一种gc-ms/ms测定水果和蔬菜中二溴氯丙烷残留的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种二溴氯丙烷残留量的检测方法，更具体地说，涉及一种采用气相 色谱-串联质谱法（GC-MS/MS)定性定量测定水果和蔬菜中二溴氯丙烷残留量的方法，属于 农药残留的检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 二溴氯丙烷，俗称黑药，学名1，2_二溴-3-氯丙烷，英文名称1， 2-Dibrom〇-3-chloropropane(简称：DBCP)，CAS 号为 96-12-8,分子量 236. 3328,结构式为：
二溴氯丙烷是液态熏蒸性杀线虫剂的活性成份。它是一种农业上使用的土壤熏蒸剂， 适用于蔬菜、花卉、烟草、草莓等作物的苗床和温室大棚的熏蒸，防治根结线虫、孢囊线虫、 短体线虫、螺旋线虫、纽带线虫、矮化线虫等。众多研究表明二溴氯丙烷对人体有剧毒，具有 高残留、致畸、致不育的特点。在发现它对人类健康造成不良影响之后，此化合物于1979年 被禁止及限制使用。但仍有不法分子为取得高效的种植效果，暗地使用该农药，为社会留下 不少隐患。
[0003] 国内外对于水果和蔬菜中二溴氯丙烷的检测研究开展的较少，且主要集中在上世 纪80年代。已有的研究主要是针对花生上的二溴氯丙烷，采用气相色谱技术进行其残留量 检测，但前处理手段落后、过程繁琐、检测效率低，且溶剂多为毒性较大的苯、乙烷、浓硫酸 等，对人体有较大危害，不适用于果蔬基质。另外，气相色谱技术无法克服基质干扰、假阳性 等问题，不能进行较复杂基质中二溴氯丙烷的检测，限制了其使用范围。因此，迫切需要建 立一种操作简单、回收率高、重复性好、检出限低、选择性好的方法，适用于各种蔬菜和水果 中二溴氯丙烷的检测。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的问题是针对以上不足，提供一种GC-MS/MS测定水果和蔬菜中二 溴氯丙烷残留的方法，克服传统技术检测步骤繁琐、溶剂毒性较大、灵敏度低、回收率低、重 现性差、不适用于果蔬基质的缺陷，采用本发明的方法，具有检测快速简便、毒性小、灵敏度 高、选择性强、重现性好、回收率高的优点。
[0005] 为解决以上问题，本发明采取的技术方案是：一种GC-MS/MS测定水果和蔬菜中二 溴氯丙烷残留的方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 提取：称取粉碎好的样品置于具塞离心管中，加入无水硫酸镁、无水乙酸钠和〇. 1% 醋酸/乙腈溶液，立即用玻璃棒充分搅拌均匀，均质后离心得样品提取液； (2) 净化：移取样品提取液上清液于旋蒸瓶中，旋蒸至近干，用乙腈溶解残渣，涡旋振 荡，溶解液转入加有分散固相萃取剂和甲苯的离心管中，涡旋振荡，离心，过膜得样品液； (3)标准工作溶液的配制：采用样品空白基质提取液配制不同浓度标准工作液，然后用 标准溶液浓度-色谱峰面积作标准工作曲线； (4 )气相色谱串联质谱（GC-MS/MS )测定 将步骤（3)中的各浓度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面 积作出标准工作曲线； 在相同条件下将步骤（2)中得到的样品液进行GC-MS/MS测定，测得样品中二溴氯丙烷 的色谱峰面积，带入标准曲线，得到样品液中二溴氯丙烷的含量，然后根据样品液所代表的 质量计算得到样品中二溴氯丙烷的残留量。
[0006] 以下是对上述技术方案的进一步说明： 步骤（1)中样品若为脱水蔬菜和水果，称样量减为正常值的十分之一，然后加水至正常 值，浸泡半小时，进行检测。
[0007] 步骤（2)中分散固相萃取剂由PSA和C18组成，加入量分别为150mg和200mg，甲 苯为IOOul。
[0008] 步骤（4)中色谱条件为：色谱柱HP-5MS毛细管色谱柱，30*0. 25*0. 25 ;进样口温度 250°C ;载气：He气，不分流模式进样，进样量Iul ;恒流模式，柱流量1.0 ml/min ;程序升温： 初温50°C保持2min，以每分钟5°C的速度升至180°C，保持5min，然后以每分钟20°C的速度 升至210°C，保持5min ;传输线温度250°C。质谱条件为：离子源温度：250°C;电离模式：EI ; 碰撞气：高纯氩；多反应监测扫描模式SRM，二溴氯丙烷的母离子为156. 8-157. 2,子离子分 别为 74. 8-75. 2 和 76. 8-77. 2。
