一种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种酱油渣中可溶性膳食纤维的提取新方法，具体涉及一种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，属于食品废弃物综合加工技术领域。
【背景技术】
[0002]近年来，国内外对膳食纤维进行了大量的研究，一般认为膳食纤维是指人类胃肠道消化酶无法酶解从而用来消化吸收，但却能被某些存在于人体大肠内的微生物所利用，从而进行分解发酵的植物性食品中的非淀粉类多糖物质和木质素的统称。按能被溶解的程度不同，膳食纤维一般两大类，分别是不溶性膳食纤维(IDF)和可溶性膳食纤维(SDF)。可溶性膳食纤维具有缓解便秘，预防肠道疾病；降低胆固醇的水平，预防冠心病和动脉粥样硬化等心血管疾病；预防糖尿病；利于降低血压；抗乳腺癌的作用等多种功效。
[0003]酱油渣别名又叫做酱渣，是酱油酿造过后剩下的残渣，是生产酱油过程中产生的一种副产品。生产酱油的原料中只有部分蛋白质、淀粉等营养物质能在酱油发酵过程中被部分利用，酱油渣中仍残留有大量的脂质、纤维素等其他营养成分。中国是全世界生产酱油渣产量最高的国家，但目前关于酱油渣研究的报道除了开发酱油渣应用于肥料、饲料的之外却少之又少。为了迎合城市需求，生产高档酱油的企业不少。所以大多数企业一般会选择大豆、面粉或者小麦等来发酵酱油，所以生产出来的酱油渣含有大量的油脂、磷脂、黄酮、膳食纤维等营养价值，很有开发利用的价值和应用前景。
[0004]目前，可溶性膳食纤维的提取方法主要有溶剂萃取法、酶法提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超滤法、酶法-化学结合法、发酵法等。传统溶剂提取法耗时耗能，消耗大量溶剂，经济与环境成本很高。微波辅助提取技术通过微波的温度效应及电磁场效应来提高提取效率，具有选择性高、提取时间短、易挥发性成分的提取得率高以及不需要特殊的分离步骤等优点，超声波利用空穴作用，提高传质速率，具有提取时间短的同时保证高的得率的优点。如果能够结合微波-超声波优点于一体，利用微波-超声波协同提取可溶性膳食纤维，其提取效率将大大增强。
【发明内容】
[0005]为了克服现上述现有技术的不足，本发明提供了一种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，主要原料为酱油渣，其制备方法按如下步骤进行:
步骤I)预处理:将新鲜酱油渣放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60 °C，恒温干燥，当含水率低于1.5%时，放入手提式粉碎机中，粉碎5 min后，过60目筛，得到酱油干渣。
[0006]步骤2)酱渣脱脂:向步骤I)中的酱油干渣加入石油醚，以每克酱油干渣加入5 mL石油醚计，混合均匀，封胶封口 12小时后，用移液枪移除石油醚，重复1-3次，剩余部分放通风处自然干燥，制得脱脂后的酱油渣。
[0007]步骤3)微波-超声波协同萃取:向经过步骤2)处理的酱油渣中加入纯水，按以每克酱油渣加入15 mL纯水计，混合均匀；并加入0.1 mo I/L盐酸溶液，调节pH到4.5，置于微波-超声波协同萃取仪中，超声波常开条件下即600 W，微波功率50 W，间歇萃取时间为500 S，进彳丁萃取。
[0008]步骤4)酶解:将萃取之后的酱油渣与纯水的混合液，利用0.1 mol/L的盐酸将pH调至5.0-7.0后，加入木瓜蛋白酶，以10mL混合液加入木瓜蛋白酶0.5-2.5g计，在55-75°C酶解40 mim-80 min后，加热至160 °〇恒温3 min将酶灭活；再利用0.1 mol/L的盐酸将溶液PH调至3.5-5.5后，加入纤维素酶，以10mL混合液加入l_4g纤维素酶计，在30-50°C酶解30 mim-70 min后，再加热至160 °C恒温3 min将酶灭活，抽滤后得到酶解液。
