的制备方法，它包括以下步骤:根据上述配方量称量各组分，将海藻糖、单油酸甘油酯和泊洛沙姆407用60°C水浴加热熔融，并充分混合均匀，随后将温度降低到30°C，加入活性成分和左旋维生素C充分溶解混匀得到混合液，将混合液滴加于水中，然后进行超声分散，并在超声分散后再进行高压均质，即得到液晶纳米微球透皮剂。
[0068]实施例5:
[0069]—种纳米微球透皮剂，其由以下重量份原料组成:
[0070]活性成分8份；
[0071]单油酸甘油酯I份；
[0072]海藻糖0.7份
[0073]左旋维生素C 0.5份；
[0074]泊洛沙姆407 10份；
[0075]纯净水90份；
[0076]所述活性成分为苹果干细胞活化因子、葡萄干细胞活化因子、积雪苷、大豆水解蛋白的组合物，按照重量比1:1:1: 0.3混合。
[0077]上述纳米微球透皮剂的制备方法，它包括以下步骤:根据上述配方量称量各组分，将单油酸甘油酯和泊洛沙姆407用60°C水浴加热熔融，并充分混合均匀，随后将温度降低到30°C，加入活性成分充分溶解混匀得到混合液，将混合液滴加于水中，然后进行超声分散，并在超声分散后再进行高压均质，即得到液晶纳米微球透皮剂。
[0078]实施例6:
[0079]对比例1:不加海藻糖和维生素C:
[0080]—种纳米微球透皮剂，其由以下重量份原料组成:
[0081]活性成分5份；
[0082]单油酸甘油酯I份；
[0083]泊洛沙姆407 11份；
[0084]纯净水90份；
[0085]所述活性成分为苹果干细胞活化因子、葡萄干细胞活化因子、积雪苷、大豆水解蛋白的组合物，按照重量比1:1:1: 0.2混合。
[0086]上述纳米微球透皮剂的制备方法，它包括以下步骤:根据上述配方量称量各组分，将单油酸甘油酯和泊洛沙姆407用60°C水浴加热熔融，并充分混合均匀，随后将温度降低到30°C，加入活性成分充分溶解混匀得到混合液，将混合液滴加于水中，然后进行超声分散，并在超声分散后再进行高压均质，即得到液晶纳米微球透皮剂。
[0087]对比例2:活性成分不加大豆水解蛋白:
[0088]—种纳米微球透皮剂，其由以下重量份原料组成:
[0089]活性成分6份；
[0090]单油酸甘油酯I份；
[0091]海藻糖0.9份
[0092]左旋维生素C 0.5份；
[0093]泊洛沙姆407 10份；
[0094]纯净水90份；
[0095]所述活性成分为苹果干细胞活化因子、葡萄干细胞活化因子、积雪苷，按照重量比1:1:0.3 混合。
[0096]上述纳米微球透皮剂的制备方法，它包括以下步骤:根据上述配方量称量各组分，将海藻糖、单油酸甘油酯和泊洛沙姆407用60°C水浴加热熔融，并充分混合均匀，随后将温度降低到30°C，加入活性成分和左旋维生素C充分溶解混匀得到混合液，将混合液滴加于水中，然后进行超声分散，并在超声分散后再进行高压均质，即得到液晶纳米微球透皮剂。
[0097](I)透皮吸收率:
[0098]将本发明制备的纳米微球透皮剂进行小鼠体外透皮实验，所用的实验仪器为Franz立式透皮扩散池，立式透皮扩散池的结构包括供给室、给药系统、接收室和取样口。其中，供给室用于放置实验样品，接收室装有接收液，接收液为水，接收室底部设置有磁力搅拌器。
[0099]进行小鼠体外透皮实验前，先将小鼠断颈处死，然后立即用电推剪除去小鼠背部的毛发，剪取小鼠背部皮肤，并去掉小鼠背部皮肤的皮下脂肪组织，并用清水冲洗干净后，将去掉皮下脂肪组织的小鼠背部皮肤置于生理盐水中，冷藏备用。
[0100]分别对上述7种纳米微球透皮剂进行小鼠体外透皮实验，实验时，将上述冷藏备用的去掉皮下脂肪组织的小鼠背部皮肤固定于Franz立式透皮扩散池的供给室与接收室之间，而且，该小鼠背部皮肤的角质层面向供给室，使其与供给室中的纳米微球透皮剂密切接触，供给室中的纳米微球透皮剂的放入量均为2mL。接收室置于32°C ±1°C的恒温水浴中，并开启磁力搅拌器，搅拌速度为200r/min。然后分别在第2h、4h、6h、8h、1h、12h、24h的时间点进行取样，每次取样量为2mL每次取样后，立即补充2mL的空白接收液，补液时注意排尽接收室中的气泡。然后将所取的样液用0.45 μm微孔滤膜过滤后利用高效液相色谱仪测定样液中苹果干细胞活化因子的含量。每种纳米微球透皮剂重复进行3次小鼠体外透皮实验。然后根据每次实验测定的苹果干细胞活化因子的含量，计算皮肤单位面积的平均累积渗透量。