[0009] 步骤（4)中测定样品和标准工作溶液时，若两者相应农药的保留时间一致，并且在 扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现，且离子丰度比与标准溶液一致，则可判 断样品中残留此种农药，若不能同时满足上述两个条件，则判断不含该种农药。
[0010] 回收率为 86. 54-95. 25%，检出限为 0· 76ug/kg，RSD 为 2. 44-5. 79%。
[0011] 本发明采用以上技术方案，与传统技术相比，具有以下优点：将分散固相萃取前处 理技术和GC-MS/MS检测技术相结合，快速简便，采用醋酸、乙腈作为溶剂，毒性小。检出限 低至0. 76ug/kg，所以灵敏度高。回收率86. 54-95. 25%，所以选择性强。RSD值2. 44-5. 79%， 所以重现性好，有效的去除了基质的干扰，适用于各种蔬菜水果中二溴氯丙烷的检测。在分 散固相萃取前处理方法的净化步骤中加入了甲苯，降低PSA对目标物的吸附，同一基质中 使方法的回收率由不加甲苯时的72. 03-75. 88%，提高到86. 54-94. 29%。
[0012] 下面结合附图和实施例对本发明作详细说明。
【附图说明】
[0013] 附图1为添加在空白苹果基质中的二溴氯丙烷标液的选择离子色谱图； 附图2为空白苹果样品的选择离子色谱图； 附图3为添加在空白苹果基质中的二溴氯丙烷标液的质谱图。
【具体实施方式】
[0014] 现以以下实施实例来说明本发明，但并不是限制本发明的范围。
[0015] 实施例1 :下面以苹果为例，说明GC-MS/MS测定二溴氯丙烷残留的方法，包括如下 步骤： (1)样品前处理 称取粉碎并充分混匀的苹果15g，置于IOOmL塑料离心管中，加入0. 1%醋酸/乙腈溶 液15mL，无水硫酸镁6. 0g，无水乙酸钠 I. 5g，用玻璃棒充分搅拌均勾，于均质器上高速均质 2min，10000r/min，4°C高速离心 IOmin ; 取IOmL上清液于250mL旋蒸瓶中，旋蒸至近干，准确加入乙腈2mL溶解残渣，HOOr/ min涡混2min，溶解液转移入盛有150mg PSA、200mg C18和IOOuL甲苯的离心管中，1400r/ min祸混2min，净化液4000r/min，离心10min后用0. 45um滤膜过滤，供GC-MS/MS分析。
[0016] (2 )气相色谱串联质谱（GC-MS/MS )测定 将不同浓度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面积作出标准 工作曲线； 在相同条件下将样品液进行GC-MS/MS测定，测得样品中二溴氯丙烷的色谱峰面积，带 入标准曲线，得到样品液中二溴氯丙烷的含量，然后根据样品液所代表的质量计算得到样 品中^?漠氣丙烷的残留量。
[0017] (3)色谱条件和质谱条件 色谱条件： 色谱柱HP-5MS毛细管色谱柱，30*0. 25*0. 25 ;进样口温度250°C ;载气：He气，不分流 模式进样，进样量IuL ;恒流模式，柱流量1.0 mL/min ;程序升温：初温50°C保持2min，以每 分钟5°C的速度升至180°C，保持5min，然后以每分钟20°C的速度升至210°C，保持5min ;传 输线温度250 °C。
[0018] 质谱条件： 离子源温度：250°C ;电离模式：EI ;碰撞气：高纯氩；多反应监测扫描模式SRM，二溴氯 丙烷的母离子为156. 8-157. 2,子离子分别为74. 8-75. 2和76. 8-77. 2。
[0019] 表1MRM检测参数
*为定莖尚子对。
[0020] (4)基质标准工作曲线 分别用苹果空白基质提取液配制标准工作液各点：〇. 02、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5ug/mL，按 照实验条件GC-MS/MS测定，用标准溶液浓度-色谱峰面积作出标准工作曲线，求出回归方 程如表2。
[0021] 表2苹果空白基质中二溴氯丙烷的标准曲线
加标回收率和重复性： 在不含二溴氯丙烷的空白苹果样品中加入50、100