一种新的萜类吲哚生物碱化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从芜菁的干燥根中分离得到的一种萜类吲哚 生物碱化合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 芜菁(Brassica rapa L.)也叫蔓菁、莞根，是十字花科，芸苔属，二年生草本，全国 各地均有栽培。维吾尔语称为"恰玛古"，是维吾尔医药常用药材，种子或根为其药用部分。 《晶珠本草》记载:妞玛为作物类药物，其植物为芜菁(蔓菁）。蔓菁味辛，性温。治培根病，龙 病、生赤巴，蔓菁连叶滋补，蔓菁子解毒，解诸种食物中毒。各地均以十字花科芜菁(又称莞 根)入药。中医认为，芜菁味甘、辛、苦，性温，无毒;入胃、肝、肾三经;具有开胃消食，下气宽 中，止咳化痰，利湿解毒，温和脾胃之功效。对治疗寒积腹痛、食欲不振、食积不化、黄疽、乳 痈以及皮肤疖肿等症效果显著。在《本草纲目》《太平圣惠方》《世医得效方》中早有记载，称 其具有美容、醒酒、促进消化，增强体质等功效。《达吾得志》中记载："清除多余体液，利尿退 月中，消除黄疽，清退伤寒，消除腰痛，祛斑生辉等:治异常体液增多，各种浮肿，各种黄疽，各 种伤寒，腰部酸痛，各种黑斑等。"《药物宝库》中记载："润肺止咳，软肠通便，开胃增食，溶石 排石，通利小便等，治肺燥咳嗽，肠燥便秘，胃纳不佳，各种结石，小便不利等。"
[0003] 芜菁对环境的适应性强，且在少数民族中有着悠久的食用历史，同时其重要的药 用价值逐渐受到人们的关注。研究表明，芜菁含有如下化学成分：皂苷、黄酮类、糖类及其 苷、生物碱类、挥发油、酚类、鞣质、氨基酸、蛋白质等。
[0004] 现在药理研究表明芜菁具有抗氧化、清除自由基作用，抗肿瘤、抗癌作用，降血糖 作用，抗缺氧活性，抑菌作用，抗疲劳作用等。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从芜菁的干燥根中分离得到的一种萜类吲哚生物碱化 合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I):
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将芜菁的干燥根粉碎，用70 ~80%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的 正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中乙酸 乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱8个柱体积， 收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物用 正相硅胶分离，依次用体积比为50:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个 组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、5:1和2:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离， 用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓 缩得到纯的化合物(I)。
[0010] 进一步地，步骤(a)中，用75%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备治疗慢性粒细胞白血病的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗慢性粒细胞白血病的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0019] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0020] 主要材料、试剂来源及仪器类型：
[0021] 乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限 公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0022] 分离制备方法：（a)将芜菁的干燥根（3kg)粉碎，用75 %乙醇热回流提取（15L X 3 次），合并提取液，浓缩至无醇味(4L)，依次用石油醚(4LX3次）、乙酸乙酯(4LX3次)和水饱 和的正丁醇(4LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔树脂除杂，先用5%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙 醇洗脱8个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70% 乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为50 :1 (8个柱体积）、30 :1 (8个柱体积）、 15:1(8个柱体积)和5:1(10个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(c) 中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1 (8个柱体积）、5:1 (10个柱体积)和2:1 (8个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷 键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积 洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物（I) (538mg，HPLC归一化纯度大于98% )。
[0023] 结构确证:黄色粉末;HR-ES頂S给出的准分子离子峰m/z 415.1829[M+H] +，表明化 合物分子式为C22H26N2O6，不饱和度为 11。h-NMR谱(pyridine-d5，500MHz)中，H-1 (11 · 70，S)， H-3(3.55，d，J = 10.2Hz)，H-5(3.76，dd，J=10.3,3.2Hz)，H-6a(3.65，m)，H-6b(3.32，m)，H-9(7.52，d，J = 2.2Hz)，H-ll(7.26，dd，J = 8.5,2.2Hz)，H-12(7.45，d，J = 8.5Hz)，H-14a (2.78，d，J = 12.7Hz)，H-14b(2.04，ddd，J=12.7，12.3，10.2Hz)，H-15(2.14，m)，H-16 (3.19，m)，H-17(9.83，d，J = 4.7Hz)，H-18(0.87，t，J = 7.8Hz)，H-19a(1.63，m)，H-19b (1.28，m)，H-20(2.08，m)，H-21a(3.84，dd，J = 10.7,2.5Hz)，H-21b(2.28，d，J=10.7Hz)， 22-0Me (3 · 59，s); 13C-NMR谱（pyr idine-ds，125MHz)中，C-2 (134 · 8，C)，C-3 (62 · 8，CH)，C-5 (69.4，CH)，C-6(26.9，CH2)，C-7(108.2，C)，C-8(129.2，C)，C-9(103.8，CH)，C-10(152.2， C)，C-11(112.6，CH)，C-12(112.9，CH)，C-13(132.1，C)，C-14(33.5，CH2)，C-15(38.5，CH)， C-16(60.1，CH)，C-17(202.1，CH)，C-18(11.5，CH3)，C-19(22.9，CH2)，C-20(40.2，CH)，C-21 (55 · 7，CH2)，C-22(174 · 8，C)，C-23(176 · 2，C)，22-0Me(51 · 5，CH3)。红外波谱表明该化合物含 有羰基（1724(31^1与1629CHT 1)基团；紫外波谱表明该化合物含有吲哚（最大吸收205nm， 274nm与31 lnm)基团。匪R谱与13C-匪R谱及DEPT谱显示存在1，2，4-三取代苯基δΗ7.52 (1!1，(1，了 = 2.2泡，!1-9)，7.26(1!1，(1(1，了 = 8.5,2.2泡，!1-11)与7.45(1!1，(1，了 = 8.5抱，!1-12); 一个甲氧基(阳3.59,8,22-〇16);-组四取代双键0(：134.8与1〇8.2);两个羰基0(：174.8与 176 · 2); -个醛基(δ〇202 · 1)。此外，在1H-1!! COSY谱中，证明存在明显的!1-3/!12-14/!1-15/!1-16/H-17，H3-18/H2-19/H-20/H2-21，H-15/H-20，H-5/H2-6 以及 H-11/H-12 信号相关。据 HMBC 谱分析可知，H-5与C-23的相关性表明-C00H与C-5位相连，甲氧基与C-22的相关性说明-OMe 与C-22位相连。在这类生物碱骨架中，H-15总是处在构型的α位；另外，H-3、H-14b与H-15三 者之间的偶合常数J 3,14b与心仙,15为10.2与12.3，表明!1-3、!1-1413与!1-15为同轴顺式构型。 R0ESY 谱中，H-3 与 H-5，H-3 与 H-15，H-3 与 H-20 以及 H-15 与 H-20 的相关性表明 H-3、H-5 与 H-20 为α构型。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和R0ESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定 该化合物如下所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致，
[0025] 实施例2:化合物（I)药理作用试验
[0026]