一种便携式胆固醇分子印迹丝网印刷电化学检测仪的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种便携式胆固醇分子印迹丝网印刷电化学检测仪，属于快速检测技 术领域。
【背景技术】
[0002] 胆固醇是动物组织中的一种白色蜡状物质，是环戊焼多氨菲的衍生物。胆固醇是 构成细胞膜的重要组成成分，是人体必不可少的物质，但过量的胆固醇会引起也脑血。近年 来由于高胆固醇引发的疾病有W下几种常见类型；高血压、肾脏疾病、前列腺癌、破坏人体 骨骼、牙周病、耳鸣或耳闷，高胆固醇还能够造成缺血性也脏病（也绞痛、也肌梗死）、脑梗 死、间歇性跋行症及胆结石。
[0003] 胆固醇的检测方法多种多样，原理各不相同，每种方法均由自己的优点和缺点，但 因现代化食品工业对检测方法灵敏度及准确度要求的提高，有很多方法已不适合检测的需 要。因此建立一种灵敏、快速、简便、特异性高且经济的检测方法是生产经营企业、质控人 员、进出口检商、政府管理部口的迫切需要和食品、环境安全的有力保障。
[0004] 目前，已报道的血胆固醇检测方法较多，常见的有气液色谱一质谱联用法、温度测 定法、分子发光法、比色法、电化学方法等。然而该些检测方法大多耗时耗力，而且需要很大 的检测费用。目前的胆固醇检测产品中，基本都采用了酶法为基础的原理，通过比色或者检 测仪获得测定的结果。然而该种检测仪需要稳定性高的溶胶凝胶类作为固酶基质，电极上 的酶容易失活，而产生假阴性的结果，此外，由于该种检测方法对胆固醇的特异性识别能力 较差，在实际样品检测时，存在假阳性的结果。
[0005] 本发明的特征在于采用分子印迹电锻在丝网印刷电极上，分子印迹又称"人造抗 体"，对环境的要求不高，不需要特别的保存方式，此外对胆固醇分子具有较好的识别能力， 达到特异性检测的要求。
【发明内容】
[0006] 本发明针对现有技术存在的上述不足，提供了一种用于快速检测胆固醇的分子印 迹丝网印刷电化学检测仪。
[0007] 本发明的第一个目的是提供一种便携式分子印迹电化学检测仪，包括外插型一次 性分子印迹丝网印刷电极和便携式检测器，其运行方式是将含有待测样品的电导液滴加到 分子印迹丝网印刷电极表面，然后将一次性分子印迹丝网印刷电极水平插入便携式电化 学检测仪卡槽内，检测读数。
[0008] 所述便携式检测器为简易式电化学工作站，配备L邸显示屏，检测器在设置一定 的电压下，由对电极发出电子流经电导液，再从工作电极流回工作站时形成的电流值会被 记录，根据产生的电流大小与标准样品中目标物质的浓度关系折算，最终将待测样品中目 标物质浓度显示于LED显示屏上。
[0009] 所述产生的电流大小与标准样品中目标物质的浓度关系是已内置于检测器程序 中的标准曲线，或者是检测器程序根据测得的不同电流值大小与操作者在操作界面输入的 相应待测物质浓度而自动计算得到的标准曲线。
[0010] 所述便携式检测器，在本发明的一种实施方式中，已内置有根据目标物质的标准 品的浓度与电流值关系得到的标准曲线，检测样品时，可W直接根据测得的电流，结合标准 曲线，最终直接显示样品中目标物质的浓度。
[0011] 所述便携式检测器，在本发明的一种实施方式中，可W制备不同浓度标准品的分 子印迹丝网印刷电极插入到检测器中并分别将浓度输入到检测器中，检测器系统可W根据 测得的电流值大小和收到的浓度信息，计算得到电流值大小与物质浓度的标准曲线。检测 待测样品时，系统内部可W测得的电流与计算得到的标准曲线，最终直接显示待测样品中 目标物质的浓度。
[0012] 所述含有待测样品的电导液，在本发明的一种实施方式中，是用PBS配置的待测 样品溶液，或者是待测样品水溶液与导电溶液口.5111111〇1'。田6化脚日] 3/4和0.1111〇1*1^^1((：1 溶液）的混合液。
[0013] 所述待测样品溶液，在本发明的一种实施方式中，是W浓度为0. 1?Immol ? [1， 抑范围为6. 2?8. 1的PBS溶液作为溶剂。
[0014] 所述混合液，在本发明的一种实施方式中，是待测样品溶液与导电溶液 (2. 5mmol ? L-1 [Fe化脚6]3八和0. Imol ? L -iKCl溶液）按照体积比9:1?1:9混合。
