含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及多肽衍生物的合成领域，具体涉及一种含B〇C侧链氨基保护的双保护 赖氨酸(^11〇(3-1^8〇3〇(3)-〇!〇的合成工艺。
【背景技术】
[0002] 赖氨酸是最常见的氨基酸之一，侧链含有一个氨基，因此是一种碱性氨基酸。侧链 氨基具有较强的反应活性，因此在多肽合成中需要进行保护。Fm 〇C-L-Lys(B〇C)-OH是一种 常用的双保护赖氨酸，侧链氨基保护基则常用Bo c。
[0003] 该产品传统的制备工艺是利用Cu+2或9-BBN为络合试剂对赖氨酸alpha-氨基和 羧基进行保护，然后加入Boc酸酐对epsilon-氨基进行选择性保护，最后用硫化钠或者8-羟 基喹啉等脱铜试剂除去铜或用三氟过氧乙酸等氧化剂除去9-BBN，再利用Fmoc-OSU对 alpha-氨基进行保护，得到所需产品。传统工艺脱铜试剂硫化钠或者8-羟基喹啉，硫化钠脱 铜时会产生刺激性有毒气体，给安全环保造成较大压力。而8-羟基喹啉价格高，提高了原料 成本。
【发明内容】
[0004] 为了克服现有技术的上述技术缺点，本发明的目的是提供一种含Boc侧链氨基保 护的双保护赖氨酸(Fmo c-Ly s (Boc) -OH)的新型合成工艺。本发明的工艺将避免硫化钠脱铜 时产生刺激性有毒气体，解决安全环保问题；同时解决因8-羟基喹啉价格高而造成的原料 成本偏高的问题。
[0005] 完成上述发明任务的技术方案是，一种含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸 (Fmoc-Lys (Boc)-OH)的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 用三氟化硼为络合剂，对赖氨酸alpha-氨基和羧基进行保护； 加入Boc酸酐对epsi Ion-氨基进行选择性保护； 然后用碱液除去硼络合物； 利用Fmoc-〇SU( 9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯)对alpha-氨基进行保护，得到所需产 品。
[0006] 更具体和更优化地说，本发明的合成方法是： ⑴.将赖氨酸分散于四氢呋喃中； ⑵.冰浴搅拌下加入甲醇钠； (3).自然升温至室温搅拌1小时； ⑷.加入50%的三氟化硼四氢呋喃溶液； (5) .缓慢升温至50度； (6) .搅拌5小时至体系澄清； (7) .加入二碳酸二叔丁酯的四氢呋喃溶液； (8) . 30%液碱控制pH为8左右至反应完全； (9) .加入液碱； (10) .冰浴搅拌半小时； (11) .减压回收四氢呋喃，大量白色固体析出； (12) ·尚心得中间体H-Lys (Boc)-OH湿品。
[0007] 以上步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是：1:5-1:1;最佳比例是1:2.05 以上步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是：1:0.8-1:1.5;最佳比例是1:1.05 以上步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:0.9-1:2;最佳比例是1:1.5 以上步骤⑵中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:0.9-1:5;最佳比例是1:1.2 以上步骤(9)中，赖氨酸与30%液碱的重量比是:4:1-6:1;最佳比例是5.5:1;所述的液碱 可以采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾，优先氢氧化钠。
[0008] 进一步优化，可以增加以下步骤： 03?.所得的H-Lys (Boc)-OH湿品中加水和乙酸乙酯;搅匀后用液碱调节pH至9; 丨14；!.分批投入Fm〇C-〇su( 9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯）至反应完全，反应过程用液 碱控制pH 9-10; 反应结束后用工业盐酸调pH至3; (丨B；l.分出乙酸乙酯层，乙酸乙酯层加饱和食盐水洗涤；
[m.无水硫酸钠干燥，抽滤，脱溶； 加入甲叔醚打浆2小时； iSl .抽滤，固体晾干得HPLC分析产品含量大于99.5%。
[0009] 以上步骤_中，H-Lys(Boc)-〇H折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:2_1:5;最佳比 例是1:3.42; 以上步骤[13丨中的液碱，可以采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾，优先碳酸钾。； 以上步骤(丨4|中，H-Lys(Boc)-0H折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是：1:0.8-1:1.5;最佳 比例是1:1.1; 以上步骤_中，H-Lys(Boc)-0H折干重量与加入甲叔醚的重量比是：1:15-1: 25;最佳 比例是1:18。
[0010] 本发明的工艺避免了传统工艺中硫化钠脱铜时产生刺激性有毒气体，解决了安全 环保问题；同时解决了因8-羟基喹啉价格高而造成的原料成本偏高的问题。采用本发明的 工艺，可以比传统工艺降低成本15%。
【附图说明】
[0011] 图1是本发明的合成工艺图。
[0012] 具体实施办法 下面结合实例对本发明作进一步的说明，其目的仅在于更好的理解本发明的内容而非 限制本发明的保护内容。
[0013] 实施例1，含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸(Fm〇C-Lys(B〇C)-OH)的合成工艺。 参照图1。
[0014] (1).将146克赖氨酸分散于300毫升四氢呋喃中；(2).冰浴搅拌下加入甲醇钠57克； (3).自然升温至室温搅拌1小时。⑷.加入50%的三氟化硼四氢呋喃溶液203克；(5).缓慢升温 至50度;(6).搅拌5小时至体系澄清。(7).加入二碳酸二叔丁酯262克的四氢呋喃溶液;(8).液 碱控制pH为8左右至反应完全。(9).加入液碱20毫升;(10).冰浴搅拌半小时。(11).减压回收四氢 呋喃，大量白色固体析出；(12).离心得中间体H-Lys (Boc)-OH湿品。
[0015] 实施例2，
[Ι3?.将实施例1中所得H-Lys(Boc)-OH湿品中加水800克，乙酸乙酯800克，搅匀后用液 碱调节pH至9。_ .分批投入Fmoc-osu约350克至反应完全，反应过程用液碱控制pH9-10。[向 .反应结束后用工业盐酸调pH至3;_.分出乙酸乙酯层，乙酸乙酯层加饱和食盐水洗涤;昨). 无水硫酸钠干燥，抽滤，脱溶.加入4.3KG甲叔醚打浆2小时，抽滤，固体晾干得202克。 HPLC分析产品含量大于99.5%。_ .抽滤，固体晾干得HPLC分析产品含量大于99.5%。
[0016] 实施例3,与实施例1、2基本相同，但有以下改变： 步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是：1:5; 步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是：1:0.8; 步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:0.9; 步骤(7)中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:0.9; 步骤(9)中，赖氨酸与30%液碱的重量比是:4:1;所述的液碱采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳 酸钠或碳酸钾。
[0017] 实施例4