苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法与流程

本发明属于试剂盒
技术领域：
，具体涉及一种苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。
背景技术：
：在辅助生殖技术方面，如果能准确地预测卵巢反应，制定个体化刺激方案，能够一定程度的提高妊娠率，降低并发症发生的风险。在始基卵泡向生长卵泡的转换期和早窦卵泡期，苗勒氏管抑制物受体(misr)直接或间接影响卵泡的发育过程，可抑制卵泡的生长，防止卵泡过快、过早消耗，保存卵巢的储备功能。现有技术中，测定苗勒氏管抑制物受体的方法寥寥无几。有鉴于此，有必要提供一种操作简单、无污染、灵敏度高、检测范围宽的苗勒氏管抑制物受体的检测方法。技术实现要素：本发明提供一种苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，该试剂盒操作简单、无污染、灵敏度高且检测范围宽。本发明解决上述技术问题采取的技术方案如下：本发明提供一种苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒，包括链霉亲和素羧基磁颗粒、含有化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的缓冲液ⅱ和含有偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原的缓冲液ⅲ；所述缓冲液ⅱ包括0.01wt％～0.06wt％的添加剂，添加剂为聚氨丙基双胍、聚六亚甲基双胍中的一种或两种。优选的是，所述添加剂为0.01wt％～0.03wt％聚氨丙基双胍和0.01wt％～0.03wt％聚六亚甲基双胍。优选的是，所述链霉亲和素羧基磁颗粒的粒径是2～3μm。优选的是，所述化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体中，苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物的物质的量比是1:(3～20)。优选的是，所述化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。优选的是，所述偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原中，苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物的物质的量比为1:(5～20)。优选的是，所述偶联标记物为生物素或衍生物。优选的是，所述苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒，包括r1试剂、r2试剂和r3试剂；所述r1试剂包括链霉亲和素羧基磁颗粒和缓冲液ⅰ，r1试剂中链霉亲和素羧基磁颗粒的质量百分浓度为0.01％～1％；所述r2试剂包括化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体和缓冲液ⅱ，r2试剂中化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的浓度为0.1～2.0μg/ml；所述r3试剂包括偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原和缓冲液ⅲ，r3试剂中偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原的浓度为0.2～3.0μg/ml。更优选的是，所述r1试剂中链霉亲和素羧基磁颗粒的质量百分浓度为0.072％。更优选的是，所述缓冲液ⅰ包括100mmmes和0.02％吐温-20，ph为6.0～6.5。更优选的是，所述缓冲液ⅱ包括100～500mmpb、0.01％～0.1％吐温-20、0.01％～0.03％聚氨丙基双胍和0.01％～0.03％聚六亚甲基双胍，ph为6。更优选的是，所述缓冲液ⅲ包括100～500mmpb和0.01％～0.1％吐温-20，ph为6.0。优选的是，该试剂盒中还包括校准品；所述校准品包括浓度分别为0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液。本发明还提供上述苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：步骤一、制备r1试剂将链霉亲和素羧基磁颗粒溶液放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒，使用缓冲液ⅰ清洗磁颗粒后，再用缓冲液ⅰ配成磁颗粒质量百分浓度为0.02％～1％的固相试剂，即为r1试剂；步骤二、制备r2试剂先将苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中，保证苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体位于离心管底部位置后加入碳酸缓冲液，充分混匀，混匀后加入含有化学发光标记物的dmf溶液，经封闭、纯化，得到化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体，最后将收集好的化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体用缓冲液ⅱ稀释至终浓度为0.1～2.0μg/ml，即为r2试剂；步骤三、制备r3试剂取苗勒氏管抑制物受体抗原，用ph为6.0～6.5的tris缓冲液透析纯化后加入已活化的长链磺化生物素(sulfo-nhs-lc-biotin)，经封闭、纯化，得到偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原，最后将收集好的偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原用缓冲液ⅲ稀释至终浓度为0.1～2.0μg/ml，即为r3试剂。与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒具有灵敏度高、准确定量、无放射性风险及样本需求量少等优点。具体来讲：1、本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒采用链霉亲和素羧基磁颗粒与生物素标记的抗体可以牢牢的结合在一起，减少非特异性吸附，提高测试样本的准确度，抗干扰能力强。2、本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒选择吖啶酯等为化学发光免疫分析系统的标记材料，该材料由激发态回到基态时产生的能量跃迁为直接化学发光，不需要酶的参与，节约时间及成本，且吖啶酯的化学发光免疫分析系统线性范围宽。