述的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，其中，所述含有式（1)所 示结构的两亲性聚合物的溶液可以包括所述式（1)所示结构的两亲性聚合物与二氯甲烷 形成的溶液。
[0050] 根据本发明所述的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，其中，相对于每mg式（1) 所示结构的两亲性聚合物，所述二氯甲烷的用量可以为〇. l_2〇mL。
[0051] 根据本发明所述的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，其中，所述稳定剂可以包 括聚乙烯醇（PVA)、十二烷基磺酸钠（SDS)、聚乙烯吡咯烷酮（PVP)和吐温80中的至少一 种。
[0052] 优选情况下，在本发明中，所述稳定剂为聚乙烯醇，且所述聚乙烯醇的分子量可以 为 1500-2000。
[0053] 在本发明所述的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法中，所述乳化反应条件为本领 域技术人员所公知，本发明在此不再赘述。例如在本发明中，可以采用在超声条件下进行乳 化反应。
[0054] 在本发明中，所述稳定剂采用本领域技术人员公知的两步法加入，也即，先将所述 两亲性聚合物溶液与一部分含有稳定剂的水溶液接触混合，经过超声乳化后，再将该乳化 后的产物加入到剩余部分含有稳定剂的水溶液混合。两部分的含有稳定剂的水溶液的浓度 可以相同或不同，本领域技术人员可以根据本领域内常规使用的浓度进行选择。本发明优 选所述稳定剂水溶液的浓度为〇. 3-1重量％。
[0055] 根据本发明所述的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，对所述含有式（1)所示结 构的两亲性聚合物的溶液与含有稳定剂的水溶液接触的方式没有特别的限定，优选情况 下，本发明可以采用先将含有式（1)所示结构的两亲性聚合物溶于溶剂中形成溶液，然后 将所述溶液与一部分含有稳定剂的水溶液进行接触。本发明的方法对接触的条件没有特别 的限定，例如可以在室温条件下接触l-60min。
[0056] 根据本发明所述的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法，该方法还可以包括：除去 进行超声后所得到的产物中的溶剂例如二氯甲烷等，然后进行将含有两亲性聚合物纳米颗 粒的水溶液进行离心分离，收集沉淀物即可以得到高纯度的两亲性聚合物纳米颗粒。
[0057] 第四方面，本发明还提供了一种通过本发明的两亲性聚合物纳米颗粒的制备方法 制备得到的两亲性聚合物纳米颗粒。
[0058] 根据本发明所示的两亲性聚合物纳米颗粒，其中，所述两亲性聚合物纳米颗粒的 粒径为50-300nm。
[0059] 第五方面，本发明还提供了一种两亲性聚合物纳米颗粒在制备抗菌药物中的应 用。
[0060] 在本发明中，所述两亲性聚合物纳米颗粒特别地对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和 枯草芽孢杆菌具有很好的抗性。
[0061] 与现有抗菌聚合物相比，本发明所述的两亲性聚合物纳米颗粒具有以下优点：本 发明的两亲性聚合物制备过程简便、原料便宜，本发明的抗菌聚合物是含有大量正电荷的 氨基ε -聚赖氨酸，这种抗菌聚合物制备成的纳米颗粒通过带正电荷的氨基发挥抗菌作 用，同时纳米粒子的可以抵抗降解酶对ε -聚赖氨酸的降解作用，提高抗菌效果和时间。 [0062] 以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，所使用的原料均为市 售品。在以下实施例和对比例中，所述聚已内酯购自济南岱罡生物科技有限公司；所述聚赖 氨酸购自浙江银象生物科技有限公司；所述聚乙烯醇购自国药集团化学试剂有限公司，牌 号为PVA124,皂化度为85mol%，在25°C下的粘度为700mPas。
[0063] 实施例1
[0064] 本实施例用于制备本发明所述的式（1)所示的两亲性聚合物和两亲性聚合物纳 米颗粒，其中，m为30, η为30。
