1cm;
[0049] 2级：1 · Ocm〈薯块病斑直径< 2 · Ocm;
[0050] 3级：2 · Ocm〈薯块病斑直径< 3 · Ocm;
[0051 ] 4级：3 · Ocm〈薯块病斑直径< 4 · Ocm;
[0052] 5级:整个薯块腐烂，薯块病斑直径>4. Ocm;
[0053] 其中，抗性评价标准如下：
[0054]高抗:平均发病严重度<1.5;
[0055]抗病：1 · 5〈平均发病严重度< 2;
[0056]中抗:2〈平均发病严重度<3;
[0057] 感病：3〈平均发病严重度仝4;
[0058] 高感:4〈平均发病严重度。
[0059] 本中心采用本实施例1提供的方法，对广薯79、广薯87、广薯72和其它10份甘薯品 种或品系材料进行了抗性鉴定，其待鉴定甘薯材料的薯块病斑直径统计结果如表1所示，
[0060] 表1待鉴定甘薯材料的薯块病斑直径
[0061]
[0062] 广薯79作为已知的感病品种，其发病情况是作为本实施例提供的发病条件是否适 宜的对照标准。其抗性等级也是作为其它甘薯品种或品系的抗性等级参照标准。
[0063] 广薯79、待鉴定品系4、待鉴定品系9的抗性鉴定结果示意图分别如图1、图2和图3 所示。
[0064] 按本实施例的方法对广薯79以及12份甘薯品种或品系材料的发病严重度进行了 鉴定，计算平均发病率，进行抗性评定，其结果如表2所示，
[0065]表2爪哇黑腐病抗性鉴定结果
[0066]
[0067] 由表2可知，对12份甘薯品种或品系材料的爪哇黑腐病鉴定抗性评价表明，广薯 87、待鉴定品系3、待鉴定品系7、待鉴定品系9和待鉴定品系10等5个品种或品系的表现型为 中抗，其他品种或品系的抗性级别为感病和高感。通过本发明提供的方法，可迅速筛选出对 甘薯爪哇黑腐病抗性相对较强的品种。通过该方法也为甘薯的储藏过程提供指导:对于鉴 定得到抗性级别为感病和高感结论的品种，在储藏时要格外注意防治该病害。
[0068] 实施例2:
[0069] 本实施例提供一种甘薯爪哇黑腐病抗性鉴定方法，包括以下步骤：
[0070] 1)病原菌活化培养:将甘薯爪哇黑腐病菌LP1接种至TOA培养基平板，25°C活化培 养2天，利用灭菌打孔器从PDA培养基平板的边缘取一块直径为3_的含有菌丝体的菌块，将 所述菌块置于另一新的PDA培养基平板的中央，继续25°C活化培养2天；
[0071] 2)待鉴定甘薯材料准备:取广薯87、广薯72和广薯79三个品种的甘薯材料，清洗晾 干，削薯皮使待鉴定甘薯材料露出l-2cm 2创面;每个品种各取10个单重200g左右的薯块进 行平行试验；
[0072] 3)接种培养:利用灭菌打孔器从步骤1)继续活性培养后的PDA培养基平板边缘取 一块直径为6mm含有菌丝体的菌块，分别将长有菌丝体的一面贴附于待鉴定甘薯材料和对 照品种的创面，将待鉴定甘薯材料和对照品种置于温度为28°C，湿度为95%的培养室进行 培养；
[0073] 4)等级鉴定:接种培养5-10天后，将待鉴定甘薯材料和对照品种取出，观察病害情 况并测量薯块病斑直径，进行发病严重度分级，然后计算每个待鉴定甘薯材料和对照品种 的平均发病严重度，根据平均发病严重度进行抗性评价；
[0074]其中，发病严重度分级标准如下：
[0075] 1级:薯块正常无任何病症，薯块病斑直径< 1cm;
[0076] 2级：1 · 0cm〈薯块病斑直径< 2 · 0cm;
[0077] 3级：2 · 0cm〈薯块病斑直径< 3 · 0cm;
[0078] 4级：3 · 0cm〈薯块病斑直径< 4 · 0cm;
[0079] 5级:整个薯块腐烂，薯块病斑直径>4.0cm;
[0080] 其中，抗性评价标准如下：
[0081] 高抗:平均发病严重度<1.5;
[0082]抗病：1 · 5〈平均发病严重度< 2;
[0083]中抗:2〈平均发病严重度<3;
[0084]感病:3〈平均发病严重度<4;
[0085] 高感:4〈平均发病严重度。
[0086]本实施例于3个不同的时间对广薯87、广薯72和广薯79三个品种进行抗性鉴定，其 结果如表2所示。
[0087]表3广薯87、广薯72和广薯79爪哇黑腐病重复抗性鉴定结果 [0088]
