一种土茯苓药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种土茯苓药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。
【背景技术】
[0002]中药土茯苓目前在中国药典2010年版收载的药材项下有薄层鉴别方法，但在其复方制剂以及水提取物中，还没有对其进行薄层鉴别的报道，查阅文献【1'2】虽然在制剂中有薄层鉴别的报道，但样品和对照药材的前处理都比较繁琐复杂，需要用有机溶剂反复纯化处理，仅样品的前处理就要花费数小时，数百ml的有机试剂，效率低、环境污染严重、危害操作人员的身体健康。现将查阅到得土茯苓薄层鉴别方法，列举分析如下:
[0003]中国药典2010年版一部土茯苓药材的薄层鉴别方法取本品粉末lg，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取落新妇苷对照品，加甲醇制成每Iml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(13: 32: 9)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，放置5分钟后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0004]该鉴别方法是采用落新妇苷对照品为指标，进行土茯苓薄层鉴别的，虽然样品前处理不复杂，但信息量单一，仅是检视喷雾三氯化铝试液，放置5分钟后的荧光斑点，鉴别一批样品，样品前处理花费0.5小时、有机溶剂20ml。
[0005]文献【1】报道的解毒泄浊I号颗粒中土茯苓的薄层鉴别方法取解毒泄浊I号颗粒适量，研细，称取2g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加3mol吨―1盐酸20ml，分次溶解，并转移至锥形瓶中，水浴加热水解30分钟，取出放冷，加氯仿60ml，分三次萃取，合并氯仿层，滤过，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取薯蓣皂苷元对照品适量，加甲醇制成每Iml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10 μ 1、对照品溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(20: 0.2)为展开剂，预饱和20分钟后，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0006]该鉴别方法是采用薯蓣皂苷元为指标，进行土茯苓薄层鉴别的，鉴别一批样品，仅样品前处理要花费时间3小时、有机溶剂230ml。
[0007]文献【2】报道的银肩胶囊中土茯苓的薄层鉴别取银肩胶囊内容物3g，加水60ml，超声处理30分钟，放冷，转移至分液漏斗中，加盐酸调pH至2，再加入乙酸乙酯震摇提取2次，每次20ml，合并提取液，通过铺有无水硫酸钠的漏斗后，将滤液蒸干，加入甲醇Iml使残渣溶解，溶解液作为供试品溶液。另取土茯苓对照药材5g，加水100ml，加热回流4小时，滤过，滤液浓缩至约10ml，加乙醇15ml，搅拌，静置，滤过，滤液蒸干，按供试品溶液的制备方法，制备对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液与对照药材溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸(15: 5: I)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0008]该鉴别方法是以土茯苓对照药材为对照薄层鉴别的，鉴别一批样品，仅样品与对照药材的前处理要花费时间7-8小时、有机溶剂97ml。
[0009]由上述土茯苓在制剂中的薄层鉴别实例，说明了目前为止，其鉴别的繁琐性、复杂性、费时性、信息量的单一性、对周围环境的污染性以及高成本、低效率。所以提高检测效率、降低检测成本、减少环境污染，创建土茯苓药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法，成了检测人员刻不容缓的奋斗目标，我们就是在该背景条件下，发明了土茯苓药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。
[0010]土茯苓药材水提取物或配方颗粒的制备方法土茯苓饮片7000-8000g，分别加水8倍量，煎煮提取二次，每次1-2小时，滤过，滤液70°C减压浓缩，浓缩液喷雾干燥或70°C减压干燥，得土茯苓水提取物干膏粉；或加糊精适量，混匀，制粒，分别制成1000g，分装，得土茯苓水提取配方颗粒。
【发明内容】
[0011]本发明就是针对土茯苓水提取物还没有薄层鉴别方法以及其在复方制剂中薄层鉴别繁琐、费时、信息量单一、方法污染环境和高成本的弊端，发明了一种土茯苓药材及其水提取物的快速多信息薄层鉴别方法。即，用最简便、快捷的前处理方法得到供试品与对照药材溶液，在同一块薄层板上，获得土茯苓与其水提取物在紫外光灯365nm和254nm，以及喷雾10%硫酸乙醇溶液显色后，日光，3种检视条件下的多信息薄层鉴别图，斑点清晰，相互交错，但又互不干扰(见图1、2、3)。与常规的单信息薄层相比，不但大幅度提高了土茯苓药材及其提取物的质量可控性，有利于质量监督，而且还提高了检测效率、节约了成本，减少了环境污染。并为提取的复方制剂中土茯苓的快速薄层鉴别，提供了三种检视条件下的薄层色谱图选择参考，用以排除干扰成分。
[0012]本发明解决其技术问题所采用的方案为:
[0013](I) 土茯苓药材的薄层鉴别取土茯苓药材与其对照药材适量，研细，分别称取0.3g，加70%甲醇各2ml，超声处理20分钟，上清液分别作为供试品溶液与对照药材溶液；吸取上述对照药材溶液与供试品溶液各5?8 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为8: 2: 3: 0.3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；再喷以1 %硫酸乙醇溶液，1 5 °C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
[0014](2) 土茯苓水提取物的薄层鉴别取本品适量，研细，称取0.2g，加70%甲醇5ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取土茯苓对照药材0.3g，加70%甲醇2ml，超声处理20分钟，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述对照药材溶液与供试品溶液各5?8 μ 1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为8:2:3: 0.3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；再喷以10%硫酸乙醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
[0015]本发明的原理如下:
[0016]依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制备供试品与对照药材溶液。再通过展开剂的移动，各成分在薄层板上的吸附、解吸附能力的不同，使其斑点得以分离。又借助各成分极性大小，选取极性近似的有效成分，在不