3、本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒与化学发光免疫检测仪器组成封闭系统，试剂、样本的添加及检测任务均由仪器自动完成，系统误差小，降低了人为操作的误差，提高了整个系统的灵敏度与准确度，并且实现无人值守。附图说明为了更清楚地说明本发明实施方式中的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。图1为本发明实施例4的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的标准曲线图。具体实施方式为了进一步理解本发明，下面对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。本发明提供的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒，包括链霉亲和素羧基磁颗粒、含有化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的缓冲液ⅱ和含有偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原(衍生物)的缓冲液ⅲ。上述技术方案中，链霉亲和素羧基磁颗粒的粒径优选为2～3μm，更优选为2μm。上述技术方案中，缓冲液ⅱ包括0.01wt％～0.06wt％的添加剂，添加剂为聚氨丙基双胍、聚六亚甲基双胍中的一种或两种。聚氨丙基双胍和聚六亚甲基双胍中的胍基团是有效的活性基团，可以与生物体中的基团相互作用，从而将样本中的被测物即苗勒氏管抑制物受体释放出来；同时由于胍基具有很高的活性，使聚合构成正电性，很容易被呈负电性的各类细菌所吸附，从而抑制了细菌的分裂功能，使其具有防腐剂的作用。需要说明的是，苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体是经过基团修饰的稳定的抗体(商购)，可以与聚氨丙基双胍、聚六亚甲基双胍在试剂中共存。上述技术方案中，化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体中，苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物的物质的量比是1:(3～20)。化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌，优选为吖啶酯。上述技术方案中，偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原中，苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物的物质的量比为1:(5～20)。偶联标记物为生物素或衍生物，优选为生物素，如sulfo-nhs-lc-biotin(购买自acrobiosystems)。上述技术方案中，苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒包括r1试剂、r2试剂和r3试剂；r1试剂包括链霉亲和素羧基磁颗粒和缓冲液ⅰ，r1试剂中链霉亲和素羧基磁颗粒的质量百分浓度为0.01％～1％；r1试剂中链霉亲和素羧基磁颗粒的质量百分浓度优选为0.072％；缓冲液ⅰ包括100mmmes和0.02％吐温-20，ph为6.0～6.5；r2试剂包括化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体和缓冲液ⅱ，r2试剂中化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体的浓度为0.1～2.0μg/ml；缓冲液ⅱ包括100～500mmpb、0.01％～0.1％吐温-20、0.01％～0.03％聚氨丙基双胍和0.01％～0.03％聚六亚甲基双胍，ph为6；r3试剂包括偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原和缓冲液ⅲ，r3试剂中偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原的浓度为0.2～3.0μg/ml；缓冲液ⅲ包括100～500mmpb和0.01％～0.1％吐温-20，ph为6.0。上述试剂盒中，优选还包括校准品；所述校准品包括浓度分别为0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液。上述试剂盒中，优选还包括化学发光预激发液a和化学发光激发液b；所述化学发光激发液a为硝酸溶液和过氧化氢溶液；所述化学发光激发液b为氢氧化钠溶液。本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：步骤一、r1试剂制备取链霉亲和素羧基磁颗粒溶液放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒，用缓冲液ⅰ重复清洗3～5次后，用缓冲液ⅰ配成磁颗粒质量百分浓度为0.01％～1％的固相试剂，即为r1试剂，2～8℃保存。其中，链霉亲和素羧基磁颗粒溶液可购买自安捷伦科技有限公司，浓度为10～100mg/ml。步骤二、r2试剂制备将苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中，离心机室温离心20～30s，使苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体位于离心管底部位置，加入碳酸缓冲溶液，充分混匀，混匀后加入含有化学发光标记物的dmf溶液，经封闭、纯化，得到含有化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体；将收集好的含有化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体用缓冲液ⅱ稀释至终浓度为0.1～2.0μg/ml，2～8℃保存。其中，含有化学发光标记物的dmf溶液中化学发光标记物的浓度优选为2mg/ml，苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物的标记摩尔比优选为1:(3～20)。步骤三、r3试剂制备取苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体，用ph为6.0～6.5的tris缓冲液透析纯化后加入已活化的偶联标记物，经封闭、纯化，得到偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原，最后将收集好的偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原用缓冲液ⅲ稀释至终浓度为0.2～3.0μg/ml，2～8℃保存。其中，苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与偶联标记物的标记摩尔比优选为1:(5～20)；步骤四、将r1、r2和r3试剂分别灌封于不同的试剂瓶，得到苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒。上述技术方案中，如包括校准品，还需先制备校准品，将苗勒氏管抑制物受体用缓冲液分别配制成浓度为0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的校准品，等量分装。本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，完成对苗勒氏管抑制物受体的检测，试剂盒与仪器配套，检测所需的时间短，检测精度较高。本发明的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的检测步骤如下：利用全自动化学发光免疫分析仪(cm180)对苗勒氏管抑制物受体校准品进行检测，绘制标准曲线，内置于电脑软件；然后根据需求测试临床样本，根据样本的光量子数计算苗勒氏管抑制物受体的浓度。在本发明中所使用的术语，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义，除非另有说明。为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面将结合实施例对本发明作进一步的详细介绍。在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂、装置、仪器、设备等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。以下结合实施例进一步说明本发明。链霉亲和素羧基磁颗粒溶液来自安捷伦科技有限公司，货号pl6727-1001。生物素sulfo-nhs-lc-biotin，购买自acrobiosystems。实施例1r1试剂的制备：取浓度是100mg/ml的链霉亲和素羧基磁颗粒溶液0.5毫升(50mg)，放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒。用50mmmes、0.05％吐温-20，ph为6.5的缓冲液重复清洗3次后在50mmmes、0.05％吐温-20，ph为6.5的缓冲液中配成磁珠浓度为0.072wt％的r1试剂。r2试剂的制备：将500μg苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中，保证抗体位于离心管底部位置后加入碳酸缓冲溶液，充分混匀，混匀后加入吖啶酯的dmf溶液，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物物质的量比为1:3的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体。将化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体浓溶液用100mmpb、0.05％吐温、0.01％聚氨丙基双胍、0.01％聚六亚甲基双胍，ph6.0的缓冲液配制成化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体终浓度为0.1μg/ml的r2试剂。r3试剂的制备：取500μg苗勒氏管抑制物受体抗原，将ph6.5的tris缓冲液透析纯化后加入长链磺化生物素sulfo-nhs-lc-biotin，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物物质的量比为1:5的苗勒氏管抑制物受体抗原。将偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原浓溶液用100mmpb、0.05％吐温，ph6.0的缓冲液配制成偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体终浓度为0.2μg/ml的r3试剂。实施例2r1试剂的制备：取浓度是100mg/ml的链霉亲和素羧基磁颗粒溶液0.5毫升(50mg)，放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒。用50mmmes、0.05％吐温-20，ph6.5的缓冲液重复清洗3次后在50mmmes、0.05％吐温-20，ph6.5的缓冲液中配成磁珠浓度为0.072％的r1试剂。r2试剂的制备：将500μg苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中，保证抗体位于离心管底部位置后加入碳酸缓冲溶液，充分混匀，混匀后加入吖啶酯的dmf溶液，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物物质的量比为1:5的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体。将化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体浓溶液用100mmpb、0.05％吐温，ph6.0的缓冲液配制成化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体终浓度为0.1μg/ml的r2试剂。r3试剂的制备：取500μg苗勒氏管抑制物受体抗原，将ph6.5的tris缓冲液透析纯化后加入长链磺化生物素sulfo-nhs-lc-biotin，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物物质的量比为1:10的苗勒氏管抑制物受体抗原。将偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原浓溶液用100mmpb、0.05％吐温，ph6.0的缓冲液配制成偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体终浓度为0.2μg/ml的r3试剂。实施例3r1试剂的制备：取浓度是100mg/ml的链霉亲和素羧基磁颗粒溶液0.5毫升(50mg)，放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒。用50mmmes、0.05％吐温-20，ph6.5的缓冲液重复清洗3次后在50mmmes、0.05％吐温-20，ph6.5的缓冲液中配成磁珠浓度为0.072％的r1试剂。r2试剂的制备：将500μg苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中，保证抗体位于离心管底部位置后加入碳酸缓冲溶液，充分混匀，混匀后加入吖啶酯的dmf溶液，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物物质的量比为1:3的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体。