一种富马酸卢帕他定原料药合成工艺中dmf残留的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药品中的溶剂残留采用高效液相色谱法的检查方法，具体是富马酸卢 帕他定原料药合成工艺中所用溶剂的DMF采用新开发的高效液相色谱法进行检测。
【背景技术】
[0002] N，N-二甲基甲酰胺，简称DMF，在常温常压下为无色透明的液体、略带氨味，其分 子式为C3H7N0，分子量73.10。相对密度0.9445(25°C)。熔点_61°C。沸点152.8°C。闪点57.78 °C。蒸气密度2.51。蒸气压0.49kpa(3.7mmHg25°C)。自燃点445°C。折射率1.42817，溶解度参 数δ = 12.1。蒸汽与空气混合物爆炸极限2.2~15.2 %。与水和通常有机溶剂混溶，与石油醚 混合分层。遇明火、高热可引起燃烧爆炸。能与浓硫酸、发烟硝酸剧烈反应甚至发生爆炸。危 险标记7(易燃液体)主要用途主要用作工业溶剂，医药工业上用于生产维生素、激素，也用 于制造杀虫剂。
[0003] 本公司研发的3.1类新药富马酸卢帕他定原料药，在合成过程中用到了 6种溶剂， 其中包含DMF的6种溶剂的名称及相关参数见。
[0004] 表1(所用溶剂清单）
[0005]
[0006] 现有技术的缺陷
[0007] 常规的溶剂残留均采用气相色谱法，本公司针对上述6种溶剂开发了在同一系统 下检测气相色谱条件，但在开发研究过程中，出现了两个技术问题：
[0008] 一是溶剂的选择DMS0:甲醇、乙醇、四氢呋喃、DMF溶于水，二氯甲烧、甲苯不溶于 水，由此只能选择俗称的万能溶剂DMF或DMS0，DMF为待测组分.
[0009] 二是六种待测组分沸点由65~154°C，采用顶空进样时为保证DMF完全气化，炉温 不得低于100°c，温度到100°C时待测样品（富马酸卢帕他定RPT)已发生高温裂解，待测组分 DMF还未见有响应，温度升高至110°C时待测组分DMF在系统中有响应，但响应不高，更糟糕 的是待测样品（富马酸卢帕他定RPT)高温裂解峰增加到了 4个，已经影响到了正常待测组分 的检测，产生的测定干扰无法排除。具体测试数据与图谱见表2,图谱见附图1~2。
[0010]表2(测定干扰的相关图谱）
[0011]
【发明内容】
。
[0012] 针对上述运行不便的技术方案，本发明进行了如下改进，一是:溶剂选择为DMF:甲 醇、乙醇、四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯五种组分采用气相色谱法;二是：重新开发不产生高温 裂解待测样品（富马酸卢帕他定RPT)的高效液相色谱法测待测组分DMF。具体如下：
[0013] -种富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法，包括如下步骤：
[0014] 取富马酸卢帕他定原料药于具塞滤芯管中，加水密塞振摇并超声5min，3000转滤 芯lOmin，0.45um滤膜过滤后取上清液，作为供试液；
[0015] 取DMF于量瓶中，加水溶解并稀释至刻度后另取5.0ml于50ml的量瓶中加水稀释至 刻度摇匀作为对照液；
[0016] 量取上述供试液与对照液各5ul按高效液相色谱法依法测定，并记录色谱图至 lOmin，按外标法计算，DMF残留。
[0017]高效液相色谱测定的条件为:色谱柱(：18(4.6父25〇111111、5以111);流动相为甲醇与水； 检测波长224nm;进样量5μηι;柱温30°C;流速1 · OmL/min 〇
[0018] 流动相中甲醇与水以梯度运行，具体为，Omin，甲醇15份，水85份；1 Omin，甲醇30 份，水70份;20min，甲醇100份，水0份;25min，甲醇100份，水0份;35min，甲醇15份，水85份。
[0019] 溶剂残留测定常规采用气相色谱法，在待测组分多且待测样品性质特殊时无法满 足测定要求的情况下。变通思路开发出操作便利，测定结果无干扰的DMF在样品中的残留 测定。
[0020] 供试液配制时选择易溶待测样品中的待测组分，不溶、难溶或微溶待测样品的溶 剂，（DMF在水中易溶，富马酸卢帕他定在水中几乎不溶)避开待测样品的溶解浓度过高而导 致的色谱柱容量超载、减小测定干扰。
[0021] 色谱系统运行时间35min，但色谱图只记录至lOmin(待测组分完全显示后，其它干 扰依然洗脱完全，只是不记载在色谱中，这样便于图谱的处理）。
【附图说明】
[0022]图1为DMS0为溶剂，炉温100°C(六种待测组分+样)高温裂解图谱。
[0023]图2为DMS0为溶剂，炉温110°C(六种待测组分+样)高温裂解图谱。
[0024]图3为RPT原料药中DMF的残留测定溶剂图谱。
[0025] 图4为RPT原料药中DMF的残留测定对照图谱。
[0026] 图5为RPT原料药中DMF的残留测定供试液图谱。
