苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法与流程

文档序号:26240489发布日期:2021-08-10 16:43阅读:来源:国知局

技术特征:

1.苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,包括链霉亲和素羧基磁颗粒、含有化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的缓冲液ⅱ和含有偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原的缓冲液ⅲ;

所述缓冲液ⅱ包括0.01wt%~0.06wt%的添加剂,添加剂为聚氨丙基双胍、聚六亚甲基双胍中的一种或两种。

2.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述添加剂为0.01wt%~0.03wt%聚氨丙基双胍和0.01wt%~0.03wt%聚六亚甲基双胍。

3.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述链霉亲和素羧基磁颗粒的粒径是2~3μm。

4.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体中,苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物的物质的量比是1:(3~20);所述化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。

5.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原中,苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物的物质的量比为1:(5~20);所述偶联标记物为生物素或衍生物。

6.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,包括r1试剂、r2试剂和r3试剂;

所述r1试剂包括链霉亲和素羧基磁颗粒和缓冲液ⅰ,r1试剂中链霉亲和素羧基磁颗粒的质量百分浓度为0.01%~1%;

所述r2试剂包括化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体和缓冲液ⅱ,r2试剂中化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的浓度为0.1~2.0μg/ml;

所述r3试剂包括偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原和缓冲液ⅲ,r3试剂中偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原的浓度为0.2~3.0μg/ml。

7.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,所述缓冲液ⅰ包括100mmmes和0.02%吐温-20,ph为6.0~6.5;

所述缓冲液ⅱ包括100~500mmpb、0.01%~0.1%吐温-20、0.01%~0.03%聚氨丙基双胍和0.01%~0.03%聚六亚甲基双胍,ph为6.0;

所述缓冲液ⅲ包括100~500mmpb和0.01%~0.1%吐温-20,ph为6.0。

8.根据权利要求1所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒中还包括校准品;所述校准品包括浓度分别为0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液。

9.权利要求1~8所述的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,其特征在于,本发明还提供上述苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的制备方法,包括以下步骤:

步骤一、制备r1试剂

将链霉亲和素羧基磁颗粒溶液放置于磁分离器上,直至上清无混浊,弃上清,留取磁颗粒,使用缓冲液ⅰ清洗磁颗粒后,再用缓冲液ⅰ配成磁颗粒质量百分浓度为0.02%~1%的固相试剂,即为r1试剂;

步骤二、制备r2试剂

先将苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中,保证苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体位于离心管底部位置后加入碳酸缓冲液,充分混匀,混匀后加入含有化学发光标记物的dmf溶液,经封闭、纯化,得到化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体,最后将收集好的化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体用缓冲液ⅱ稀释至终浓度为0.1~2.0μg/ml,即为r2试剂;

步骤三、制备r3试剂

取苗勒氏管抑制物受体抗原,用ph为6.0~6.5的tris缓冲液透析纯化后加入已活化的长链磺化生物素,经封闭、纯化,得到偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原,最后将收集好的偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原用缓冲液ⅲ稀释至终浓度为0.1~2.0μg/ml,即为r3试剂。


技术总结
本发明涉及一种苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法,属于试剂盒技术领域。本发明的试剂盒,包括链霉亲和素羧基磁颗粒、含有化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的缓冲液Ⅱ和偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体衍生物;其中,缓冲液Ⅱ包括0.01wt%~0.06wt%的添加剂,添加剂为聚氨丙基双胍、聚六亚甲基双胍中的一种或两种。该试剂盒操作简单、无污染、灵敏度高且检测范围宽。

技术研发人员:张旭东;李冬梅;孟令敏;高威;孙成艳
受保护的技术使用者:迪瑞医疗科技股份有限公司
技术研发日:2021.04.23
技术公布日:2021.08.10
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