[0015] 所述含有待测样品的电导液，滴加到分子印迹丝网印刷电极表面的体积是： 5 y L ?20 y L。
[0016] 所述含有待测样品的电导液滴加到分子印迹丝网印刷电极表面的体积，在本发明 的一种实施方式中，是10 P L。
[0017] 所述滴加到分子印迹丝网印刷电极表面后，在本发明的一种实施方式中，静置吸 附时间为50s?600s再进行结果读取。
[0018] 所述静置吸附，在本发明的一种实施方式中，时间为120s。
[0019] 所述便携式检测器的电压设置范围为-0. 2V?0. 6V。
[0020] 所述电压设置范围，在本发明的一种实施方式中，为0. IV?0.3V。
[0021] 所述标准品的分子印迹丝网印刷电极，可W是W下任意一种：
[0022] (1)由已知浓度的标准分子浓度的待测物滴加到电锻了分子印迹膜的丝网印刷电 极上测定，计算得到浓度与电流信号剂量关系，计算标准品曲线，该方式在使用过程中无需 使用与该电化学检测器配套的丝网印刷电极，该种标准丝网印刷电极不能重复使用，稳定 时间短；
[0023] (2)产生的电流信号与该电化学检测器配套的滴加已知浓度被检测物的丝网印刷 电极，可由可控电阻的模块丝印印刷电极代替，即根据检测范围得到一组已知电阻的模块 丝网印刷电极用于校正标准曲线。模块丝印印刷电极通过物理方法调控阻抗，可W重复使 用，且稳定耐用，需使用与该电化学检测器配套的丝网印刷电极，即为调试模块丝印印刷电 极所使用的丝网印刷电极。
[0024] 所述分子印迹丝网印刷电极，在本发明的一种实施方式中，包括电极基片、接线端 子、电极连线、工作电极、对电极、绝缘层；所述工作电极表面电锻了分子印迹聚合物膜；
[00巧]所述分子印迹丝网印刷电极，在本发明的一种实施方式中，电极基片为一次性消 费基片，工作电极，对电极与参比电极由电极连线导出，形成凸型H线式插口，可插入便携 式电化学检测器，检测读数。
[0026] 所述分子印迹丝网印刷电极，在本发明的一种实施方式中，其分子印迹聚合物为 胆固醇分子印迹聚合物。
[0027] 所述分子印迹丝网印刷电极，在本发明的一种实施方式中，其电极基片印制了接 线端子、电极连线与工作电极连成一体的一条电极基体和接线端子、电极连线与对电极连 成一体的另一条电极基体，两条电极连线相互平行，电极连线在电极基体的中间部分，其表 面涂覆一层PVC绝缘体。
[0028] 所述分子印迹丝网印刷电极，在本发明的一种实施方式中，工作电极的形状为圆 形块状，对电极的形状为与工作电极同也相离的半圆环形块状，工作电极表面电锻聚合胆 固醇分子印迹膜。
[0029] 所述分子印迹丝网印刷电极的制备方法，在本发明的一种实施方式中，是；在普通 丝网印刷电极的工作电极表面电锻沉积金纳米粒子，再通过金琉键修饰对琉基苯胺，其浸 置lOmmol ?。胆固醇溶液中，室温赔育化，再置于电聚合液中，电锻聚合，模板分子洗脱， 使工作电极表面电锻了分子印迹聚合物膜，即得到分子印迹丝网印刷电极。
[0030] 所述制备方法，在本发明的一种实施方式中，是先通过电锻或修饰其他用于扩大 电极比表面积或增强电子传递的碳纳米材料，再在电极表面电锻沉积金纳米粒子。
[0031] 所述电锻或修饰碳纳米材料，在本发明的一种实施方式中，采用修饰多壁碳纳米 管。
[0032] 所述制备方法中的电锻沉积金纳米粒子，在本发明的一种实施方式中是；将工作 电极置于2. 43mmol .L-1氯金酸和0. Imol .L-1硫酸溶液中，在电位-0. 2V电压下，电锻时间 为200s，W完成电锻。
[0033] 所述制备方法中的电聚合液，在本发明的一种实施方式中，含有lOmmol ?。对琉 基苯胺，50mol ?。四了基高氯酸馈，lOmol ? 胆固醇和0. 4g/L高氯酸。
[0034] 所述制备方法中的电锻聚合，在本发明的一种实施方式中，具体条件是：电聚合电 压为-0. 3V-1. 2V，扫描速率为50mv/s，最佳扫描圈数为6圈。
[0035] 所述制备方法中的模板分子洗脱，在本发明的一种实施方式中，是将电极在含有 己醇水溶液（4 ;1，v/v)中浸泡lOmin，然后将工作电极用超纯水淋洗。
[0036] 本发明的第二个目的是提供一种所述检测仪的应用，是；先插入标准品分子印迹 丝网