[0027] 图6为RPT原料药DMF的残留测定溶剂色谱图记录至35min时图谱。
[0028]图7为RPT原料药DMF的残留测定供试液色谱图记录至35min时图谱。
【具体实施方式】 [0029] 实施例1
[0030] 称取本品约0.25g于10ml的具塞滤芯管中，加水5ml密塞振摇并超声5min，3000转 滤芯lOmin，取上清液（必要时0.45um滤膜过滤）作为供试液。称取DMF约44mg于100ml量瓶 中，加水溶解并稀释至刻度，在另取5.Oml于50ml的量瓶中加水稀释至刻度摇匀作为对照 液，量取上述供试品溶液与对照液各5ul按高效液相色谱法依法测定，并记录色谱图至 lOmin，按外标法计算，DMF残留不得过0.088 %。
[0031 ]开发采用高效液相色谱法测定富马酸卢帕他定DMF残留
[0032]色谱条件与系统适用性
[0033]高效液相色谱仪:Agilent-1260、1200;
[0034] 色谱柱：C18(4.6X250mm、5ym);
[0035] 流动相：甲醇:水运行梯度见下列表3;
[0036]检测波长：224nm;
[0037] 进样量:5ul;
[0038] 柱温:30°C;
[0039] 流速：1 .Oml/min;
[0040] 记录色谱图至lOmin。
[00411 表3流动相：甲醇、水运行梯度表 [0042]
[0043]~该测定法的验证见表3 '
' '
[0044]见表3 RPT原料药中DMF残留测定法验证结果汇总
[0045]
[0046j 新卄友米用高效液相色谮法测足的RPT原科药中的DMF残留通过验址开以运仃于 生产过程的检测，结果准确可靠。见实例图谱附图3~5。
[0047] 另外在测定的图谱记录过程中进行了优化，该测定法设置的梯度在前lOmin内洗 脱平缓，采集基线平滑，待测组分在4.4min左右已被洗脱出，lOmin后洗脱强度增大，随着系 统压力的减小采集基线上漂，在处理数据时选择量程以显示组分DMF目标峰为主，色谱图记 录至lOmin后以后运行的方式处理，便于数据的处理。效果图见6~7。
[0048] 溶剂残留的测定药典及相关文献收载测定法均采用气相色谱法，在测定法在实际 运用过程中出现了不适用。在开发RPT原料药中的DMF残留的测定法时，我们突破常规的思 路，采用高效液相色谱法:一是避开了气相色谱法高温带来的RPT原料药的裂解产生的干 扰无法排除的困扰;二是采用高效液相色谱法操作更便利，测定成本也相对降低。还利用 RPT原料药中待测组分DMF易溶于水而RPT原料药难溶于水的特性，采用水做溶剂解除了 RPT 原料药的高温裂解，RPT原料药在水中难溶也减小了测定干扰。
【主权项】
1. 一种富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法，其特征在于，包括如下 步骤： 取富马酸卢帕他定原料药于具塞滤芯管中，加水密塞振摇并超声5min，3000转滤芯 lOmin，0.45um滤膜过滤后取上清液，作为供试液； 取DMF于量瓶中，加水溶解并稀释至刻度后另取5.0ml于50ml的量瓶中加水稀释至刻度 摇匀作为对照液； 量取上述供试液与对照液各5ul按高效液相色谱法依法测定，并记录色谱图至lOmin， 按外标法计算，DMF残留。2. 如权利要求1所述的富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法，其特征 在于，高效液相色谱测定的条件为:色谱柱C18(4.6 X 250_、5μπι);流动相为甲醇与水;检测 波长224nm;进样量5μηι;柱温30°C;流速1 · OmL/min。3. 如权利要求2所述的富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法，其特征 在于，流动相中甲醇与水以梯度运行，具体为，Omin，甲醇15份，水85份；lOmin，甲醇30份，水 70份;20min，甲醇100份，水0份;25min，甲醇100份，水0份;35min，甲醇15份，水85份。
【专利摘要】本发明提供一种富马酸卢帕他定原料药合成工艺中DMF残留的测定方法，包括如下步骤，取富马酸卢帕他定原料药于具塞滤芯管中，加水密塞振摇并超声5min，3000转滤芯10min，0.45um滤膜过滤后取上清液，作为供试液；取？DMF于量瓶中，加水溶解并稀释至刻度后另取5.0ml于50ml的量瓶中加水稀释至刻度摇匀作为对照液；量取上述供试液与对照液各5ul按高效液相色谱法依法测定，并记录色谱图至10min，按外标法计算，DMF残留。开待测样品的溶解浓度过高而导致的色谱柱容量超载、减小测定干扰。
【IPC分类】G01N30/88
【公开号】CN105510496
【申请号】CN201510828197
【发明人】李芳
【申请人】宜昌东阳光长江药业股份有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年11月25日