技术特征：
1.一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于包括以下操作步骤：s1.取尿液样品加入同位素内标物后混匀，依次加入缓冲溶液和β-葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶，恒温酶解；s2.经过步骤s1酶解后的尿液用有机溶剂进行萃取，离心分离并收集上清液，再次加入有机溶剂重复萃取、离心操作，将所得上清液混合并浓缩定容至极性溶液中，得到样品浓缩液；s3.采用液相色谱三重四级杆质谱对步骤s2所得样品浓缩液中的芳香族化合物与代谢产物进行分析，通过定量与数据处理，得到尿液中目标物多类芳香族化合物与代谢产物的浓度。2.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s1中所述的同位素内标物为
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c
6-4-氯邻苯二酚、
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c
6-2,4,5,6-四氯酚、2-羟基萘-d7、1-氨基萘-d7、2-羟基芴-d9、
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c
6-3-羟基菲、1-羟基芘-d9、1-氨基芘-d9和3-羟基苯并[a]芘-d
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中的一种以上；所述的同位素内标物质量为1～10ng。3.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s1中所述的缓冲溶液为磷酸氢二钠-氢氧化钠溶液、磷酸-乙酸铵溶液、乙酸钠-乙酸溶液、乙酸铵-乙酸溶液或磷酸二氢钠-磷酸溶液；所述的缓冲溶液的浓度为0.1～10mol/l，ph值为1～14。4.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s1中所述的尿液样品、缓冲溶液及β-葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶的体积比为(50～1000):(20～500):1；所述的酶解温度为20～50℃，酶解时间为0.5～24h。5.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s2中所述的有机溶剂为乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、二氯甲烷、正己烷、环己烷和异辛烷中的一种以上；所述有机溶剂与步骤s1所述的尿液样品的体积比为(0.5～6):1。6.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于，步骤s2中所述的离心的转速为1000～8000rpm，离心的时间为3～30min；所述重复的次数为1～5次；所述极性溶液为超纯水、甲醇和乙腈中的一种以上。7.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s3中所述的液相色谱三重四级杆的测试条件为：所用液相色谱流动相水相为甲酸水溶液、乙酸水溶液或乙酸铵水溶液，其浓度为0.005～50g/l；有机相为甲醇或乙腈；柱温为20～50℃，梯度洗脱程序开始为1～5％有机相，20min内升至99％有机相，再10min内降至5％有机相，保留0～10min；使用c18反相色谱柱分离目标物，离子源为电喷雾电离源或大气压化学电离源，离子源中氮气温度为200～400℃，流速为1～10l/min，鞘气温度为200～500℃，流速为5～20l/min，毛细管电压为2000～5000v。8.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s3中所述的目标物为4种硝基酚、8种氯酚、12种羟基多环芳烃、2种羧基多环芳烃、5种羟基杂环芳烃、3种羟基硝基多环芳烃和5种氨基多环芳烃。
9.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：所述4种硝基酚分别为邻硝基酚、间硝基酚、对硝基酚和3-甲基-4-硝基酚；所述8种氯酚分别为4-氯邻苯二酚、2-一氯酚、3-一氯酚、4-一氯酚、2,3,5,6-四氯酚、2,4,5,6-四氯酚、2,3,4,5-四氯酚和五氯酚；所述12种羟基多环芳烃分别为1-羟基萘、2-羟基萘、2-羟基芴、3-羟基芴、1-羟基菲、2-羟基菲、3-羟基菲、4-羟基菲、9-羟基菲、1-羟基芘、6-羟基和3-羟基苯并[a]芘；所述2种羧基多环芳烃分别为2-萘甲酸和1-芘甲酸；所述5种羟基杂环芳烃分别为5-羟基异喹啉、8-羟基喹啉、4-羟基咔唑、3-羟基咔唑和2-羟基氧芴；所述3种羟基硝基多环芳烃分别为4-硝基-1-羟基萘、6-硝基-1-羟基芘和3-硝基-1-羟基芘；所述5种氨基多环芳烃分别为1-氨基萘、2-氨基萘、2-氨基芴、1-氨基芘和6-氨基10.根据权利要求1所述的一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法，其特征在于：步骤s3中所述的定量是使用与液相色谱三重四级杆质谱配套的定量软件进行；所述的数据处理过程如下公式：c＝c
q
×vc
/v
s
式中：c是指样品中目标物的含量，单位为纳克每毫升；c
q
是指定量软件定量所得样品中目标物的含量，单位为纳克每毫升；v
c
是指样品浓缩液体积，单位为毫升；v
s
是指最初使用的样品体积，单位为毫升。
技术总结
本发明属于毒害有机污染物分析技术领域，公开了一种同步定量测定尿液中多类芳香族化合物与代谢产物浓度的方法。该方法是在尿液中依次加入同位素内标物、缓冲溶液及β-葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶后，进行恒温酶解，酶解后加入有机溶剂萃取，离心后转移上清液，并浓缩定容至极性溶液中，通过定量和数据处理，得到尿液中多类目标物的浓度水平。本发明通过优化方案，实现对多类性质差异较大的芳香族化合物与代谢产物的同步检测分析，简化了实验步骤、降低了成本，提高了灵敏度，可有效应用于大批量尿液样品的检测分析。量尿液样品的检测分析。
技术研发人员：安太成 李海玲 姚春阳 张书 李桂英
受保护的技术使用者：广东工业大学
技术研发日：2022.03.08
技术公布日：2022/6/1