两亲性聚合物及其制备方法和两亲性聚合物纳米颗粒及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药领域，具体地，本发明涉及一种两亲性聚合物、一种两亲性聚合物 的制备方法、一种两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法、由两亲性聚合物纳米颗粒的制备方 法制备得到的两亲性聚合物纳米颗粒及其应用。
【背景技术】
[0002] 阳离子多肽因为其强有力的抗菌活性、抗菌谱广、可生物降解和生物相容性好而 得到了广泛的关注。大多数阳离子多肽能与微生物膜通过静电相互作用在细菌表面造成细 菌细胞壁/膜的破坏。然而由于其免疫原性高、体内半衰期短和成本高，限制了阳离子多肽 的临床应用。
[0003] ε -多聚赖氨酸是一种由白色链霉菌产生的天然阳离子多肽，由25-35个赖氨酸 残基组成。ε-多聚赖氨酸对革兰氏阳性（如金黄色葡萄球菌）和革兰氏阴性菌（如大肠 杆菌）显示了潜在的抗菌活性，已经被美国食品和药物管理局（FDA)批准可作为抗菌剂添 加在各式各样的产品中。
[0004] 然而，由于大多数临床使用抗生素并不损伤细菌的细胞膜或细胞壁，而是通过细 胞膜和/或细胞壁渗透到细胞内来抑制蛋白质合成和DNA复制，这种方式使得细菌容易对 抗生素产生耐药性。近年来，大量的实验和临床数据表明越来越多的细菌对传统抗生素产 生耐药性，因此需要开发新型抗菌制剂或材料来满足临床对抗菌制剂的需求。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是克服在单独使用聚赖氨酸进行抗菌时由于被细菌降解而导致的 抗菌性能消失的缺陷，提供一种生物安全性高、药效发挥迅速、药效持续时间长、抗菌谱广 且成本低的两亲性聚合物及两亲性聚合物纳米颗粒。
[0006] 为了实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种两亲性聚合物，该两亲性聚合物 具有式（1)所示的结构：
[0007]
[0008] 其中，m为20-100的整数，η为25-35的整数。
[0009] 第二方面，本发明提供了一种两亲性聚合物的制备方法，该方法包括：在溶剂和连 接剂的存在下，将式Α所示的聚合物与式Β所示的聚合物接触，
[0010]
[0011] 其中，在式A所示的聚合物中，m为20-100的整数，优选为21-30的整数；在式B 所示的聚合物中，η为25-35的整数。
[0012] 第三方面，本发明提供了一种两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，该方法包括：在 乳化反应条件下，将含有式（1)所示结构的两亲性聚合物的溶液与含有稳定剂的水溶液接 触，
[0013]
[0014] 其中，m为20-100的整数，优选为21-30的整数；η为25-35的整数。
[0015] 第四方面，本发明提供了一种通过本发明的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法制 备得到的两亲性聚合物纳米颗粒。
[0016] 第五方面，本发明提供了一种两亲性聚合物纳米颗粒在制备抗菌药物中的应用。
[0017] 本发明提供的两亲性聚合物纳米颗粒能够克服在单独使用聚赖氨酸进行抗菌时 由于被细菌降解而导致的抗菌性能消失的缺陷，而且，本发明提供的两亲性聚合物纳米颗 粒是一种生物安全性高、药效发挥迅速、药效持续时间长、抗菌谱广且成本低的纳米颗粒。
[0018] 另外，本发明提供的两亲性聚合物纳米颗粒对细菌，特别是枯草芽孢杆菌抗菌、金 黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有很好的抗菌活性。
[0019] 本发明的其它特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予以详细说明。
【附图说明】
[0020] 附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具 体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：
[0021] 图1是本发明实施例1的式Α所示的聚合物、式Β所示的聚合物和式⑴所示的 两亲性聚合物的红外光谱图。
[0022] 图2是通过透射电镜观察本发明实施例1的两亲性聚合物纳米颗粒的形貌图。
[0023] 图3是通过透射电镜观察本发明实施例1的两亲性聚合物纳米颗粒的粒径分布 图。