将化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体浓溶液用100mmpb、0.05％吐温、0.03％聚氨丙基双胍，ph6.0的缓冲液配制成化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体终浓度为0.1μg/ml的r2试剂。r3试剂的制备：取500μg苗勒氏管抑制物受体抗原，将ph6.5的tris缓冲液透析纯化后加入长链磺化生物素sulfo-nhs-lc-biotin，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物物质的量比为1:5的苗勒氏管抑制物受体抗原。将偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原浓溶液用100mmpb、0.05％吐温，ph6.0的缓冲液配制成抗体终浓度为0.2μg/ml的r3试剂。实施例4r1试剂的制备：取浓度是100mg/ml的链霉亲和素羧基磁颗粒溶液0.5毫升(50mg)，放置于磁分离器上，直至上清无混浊，弃上清，留取磁颗粒。用50mmmes、0.05％吐温-20，ph6.5的缓冲液重复清洗3次后在50mmmes、0.05％吐温-20，ph6.5的缓冲液中配成磁珠浓度为0.072％的r1试剂。r2试剂的制备：将500μg苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体放入离心管中，保证抗体位于离心管底部位置后加入碳酸缓冲溶液，充分混匀，混匀后加入吖啶酯的dmf溶液，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体与化学发光标记物物质的量比为1:3的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体。将化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体浓溶液用100mmpb、0.05％吐温，0.02％聚六亚甲基双胍，ph6.0的缓冲液配制成化学发光标记物标记的苗勒氏管抑制物受体单克隆抗体终浓度为0.1μg/ml的r2试剂。r3试剂的制备：取500μg苗勒氏管抑制物受体抗原，将ph6.5的tris缓冲液透析纯化后加入长链磺化生物素sulfo-nhs-lc-biotin，经过封闭、纯化，得到苗勒氏管抑制物受体抗原与偶联标记物物质的量比为1:5的苗勒氏管抑制物受体抗原。将偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体抗原浓溶液用100mmpb、0.05％吐温，ph6.0的缓冲液配制成偶联标记物标记的苗勒氏管抑制物受体终浓度为0.2μg/ml的r3试剂。对实施例1～4的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的性能进行评价。苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒使用方法：以全自动化学发光免疫分析仪(cm180)为检测工具，方法学模式为双抗体夹心法，即仪器依次加入10μl的检测样本，50μl的r2试剂，50μl的r3试剂及40μl的r1试剂。反应20min后，进行磁分离。仪器将反应物送入暗室，一次加入发光底物液进行反应，最后记录光量子数。1.1实施例1苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒性能评价线性的检测：检测样本为校准品(浓度分别为0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液)，建立校准品浓度与光量子数的标准曲线，数据如表1所示，得到线性相关系数r＝0.9999。表1浓度光量子数067526410.539556312.09255675.039856215.012569930.06623450.039948灵敏度的检测：分析灵敏度的定义为对零值校准品进行20次测定光量子数，取其平均值加两倍标准差，带入零值校准品及相邻的校准所成直线所得即为灵敏度；计算苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的灵敏度为0.02pg/ml，具体数据如表2所示。表21.2实施例2的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒性能评价线性的检测：检测样本为校准品(0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液)，数据如表3所示，校准品不成线性。表31.3实施例3的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒性能评价线性的检测：检测样本为校准品(0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液)，建立校准品浓度与光量子数的标准曲线，数据如表4所示，得到线性相关系数r＝0.9999。表4浓度光量子数067639840.540455672.010365805.040639715.013136830.06355650.040360灵敏度的检测：分析灵敏度的定义为对零值校准品进行20次测定光量子数，取其平均值减去两倍的标准差，带入0值及相近的标准曲线所得即为灵敏度；计算苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的灵敏度为0.02pg/ml，具体数据如表5所示。表51.4实施例4的苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒性能评价线性的检测：检测样本为校准品(0pg/ml、0.5pg/ml、2.0pg/ml、5.0pg/ml、15.0pg/ml、30.0pg/ml和50.0pg/ml的苗勒氏管抑制物受体蛋白溶液)，建立校准品浓度与光量子数的标准曲线，数据如表6所示，曲线如图1所示，得到线性相关系数r＝0.9999。表6灵敏度的检测：分析灵敏度的定义为对零值校准品进行20次测定光量子数，取其平均值减去两倍的标准差，带入0值及相近的标准曲线所得即为灵敏度；计算苗勒氏管抑制物受体化学发光免疫检测试剂盒的灵敏度为0.035pg/ml，具体数据如表7所示。表7由以上数据可以看出，实施例1与实施例2对比，不添加聚氨丙基双胍的试剂盒测试校准品不成线性，无法拟合浓度曲线，原因就是由于实施例2没有添加聚氨丙基双胍或聚六亚甲基双胍，无法将被测物苗勒氏管抑制物受体释放，也就无法被检测出；实施例1与实施例3、实施例4对比发现，单独仅用一种且提高其使用浓度，也可达到两种同时使用的效果，说明聚氨丙基双胍或聚六亚甲基双胍有相似的作用，当使用该胍基类似的物质时，可以替代聚氨丙基双胍或聚六亚甲基双胍。综上，在试剂中添加一定量的聚氨丙基双胍和/或聚六亚甲基双胍，对检测苗勒氏管抑制物受体有着至关重要的作用。对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。当前第1页12