色确定肿瘤组织中是否含有Vav3蛋白,并可以根据表达情况准确判断患者预后。

技术研发人员:檀碧波
受保护的技术使用者:檀碧波
技术研发日:2020.08.27
技术公布日:2020.12.15
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