鉴别紫河车的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及鉴别紫河车的方法，属于中药鉴定技术领域。
【背景技术】
[0002]紫河车是人的胎盘经炮制加工而成的贵重滋补药。中医认为胎盘性味甘、咸、温，入肺、心、肾经，有补肾益精，益气养血之功，乃秉受父母精血之余，故能补阴阳两虚，有返本还元之功。现代医学研究认为，胎盘含蛋白质、糖、钙、维生素、免疫因子、女性激素、助孕酮、类固醇激素、促性腺激素、促肾上腺皮质激素等，能促进乳腺、子宫、阴道、睾丸的发育，对甲状腺也有促进作用，对肺结核、支气管哮喘、贫血等亦有良效，研末口服或灌肠可预防麻疹或减轻症状。对门静脉性肝硬化腹水及血吸虫性晚期肝硬化腹水也有一定的疗效。
[0003]在近来的药检工作中，发现不少用动物(猪、牛等)胎盘或其他的物质制造的紫河车伪品以及经提取过的紫河车劣品。这些伪劣品在临床上不但没有紫河车应有的疗效，则且对人体产生危害。
[0004]目前，关于紫河车药材的鉴别手段，主要包括如下几种途径:
[0005]途径一是型态分析，凭借经验由型态及其外观来区分各种动物胎盘及紫河车的优劣。
[0006]途经二是采用薄层色谱鉴别，但该方法存在如下缺点:实验操作复杂，展开剂的毒性较大，人为的影响因素大，重现性差，由于需要烘干和显色，分析时间长。
[0007]综上所述，建立一种准确快速的鉴别紫河车与其他动物胎盘的方法，是本领域技术人员迫切需要解决的技术难题。
【发明内容】
[0008]本发明所要解决的技术问题是提供一种可以快速准确的鉴别紫河车的方法。
[0009]本发明鉴别紫河车的方法包括如下步骤:
[0010]按高效液相色谱法中国药典2010年版二部附录V D测定；
[0011]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-磷酸盐缓冲液=80:10?30V/V为流动相，检测波长为272nm ;其中，所述磷酸盐缓冲液浓度为0.02mol/l，pH 为 5.0 ;
[0012]对照品溶液的制备取紫河车，用有机溶剂提取，得到紫河车提取液，吸取紫河车提取液，条状点于硅胶G薄层板上，用甲苯一丙酮=3:2V/V作为展开剂，取出，晾干，用玻璃板覆盖，并留出宽度显色；显色后，在显色区域蓝色条斑的相应位置刮取玻璃板覆盖未被显色部分，将其溶于无水乙醇，超声提取，过滤，离心，蒸干滤液得对照品；对照品加流动相溶解，制得对照品溶液；
[0013]供试品溶液的制备取待测样品，用有机溶剂提取，得到待测样品提取液，加流动相溶解，制得供试品溶液；
[0014]测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定；如果供试品与对照品有相同特征峰，则待测样品为紫河车，反之，则待测样品为假冒紫河车药材。
[0015]进一步的，本发明鉴别紫河车的方法，其色谱条件与系统适用性试验条件优选为:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用250mmX4.6mm，5 μ m色谱柱或效能相当的色谱柱，进样量10 μ 1，以甲醇-磷酸盐缓冲液=80:20V/V为流动相，检测波长为272nm，柱温30°C，流速 1.0ml/min。
[0016]其中，上述鉴别紫河车的方法，其提取紫河车和待测样品的有机溶剂可以为常规的提取用有机溶剂，如:为氯仿、无水乙醇或丙酮；所述有机溶剂优选为氯仿。
[0017]进一步的，上述紫河车的提取方法优选为:取紫河车，以紫河车Ig计，加入氯仿20ml，超声提取30min，滤过，蒸干滤液，残渣分别加入无水乙醇2ml使溶解，即得紫河车提取液；待测样品提取液的制备方法与紫河车提取液制备方法相同。
[0018]其中，上述鉴别紫河车的方法，所述对照品溶液的制备时，优选超声提取lOmin，超声设备可采用药物提取常用的市售超声设备；离心速度4000r/h，离心时间lOmin。
[0019]本发明方法可以快速准确的鉴别紫河车，避免了人为因素的干扰，实验操作简单，重现性较好，具有广阔的应用前景。
【附图说明】
[0020]图1紫河车与牛胎盘、猪胎盘的薄层色谱图；
[0021]图2紫河车对照品的高效液相色谱分析图谱；
[0022]图3紫河车对照品的质谱分析图谱；
[0023]图4紫河车提取物的高效液相色谱图；
[0024]图5牛胎盘提取物的高效液相色谱图；
[0025]图6猪胎盘提取物的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0026]本发明鉴别紫河车的方法包括如下步骤:
[0027]按高效液相色谱法中国药典2010年版二部附录V D测定；
[0028]色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-磷酸盐缓冲液=80:10?30V/V为流动相，检测波长为272nm ;其中，所述磷酸盐缓冲液浓度为0.02mol/l，pH 为 5.0 ;
[0029]对照品溶液的制备取紫河车，用有机溶剂提取，得到紫河车提取液，吸取紫河车提取液，条状点于硅胶G薄层板上，用甲苯一丙酮=3:2V/V作为展开剂，取出，晾干，用玻璃板覆盖，并留出宽度显色；显色后，在显色区域蓝色条斑的相应位置刮取玻璃板覆盖未被显色部分，将其溶于无水乙醇，超声提取，过滤，离心，蒸干滤液得对照品；对照品加流动相溶解，制得对照品溶液；
[0030]供试品溶液的制备取待测样品，用有机溶剂提取，得到待测样品提取液，加流动相溶解，制得供试品溶液；
[0031]测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定；如果供试品与对照品有相同特征峰，则待测样品为紫河车，反之，则待测样品为假冒紫河车药材。
[0032]进一步的，本发明鉴别紫河车的方法，其色谱条件与系统适用性试验条件优选为:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用250mmX4.6mm，5 μ m色谱柱或效能相当的色谱柱，进样量10 μ 1，以甲醇-磷酸盐缓冲液=80:20V/V为流动相，检测波长为272nm，柱温30°C，流速 1.0ml/min。
[0033]其中，上述鉴别紫河车的方法，其提取紫河车和待测样品的有机溶剂可以为常规的提取用有机溶剂，如:为氯仿、无水乙醇或丙酮；所述有机溶剂优选为氯仿。
[0034]进一步的，上述紫河车的提取方法优选为:取紫河车，以紫河车Ig计，加入氯仿20ml，超声提取30min，滤过，蒸干滤液，残渣分别加入无水乙醇2ml使溶解，即得紫河车提取液；待测样品提取液的制备方法与紫河车提取液制备方法相同。
[0035]其中，上述鉴别紫河车的方法，所述对照品溶液的制备时，优选超声提取lOmin，超声设备可采用药物提取常用的市售超声设备；离心速度4000r/h，离心时间lOmin。
[0036]下面结合实施例对本发明的【具体实施方式】做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
[0037]试验例I展开剂的选择