[0024] 图4是将聚赖氨酸以浓度为10 μ g/mL的水溶液形式和大肠杆菌共培养2小时后 的透射电镜图。
[0025] 图5是将本发明实施例1的两亲性聚合物纳米颗粒以浓度为10 μ g/mL的水溶液 形式和大肠杆菌共培养2小时后的透射电镜图。
【具体实施方式】
[0026] 以下对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体 实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0027] 第一方面，本发明提供了一种两亲性聚合物，该两亲性聚合物具有式（1)所示的 结构：
[0028]
[0029] 其中，m可以为20-100的整数，η可以为25-35的整数。
[0030] 根据本发明所述的式（1)所示的两亲性聚合物，优选情况下，m可以为21-30的整 数，η可以为25-35的整数。
[0031] 更加优选情况下，在本发明中，所述式（1)所示的两亲性聚合物的分子量可以为 5000-20000。
[0032] 在本发明中，需要特别说明的是，所述20-100的整数是指包括20和100在内的， 且包括20-100之间的每一个整数，也就是说20-100之间的每一个整数都是本发明的技术 方案，本领域技术人员可以根据实际需要选择m值的大小。同样的，针对η可以为25-35的 整数以及m优选为21-30的整数也是如上类似的解释，即η可以为25、26、27、28、29、30、31、 32、33、34和35中的任意一个整数，且m优选可以为21、22、23、24、25、26、27、28、29和30中 的任意一个整数。
[0033] 第二方面，本发明还提供了一种两亲性聚合物的制备方法，该方法包括：在溶剂和 连接剂的存在下，将式A所示的聚合物与式B所示的聚合物接触，
[0034]
[0035] 其中，在式A所示的聚合物中，m为20-100的整数，优选为21-30的整数；在式B 所示的聚合物中，η为25-35的整数。
[0036] 在本发明的所述两亲性聚合物的制备方法中，通过该方法制备得到的即为本发明 上述的式（1)所示的两亲性聚合物，因此，有关式（1)所示的两亲性聚合物的相关定义和解 释以及保护范围均适用于本发明的所述两亲性聚合物的方法中。
[0037] 根据本发明所述的两亲性聚合物的制备方法，其中，所述式Α所示的聚合物、式Β 所示的聚合物和连接剂的用量摩尔比可以为1-20 :1 :5-20 ;优选情况下，式A所示的聚合 物、式B所示的聚合物和连接剂的用量摩尔比为2-10 :1 :8-15。
[0038] 根据本发明所述的两亲性聚合物的制备方法，其中，所述接触的条件包括：接触的 温度为〇_35°C ;优选接触的温度为4_25°C。
[0039] 根据本发明所述的两亲性聚合物的制备方法，其中，所述接触的条件包括：接触的 时间为2_48h ;优选接触的时间为4_24h。
[0040] 在本发明所述的两亲性聚合物的制备方法中，所述连接剂可以包括1-乙 基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐和/或Ν，Ν' -二环己基碳酰亚胺。
[0041] 优选情况下，在本发明所述的两亲性聚合物的制备方法中，所述溶剂选自二甲基 亚砜和/或Ν，Ν-二甲基甲酰胺。
[0042] 在本发明中，需要特别说明的是，对所述溶剂的用量没有特别的限定，本领域技术 人员可以根据常规用量进行选择。
[0043] 在本发明中，所述溶剂可以为二氯甲烷、二甲基亚砜、乙醇和丙酮中的至少一种。
[0044] 根据本发明所述的两亲性聚合物的制备方法，该方法还可以包括：将所述接触后 得到的产物进行过滤除去固体杂质，并将过滤后得到的溶液在水中进行透析，然后冷冻干 燥，即可得到本发明所述的式（1)所示的两亲性聚合物的固态产品。
[0045] 第三方面，本发明提供了一种两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，该方法包括：在 乳化反应条件下，将含有式（1)所示结构的两亲性聚合物的溶液与含有稳定剂的水溶液接 触，
[0046]
[0047] ΑΤ，m 7? 丄DD 狀、」：^1，17匕32￡7? z丄
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[0048] 在本发明的所述两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法中，所使用的式（1)所示的两 亲性聚合物的相关定义和解释以及保护范围均与前相同，本发明在此不再赘述。
[0049] 根据本发明所