一种源于黄花蒿的植物性杀螨剂及其制备方法

专利名称：：一种源于黄花蒿的植物性杀螨剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及植物性杀螨剂，特别涉及到以植物黄花蒿的杀螨活性化合物为主要成分的植物性杀螨剂及其制备方法。发明背景在人类需要控制的有害生物中，螨类具有特殊的重要意义。害螨根据与人类的关系可以分为农业螨类、医学螨类和储藏物螨类。农业螨类主要是指植食性的叶螨，其危害几乎遍及世界范围内所有的农作物和地区，^M，十螨re/r朋/c力Mc/z7加feW/2^是我国分布最广、发生最为严重的一种农业害螨。柑橘全;Ki葛以成螨、若螨吸食柑橘的叶片、娟丈茎M实汁液。l年发生12-20代左右，世代重叠。冬春干旱^f分发生早而多。以口器刺破寄主叶片M吸食汁液，被害叶面呈现无数灰白色小斑点，严重时全叶失绿变成灰白色，导致大量落叶；亦能为害果实及绿色枝梢，影响树势和产量，为我国柑桔生产的头号害虫。储藏物螨类主要是指粉螨，是一大类主要以植物或动物的有机残屑为食的植食、菌食和腐食性螨类，粉螨中的腐食酪螨7>r，A3gM""ce/j//cre是一种典型的以加工的食品为:f又食对象的储藏物螨类。螨类害虫个体小，繁殖快，代救多、适应性强、易产生抗药性、危害十分严重，是公认的最难防治的有害生物群i^一(张弘，孟铃.农用杀螨剂应用、开发现状膽望.农药，2003，42(3):14-17)。而且粉螨既是储藏物害虫，又是人^i禹病的病原虫。当前，控制害螨的药剂十分有限。就现有的药剂来说，螨类大都容易产生抗性。何林等的研究结M明，朱妙吋螨对曱氰菊酯、阿维菌素两种结构和作用机理完全不同的化学药品都产生了抗性，^^达螨灵的抗性较低。尽管抗性的产生遵循非常复杂的遗传和生物化学过程，但通常对合成化学品iikit产生抗性的原因是因为它们的活性成分取决于一种或多种同类型分予(何林.朱妙"十螨(T^r朋yc力〃s"'/7加&^//2〃50抗药性才/U里及抗性适合度研究.西南农业大学博士论文，2003，中国重庆)。因此，生物体通过产生生理的、行为的或形态的防御机制抑制分子活'l"生从而对毒素发生反应而形成抗性(RoushR.T.andJ.A.Mckenzie.杀虫剂和杀螨剂抗性的生态基因学.j朋"^^迈o/.(昆虫学年评)，1987,32:361-380)。此外，市场上销售的大多数杀螨剂对哺乳动物具有毒性，而且对天敌也有杀伤作用，与害虫综合治理(IPM)的要求有一定的差距。为了克服化学杀螨药剂带来的副作用，许多研究人员在探讨更为有效的理想的控制害螨的方法，从植物中筛选杀螨活性物质是一个重要方面。植物是生物活性化学物质的天然宝库，其产生的次生代谢产物超过40万种，其中大多数化学物质如萜烯类、生物碱、类黄酮、甾体、酚类、独特的tt酸和多糖等都具有杀虫和抗菌洽性。据报道约有2400种植物具有控制有害生物的活性，而在化学性质上作过调查研究的植物仅占4^^界王贿植物总数的10%，因此开发利用植物资源用于有害生物防治的前景十分广阔。植物源农药的开发研究可分为两种情况，一是直接从植物中提耳贿岁械分加工成农药'如从印楝树/"力'cs(A.Juss)种核中提取印楝素(Azadirachtin)等活性物质制成不同剂型的杀虫剂；二是以植物中有效活性成分的结构式作为先导^^物或合成模板开发出新的化学合成农药，如拟虫菊酯类、氨基甲S吏酯类、新烟碱类化学农药等。在杀虫植物的研究中，已经报道了一些植物具有杀螨活性，如Sundarame"/.评估了印楝提取物对二点叶螨的效果(SundaramLM.S.&L.Sloane.印楝素纯品和以印楝素为主要成分的生物杀虫剂对植食性叶螨二点叶螨的效果./.Aw/r肌5W.^ea/,力，B30:801-814)，美国专利4933371公开了由各种植物(即丝兰、皂素树Uuillaja)龙舌兰、烟草和甘草)中提取的皂苷用作杀螨剂。