[0101]实验后经计算，7种纳米微球透皮剂中，实施例1-5的积雪苷透皮吸收量显著高于对比实施例，实施例1的苹果干细胞活化因子透皮吸收量分别是是对比例I和对比例2的1.5倍和1.3倍。
[0102](2)稳定性测试:
[0103]本发明方法制备的纳米微球透皮剂性能稳定，耐热耐震荡，在转速为每分钟10000转的离心机中离心50分钟不分层，45度环境下保存，6个月不分层(实施例1制得的纳米微球透皮剂可以达到8个月不分层，为最优实施例)、不变色；常温储存3年以上不分层，
稳定性非常好。
[0104]对比例I的纳米微球透皮剂性能稳定，耐热耐震荡，在转速为每分钟10000转的离心机中离心20分钟不分层，超过25分钟开始分层；45度环境下保存，3个月不分层、不变色，超过3个月开始分层和变色。
[0105]对比例I的纳米微球透皮剂性能稳定，耐热耐震荡，在转速为每分钟10000转的离心机中离心25分钟不分层，超过25分钟开始分层；45度环境下保存，3个月不分层、不变色，超过3个月开始分层和变色。
[0106](3)使用效果:
[0107]使用90天后评价，消费者自述以及皮肤科医生的观察报告，均证实其添加本发明纳米微球透皮剂的产品抗老化的效果优于仅添加对比例I和对比例2。
[0108]上述实验说明，几种活性成分不仅仅在效果上有协同作用，还意想不到的，在透皮吸收率上有协同作用，主要是大豆水解蛋白在特定的比例下，具有显著的协同增强透皮吸收率的作用(经实验测试，改变大豆水解蛋白的比例，不在本发明范围时，其并无协同增强透皮吸收率的作用)。
[0109]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种纳米微球透皮剂，其由以下重量份原料组成: 活性成分5-8份； 单油酸甘油酯I份； 海藻糖0.5-0.9份 左旋维生素C 0.5份； 泊洛沙姆407 10-11份; 纯净水90份； 所述活性成分为苹果干细胞活化因子、葡萄干细胞活化因子、积雪苷、大豆水解蛋白的组合物，按照重量比1:1:1:0.2-0.3混合。2.权利要求1所述的纳米微球透皮剂，其特征在于，其由以下重量份原料组成: 活性成分5份； 单油酸甘油酯I份； 海藻糖0.9份 左旋维生素C 0.5份； 泊洛沙姆407 10份; 纯净水90份； 所述活性成分为苹果干细胞活化因子、葡萄干细胞活化因子、积雪苷、大豆水解蛋白的组合物，按照重量比1:1:1: 0.3混合。3.权利要求1-2所述的纳米微球透皮剂的制备方法，它包括以下步骤: 根据上述配方量称量各组分，将海藻糖、单油酸甘油酯和泊洛沙姆407用60°C水浴加热熔融，并充分混合均匀，随后将温度降低到30°C，加入活性成分和左旋维生素C充分溶解混匀得到混合液，将混合液滴加于水中，然后进行超声分散，并在超声分散后再进行高压均质，即得到液晶纳米微球透皮剂。
【专利摘要】本发明公开了一种纳米微球透皮剂，其由以下重量份原料组成：活性成分5-8份；单油酸甘油酯1份；海藻糖0.5-0.9份；左旋维生素C？0.5份；泊洛沙姆407？10-11份；纯净水90份；所述活性成分为苹果干细胞活化因子、葡萄干细胞活化因子、积雪苷、大豆水解蛋白的组合物，按照重量比1:1:1:0.2-0.3混合。针对皮肤抗老化的多个方面，四种活性成分协同增效，提高了产品皮肤抗老化效果。本发明方法制备的纳米微球透皮剂性能稳定，耐热耐震荡，稳定性非常好。
【IPC分类】A61K8/04, A61K8/60, A61K8/86, A61K8/37, A61K8/97, A61K8/67, A61K8/73, A61K8/64, A61Q19/08
【公开号】CN105168025
【申请号】
【发明人】苗本武
【申请人】薇碧生物科技（上海）有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月6日