[0009]步骤5)旋蒸:将步骤4)所得的酶解液，置于旋转蒸发仪上，进行旋转蒸发，条件设定为温度70 0C、转速50 r/min,旋转蒸发得到浓缩液，浓缩液体积为旋转蒸发前酶解液体积的1/5。
[0010]步骤6)醇沉:向步骤5)所得的浓缩液中，加入95%乙醇进行醇沉，其体积比为，浓缩液:95%乙醇=1:4，混合均匀，过夜放置18 h，第二天将醇沉溶液放于离心管中，并放入离心机，以4000 r/min的转速离心5 min，弃上清液，再加入纯水溶解后，再以4000 r/min的转速离心5 min，再次弃去上清液，制得醇沉沉淀物。
[0011]步骤7)将步骤6)醇沉沉淀物放入冷冻干燥机中，冷冻干燥，即得到可溶性膳食纤维。
[0012]所述的步骤4)优选酶解:将萃取之后的酱油渣与纯水的混合液，利用0.1 mol/L的盐酸将pH调至6.5，加入木瓜蛋白酶，以10mL混合液加入Ig木瓜蛋白酶计，在65 °〇酶解60 min，加热至160 °C恒温3 min将酶灭活；再利用0.1 mol/L的盐酸将溶液pH调至
4.5，加入纤维素酶，以10mL混合液加入3g的纤维素酶计，在45 °C酶解50 min,加热至160°C恒温3 min将酶灭活，抽滤后得到酶解液。
[0013]本发明集中了微波、超声波两种提取方法的优点，同时结合了生物酶的高效活性等优点，提取时间短，能提高酱油渣中可溶性膳食纤维的提取效果，简单、安全、可靠，成本经济，具有广阔的推广应用前景。
【具体实施方式】
[0014]下面结合实施例对本发明的方法和效果进一步说明。
[0015]实施例1
所述的新鲜酱油渣取材于徐州恒顺万通食品酿造有限公司。
[0016]—种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，其制备方法如下:
将新鲜酱油渣放在电热恒温干燥箱中，将其温度调节到60 0C，恒温干燥；当含水率低于1.5%时，把烘干的酱油渣放在手提式粉碎机中，粉碎5 min后，过60目筛，得到干渣样品后，进行脱脂处理，即准确称取2 g酱油渣放入100 mL烧杯中，再加入10 mL石油醚，用封口胶封住小烧杯杯口后，浸泡12小时，用移液枪除去石油醚，重复一至两次，剩余部分放通风处自然干燥即可得到脱脂后的酱渣。
[0017]精确称取脱脂后的酱油渣2 g放入100 mL小烧杯中，加入30 mL纯水，将样品用0.1 mol/L盐酸溶液调节pH到4.5，放于微波-超声波协同萃取仪中，超声波(600 W)常开，微波功率50 W，间歇萃取时间为500 S0
[0018]将萃取之后的酱油渣与纯水的混合液取lOOmL，利用0.1 mol/L的盐酸将pH调至
5.5，加入0.5g木瓜蛋白酶，55 °C酶解40 mim后，加热至160 °C，保持3 min将酶灭活；再利用0.1 mol/L的盐酸将溶液pH调至3.5，加入Ig的纤维素酶，35 °C酶解40 min后，再加热至160 °C，保持3 min将酶灭活，抽滤后得到酶解液；
得到的酶解液进行抽滤，之后得所需滤液，将该滤液在旋转蒸发仪上旋转蒸发，条件设定为70 °C、50 r/min，旋转蒸发得到浓缩液。
[0019]取浓缩液5 mL,加入20 mL的95%乙醇进行醇沉，过夜放置。第二天将醇沉溶液等量放入离心管中，放入离心机中以4000 r/min的转速离心5 min，弃上清液，再加入纯水溶解后，再以4000 r/min的转速离心5 min，再次弃去上清液。将沉淀物放入冷冻干燥机中冷冻干燥，得到可溶性膳食纤维粉末，经过处理后待测样品，用电子天平测定其重量，计算出可溶性膳食纤维的提取率为1.365%。
[0020]实施例2
所述的新鲜酱油渣取材于徐州恒顺万通食品酿造有限公司。
[0021]—种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，其制备方法如下:
将新鲜酱油