另外，美国专利4933371还公开了由各种植物如锡兰肉桂、黄樟、橙花、香柠檬、依兰香、玫瑰香樟的植物油中提取的里哪醇和其它油提取物用作杀螨剂。美国专利5352672中公开了印度楝种子提取物具有杀螨活性。我国国家知识产权局于2004年1月公开了加拿大的一项发明专利01809508.9,涉及到黎科植物土荆芥的油提取物的组合物的杀螨活性。这些研究报道和专利明确了从植物中可以获得比较理想的杀螨活性物质，以植物的提取物经过组配可以开发出植物性的杀螨剂。但是，有关植物杀螨剂的活性成分研究以及杀螨药剂的加工工艺研究等还是非常有限的。黄花蒿是一年生草;^直物，为菊科蒿属植物。林高"-150cm以上，全生育期120d左右。全抹黄绿色。花期8月~10月，果期10月~11月。明代以前的本草文献中，将青蒿/(i^e/"/w'aa//aceaHance和黄花蒿两种植物统称为草蒿或青蒿，黄花蒿的分布比青蒿"f^4的多，药用青蒿可能多为黄花蒿。黄花蒿在我国各地都有分布，生态适应性非常广，常生于山坡、林地、荒地。药农常于秋季花盛开时割耳5U也上部分，除去老茎，阴干，即可药用。喜湿润、忌干旱，怕渍水，光照要求充足。黄花蒿药用价值很高，青蒿素的衍生物可生产很多系列药品。青蒿素主治疟疾、结核病潮热，治中署、皮肤瘙痒、荨麻渗、脂溢性皮炎和灭蚊等。全草入药，洗净鲜用或晒干制药。黄花蒿对其他生物的生物活性M报道，如朱芬等报道了以黄花蒿为原料进行浸提，经生物活性测定，结果表明黄花蒿^r,e/2/w'a朋滞5L.粗提物对供试的黑翅土白虫义ft/o/2/c^e历e51尸Q/7ffos^/w/51ShiraM、赤和X^盗7>/60//〖朋csi^3/e朋/Herbst、谷喬朋/z，erz^Fabricius等6种害虫均具有拒食性(朱芬，雷朝亮，王健.黄花蒿粗提物对;Ut害虫拒食f生的初步研究.昆虫天敌，2003，25(1):16-19)。李云寿等报道了黄花蒿精油对米象57^;7力/A^L.、玉米象57妳力/细zea鹏/i"Motschulsky、绿豆象"7/oo6rwc/7〖wc/z/zje/^L.和蚕豆象5ri/c力iASr"/7鹏刀"sBoheman等4种重^r库害虫的成虫具有很强烈的熏杀活性(李云寿，唐绍宗，邹华英，等.黄花蒿提取物的杀虫活性.农药，2000,39(10):25-26)。Tripathi等提取得到黄花蒿挥发油，并测定了它对两种重M储昆虫赤拟谷盗7>/6<9//"迈csi^"e鹏(Herbst)和四纟^_§_象6W/cw6r"dw脳cw/sto(L.]的拒食活性和生长发育抑制活性的影响(TripathiAK，PrajapatiV,AggarwalKK,W"黄花蒿精油对;Ut储藏物曱虫的驱避和触杀活性./^bOT必Wo/Ho/,2000，93(1):43-47)。Tripathi等报道了从黄花蒿中分离出了1，S-桉树脑，并测定了对赤拟谷盗的触杀毒性，熏蒸活性和拒食活性(TripathiAK，PrajapatiV，AggarwalKK,W"黄花蒿中l，8-桉油烯对赤扣沐盗的毒1"生，拒食力十其后代繁殖的影响./Aco刀&"历o7,2001,94(4):979—983)。李宁等报道了黄花蒿对温室白粉虱7Wa/ewMesra/7orar/ar"/的室内生物活性，但黄花蒿效果较差，特別是黄花蒿提取物1000倍液对白粉虱完全失去防效(李宁、邱丹、刚存武.三种植物源农药对温室白粉虱生物活性的测定.长江蔬菜，2004，(4):50-51)。邱丹等报道，黄花蒿对南美斑潜錄Z/r/湖/a力y/由6re"iw、成虫的生物活性，对幼虫的对交正防效为72.05%(邱丹、李宁、刚存武.四种植物源农药对南美斑潜炮的生物活性测定.青海大学学报(自然科学版)，2005，23(3):59-62)。