[0089] 由表2的结果可知，3次不同时间对3个甘薯品种进行甘薯爪哇黑腐病抗性鉴定表 明，3次抗性鉴定结果较一致:广薯72高感爪哇黑腐病，广薯87中抗爪哇黑腐病，广薯79对爪 哇黑腐病表现为感病至高感。说明该方法具有良好的稳定性，其抗性鉴定的结果可靠。结合 本中心的统计数据，利用本发明方法评价的结果与储藏时3个品种的发病情况向吻合。
[0090] 上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围， 本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所 要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种甘薯爪哇黑腐病抗性鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 病原菌活化培养:将甘薯爪哇黑腐病菌接种至roA培养基平板，活化培养，在TOA培养 基平板上生长出菌丝体； 2) 待鉴定甘薯材料准备:取待鉴定甘薯材料和对照品种，清洗晾干，削薯皮使待鉴定甘 薯材料和对照品种均露出0 · 5-2cm2创面； 3) 接种培养:用打孔器从PDA培养基平板边缘取含有菌丝体的菌块，分别将长有菌丝体 的一面贴附于待鉴定甘薯材料和对照品种的创面，进行培养； 4) 等级鉴定:接种培养5-10天后，将待鉴定甘薯材料和对照品种取出，观察病害情况并 测量薯块病斑直径，进行发病严重度分级，然后计算每个待鉴定甘薯材料和对照品种的平 均发病严重度，根据平均发病严重度进行抗性评价。2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，病原菌活化培养的具体操作方法 如下：将甘薯爪哇黑腐病菌接种至PDA培养基平板，活化培养2天，从PDA培养基平板的边缘 取含有菌丝体的菌块，将所述菌块置于另一新的PDA培养基平板的中央，继续活化培养2天。3. 如权利要求1或2所述的方法，所述活化培养的具体操作步骤:将PDA培养基平板置于 25±3Γ培养。4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所述对照品种为广薯79。5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)中，所述培养步骤的具体参数如下:培 养温度为25 ± 3 °C，培养湿度为85-98 %。6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，发病严重度分级标准如下： 1级:薯块正常无任何病症，或者薯块病斑直径< lcm; 2级：1 · 0cm〈薯块病斑直径< 2 · 0cm; 3级:2 · 0cm〈薯块病斑直径< 3 · 0cm; 4级:3 · 0cm〈薯块病斑直径< 4 · 0cm; 5级:整个薯块腐烂，薯块病斑直径>4.0cm。7. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中，抗性评价标准如下： 高抗:平均发病严重度<1.5; 抗病：1.5〈平均发病严重度< 2; 中抗:2〈平均发病严重度< 3; 感病:3〈平均发病严重度< 4; 高感:4〈平均发病严重度。
【专利摘要】本发明提供一种甘薯爪哇黑腐病抗性鉴定方法，包括以下步骤：1)病原菌活化培养；2)待鉴定甘薯材料准备，使甘薯材料露出0.5-2cm2创面；3)接种培养：从PDA培养基平板边缘取含有菌丝体的菌块，分别将长有菌丝体的一面贴附于待鉴定甘薯材料和对照品种的创面，进行培养；4)等级鉴定：接种培养5-10天后，观察待鉴定甘薯材料病害情况并测量薯块病斑直径，进行发病严重度分级，再根据平均发病严重度进行抗性评价。本发明提供了一种操作简单、接种后发病周期短、发病过程稳定的甘薯爪哇黑腐病抗性鉴定评价方法。
【IPC分类】C12Q1/02
【公开号】CN105648028
【申请号】
【发明人】黄立飞, 房伯平, 叶芍君, 陈景益, 黄实辉, 张雄坚, 罗忠霞, 王章英, 姚祝芳, 陈新亮
【申请人】广东省农业科学院作物研究所
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2016年4月1日