技术特征：
1.用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其特征在于，包括靶向cd44受体的适体s1链、靶向核仁素受体的适体s2链、与s2链结合的s3链和s4链；四条链的设计满足：(1)s1链连接碱基序列linker1，s2链连接碱基序列linker 2，linker1与linker2序列能够碱基互补配对，且均有荧光标记，结合后发生fret效应，(2)s3链与s2链的适体序列和linker2序列部分结合；(3)s4链与s2链的linker2序列互补结合，s4链用荧光淬灭基团标记；(4)当s1链、s2链中适体序列部分与三阴性乳腺癌细胞表面cd44、核仁素受体蛋白结合后，linker1与linker2序列开始碱基互补配对，s3链和s4链均与s2链解旋，恢复s2链上的荧光信号，s2链与s1链发生荧光能量共振转移效应。2.根据权利要求1所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其特征在于，s1链中cd44硫代适体碱基序列部分，用磷硫键取代腺嘌呤脱氧核苷酸3’端的磷氧键。3.根据权利要求1所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其特征在于，s1链中cd44硫代适体碱基序列与linker1序列之间用2-5个腺嘌呤脱氧核苷酸碱基a连接。4.根据权利要求3所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其特征在于，s1链的a碱基与linker1序列中间采用cy3荧光标记；s2链的3’端采用cy5荧光标记；s4链的5’端用淬灭基团bhq2标记。5.根据权利要求1所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其特征在于，s1链的碱基序列长度包括30个碱基的cd44适体序列、2-5个a碱基序列以及16-20个碱基的linker1序列；s2链的碱基序列长度包括26个碱基的as1411适体序列以及16-20个碱基的linker2序列；linker1序列碱基长度与linker2序列碱基长度相等；s3链的碱基序列长度为10-12个碱基，与s2链上的适体序列和linker2序列部分互补；s4链的碱基序列长度为10-12个碱基，与s2链上的linker2序列部分互补。s3序列的碱基长度与s4序列碱基长度相等。6.根据权利要求5所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其特征在于，用含有10-12个碱基的s3链与s2链进行互补杂交，互补杂交范围是s2链上as1411序列的第21个碱基至s2上linker2序列的第4-6个碱基；用含有10-12个碱基的s4链与s2链进行互补杂交，互补杂交范围是s2链上linker2序列的第7-9个碱基至s2上linker2序列的第16-20个碱基。7.根据权利要求1所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统，其
特征在于，s1链序列为：5
’‑
cca*a*ggcctgca*a*ggga*a*cca*a*gga*ca*ca*gaa-cy3-gactagcgatgagtaacg-3’，*为磷硫键；s2链序列为：5
’‑
ggtggtggtggttgtggtggtggtggcgttactcatcgctagtc-cy5-3’；s3链序列为：5
’‑
taacgccacca-3’s4链序列为：5
’‑
bhq2-gactagcgatg-3’。8.权利要求1-7任一项所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：在pbs缓冲溶液中依次加入s2链、s3链和s4链，混匀后，置于pcr热循环仪中加热至95℃，在95℃条件下合成5min后，置于冰上快速冷却10分钟至0℃，藏于4℃冰箱静置过夜，与单独备用的s1链构成。9.权利要求1-7任一项所述的用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的dna核酸链靶向系统在制备辅助诊断和/或治疗三阴性乳腺癌制剂中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的治疗三阴性乳腺癌制剂是指抑制癌细胞转移的制剂。
技术总结
本发明属于生物技术领域，具体公开了一种用于检测和/或治疗三阴性乳腺癌的DNA核酸链靶向系统及其制备和应用。包括含有Linker1的靶向CD44受体的适体S1链、含有Linker2的靶向核仁素受体的适体S2链、与S2链结合的S3链和S4链；当S1链、S2链中适体序列部分与三阴性乳腺癌细胞表面CD44、核仁素受体蛋白结合后，Linker1与Linker2序列开始碱基互补配对，S3链和S4链均与S2链解旋，恢复S2链上的荧光信号，S2链与S1链发生荧光能量共振转移效应。本发明不仅可以高效辅助诊断三阴性乳腺癌，还能抑制三阴性乳腺癌的转移，具有很好的应用前景。具有很好的应用前景。具有很好的应用前景。
技术研发人员：刘艳飞 刘晓钦 刘珍宝 蒋婷
受保护的技术使用者：中南大学
技术研发日：2022.03.08
技术公布日：2022/8/12