[0065] 制备两亲性聚合物：取式Α所示的聚已内酯（m为30,用量lg)和式Β所示的聚赖 氨酸（η为30)置于50mL圆底烧瓶中，加入5mL的DMS0,再加入N, Ν' -二环己基碳酰亚胺 (购自百灵威化学试剂有限公司，下同），其中，所述聚已内酯、聚赖氨酸和Ν，Ν' -二环己基 碳酰亚胺的用量摩尔比为5 :1 :10,在20°C温度下反应20h，反应结束后将产物进行减压浓 缩，将浓缩后的溶液在水中进行透析，冷冻干燥后得两亲性聚合物1-1，其中，聚已内酯、聚 赖氨酸和两亲性聚合物1-1的红外光谱图如图1所示，且两亲性聚合物1-1的分子量通过 飞行时间质谱仪（购自美国布鲁克道尔顿公司，型号为Microflex LRF MALDI-T0F，下同） 测得，平均分子量为5700。
[0066] 制备两亲性聚合物纳米颗粒：称取10mg两亲性聚合物1-1，溶解于lmL二氯甲烷 中，然后将该两亲性聚合物的二氯甲烷溶液加入到2mL的1重量％的聚乙烯醇水溶液，在 25°C下，用功率为57W且频率为23kHz的超声波辐射5min后，加入到10mL的0. 6重量％ 的聚乙烯醇水溶液中，磁力搅拌lOmin后除去二氯甲烷，然后在12000rpm/min条件下离心 lOmin，得到两亲性聚合物纳米颗粒1-2,其中，通过透射电镜观察该两亲性聚合物纳米颗粒 1-2的形貌图如图2所示，粒径分布如图3所示。
[0067] 实施例2
[0068] 本实施例用于制备本发明所述的式（1)所示的两亲性聚合物和两亲性聚合物纳 米颗粒，其中，m为25, η为35。
[0069] 制备两亲性聚合物：取式Α所示的聚已内酯（m为25,用量lg)和式Β所示的聚赖 氨酸（η为35)置于50mL圆底烧瓶中，加入5mL的DMS0,再加入Ν，Ν' -二环己基碳酰亚胺， 其中，所述聚已内酯、聚赖氨酸和Ν，Ν' -二环己基碳酰亚胺的用量摩尔比为8 :1 :8，在25°C 温度下反应15h，反应结束后将产物进行减压浓缩，将浓缩后的溶液在水中进行透析，冷冻 干燥后得两亲性聚合物2-1，其中，聚已内酯、聚赖氨酸和两亲性聚合物2-1的红外光谱图 与图1相似，且两亲性聚合物2-1的平均分子量为5500。
[0070] 制备两亲性聚合物纳米颗粒：称取l〇mg两亲性聚合物2-1，溶解于10mL二氯甲烷 中，然后将该两亲性聚合物的二氯甲烷溶液加入到2mL的1重量％的聚乙烯醇水溶液，在 25°C下，用功率为57W且频率为23kHz的超声波辐射5min后，加入到10mL的0. 6重量％ 的聚乙烯醇水溶液中，磁力搅拌lOmin后除去二氯甲烷，然后在12000rpm/min条件下离心 lOmin，得到两亲性聚合物纳米颗粒2-2,其中，通过透射电镜观察该两亲性聚合物纳米颗粒 2- 2的形貌图与图2相似，粒径分布与图3相似。
[0071] 实施例3
[0072] 本实施例用于制备本发明所述的式（1)所示的两亲性聚合物和两亲性聚合物纳 米颗粒，其中，m为20, η为25。
[0073] 制备两亲性聚合物：取式Α所示的聚已内酯（m为20,用量lg)和式Β所示的聚赖 氨酸（η为25)置于50mL圆底烧瓶中，加入5mL的DMSO,再加入Ν，Ν'-二环己基碳酰亚胺，其 中，所述聚已内酯、聚赖氨酸和Ν，Ν'-二环己基碳酰亚胺的用量摩尔比为3 :1 :12,在30°C 温度下反应15h，反应结束后将产物进行减压浓缩，将浓缩后的溶液在水中进行透析，冷冻 干燥后得两亲性聚合物3-1，其中，聚已内酯、聚赖氨酸和两亲性聚合物3-1的红外光谱图 与图1相似，且两亲性聚合物3-1的平均分子量为4900。
[0074] 制备两亲性聚合物纳米颗粒：称取10mg两亲性聚合物3-1，溶解于20mL二氯甲烷 中，然后将该两亲性聚合物的二氯甲烷溶液加入到2mL的1重量％的聚乙烯醇水溶液，在 25°C下，用功率为57W且频率为23kHz的超声波辐射5min后，加入到10mL的0. 6重量％ 的聚乙烯醇水溶液中，磁力搅拌lOmin后除去二氯甲烷，然后在12000rpm/min条件下离心 lOmin，得到两亲性聚合物纳米颗粒3-2,其中，通过透射电镜观察该两亲性聚合物纳米颗粒 3- 2的形貌图与图2相似，粒径分布与图3相似。
[0075] 实施例4
[0076] 本实施例用于制备如实施例1所示的两亲性聚合物和两亲性聚合物纳米颗粒，所 不同的是，式A所示的聚合物、式B所示的聚合物和连接剂的用量摩尔比不同。具体地为：
[0077] 制备两亲性聚合物：取式A所示的聚已内酯（m为30,用量lg)和式B所示的聚赖 氨酸（η为30)置于50mL圆底烧瓶中，加入5mL的DMSO,再加入N, Ν' -二环己基碳酰亚胺 (购自百灵威化学试剂有限公司，下同），其中，所述聚已内酯、聚赖氨酸和Ν，Ν' -二环己基 碳酰亚胺的用量摩尔比为12 :1 :10,在20°C温度下反应20h，反应结束后将产物进行减压浓 缩，将