姚安庆等研究了黄花蒿的多种浸提物对菜4斜莱幼虫的拒食作用、触杀作用(姚安庆，梁德华，樟树和黄花蒿浸提物对菜為，幼虫的生物活性.现代农药，2004,3(2):28—29,39)。从上面的研究情况可以看出，对于植物性杀螨药剂的研究来说，以上研究仍然还存在一些问题，一是大多数专利都是涉及到多种植物的组合物，加拿大的专利01809508.9则是土荆芥的油提取物，专利中没有明确具体具有杀螨活性的成分；美国专利5353672则是涉及到木;^直物印楝树的杀螨活性，该树种一般在热带气候条件下生活，许多地方受资源的限制没法加以利用，更主要的是该植物的活性成分用于杀虫的前景更为广泛。因此，,人生产实际的需要出发，仍然需要提供一种可克服本领域已知杀螨产品的上述问题的新的且能有效杀螨的产品。另外，该产品是一种具有更小可能对其产生抗性的杀螨组合物，该杀螨组合物应该具有在使用过程中不对哺乳动物产生伤害和残留的毒性危险。同时便于人们的应用和进行工业上的加工与生产。另外，虽然，对黄花蒿生物活性的研究已经有许多研究报道，一些报道还表明黄花蒿有一定的杀虫和抑菌活性，杀虫或杀菌活性的研究报道也是很简单，基本没有涉及到杀虫作用成分的分析和比较上。特别是还没有关于黄花蒿杀螨活性的研究报道。因此，以黄花蒿作为主要材料研究其杀螨活性，并在此勤出上研制出植物性的无公害杀螨剂，可以综合开发利用黄花蒿的植物资源，并为解决蔬菜和水果等作物在生产过程中，对螨类进行无公害控制的需要，同时对克服常规化学农药在对螨类进行控制的过程中所带来的抗性、残留、污染等问题，研制具有独立知识产权的新的农药具有重要意义。本发明试图解决以上问题及与itb^目关的其他需求。现有技术中，还没有人考虑使用和/或证实菊科植物黄花蒿提取物作为杀螨剂，国外也仅见有关菊科植物黄花蒿杀虫活性的报道。
发明内容本发明目的是提供一种含有黄花蒿丙酮提取物的杀螨组合物。它同时具有对植食性螨类和储藏物螨类良好的控制效果，对人和哺乳动物无毒副作用，原料来源广泛，活性主要集中在非青蒿素的丙酮提取物成分。本发明的另一目的是提供所述杀螨剂的制备方法，以及如何4^I本发明的组合物对植物性螨类和储藏物螨类的防治方法和使用剂量。在此所用，术语黄花蒿是一种学名，广义上指青蒿，当然也包括学名的黄花蒿和常见于一般学术杂志上的青蒿。在此所用，术语"螨"广义上是指植物上的叶螨和食品上的粉螨。类似的，术语"螨类"广义上是指植物上的叶螨和食品上的粉螨。在本发明方案中提供了杀灭螨类的组合物，该组合物是以蒿属植物黄花蒿的提取物主要包括萜类化合物、黄酮类^/^4勿、挥发油类^^物和载体所形成的组合物，其中植物黄花蒿提取物的重量比例占所述组份的1%~15%。优选的质量比例范围为2%~10%。上述各组分的有效成分重量比为萜类化合物0.5%~6%、黄酮类化合物0.1%~2%、挥发油类化合物0.4%~5%，载体2%-35%,其余为水。上述碎类^^物包括至少一种选自1，8-桉树醇、蒿甲醚的化合物。上述黄酮类化合物包括至少一种选自蒿酮、异黄酮、黄烷酮、异黄烷酮的化合物。上述挥发油类化合物包括至少一种选自a-蒗烯、0-揽香烯、柠檬烯、异龙脑、樟脑的卩^物。上述载体包括乳化剂、分敎剂，在整个药剂中所占的有效成分重量比为乳化剂1~感錄剂1~15%。上述的乳化剂是一种非离子和阴离子乳化剂的组合物，属于苯乙烯聚氧丙稀聚氧乙烯醚类。上述分散剂为溶剂型高分子量分散剂、高分子量湿润*剂。上述载体除了乳化剂、M剂外，还包括增效剂，增效剂在整个药剂中所占的有效成分重量比为0.5~10%。上述增效剂包括至少一种选自增效醚(PBO)、增效磷(sv-1)和喊螨酮。本发明植物性杀螨剂的有岁i^^^口质量比例的组成情况如表1所示表l_原料要求_有效成分质量比例(％)所述提取物为膏状(相1~15对密度为1.52-1.55)*95%以上的原药0.5~15符合出厂标准0.5~10符合出厂标准1~15_补充至100%在以上组合物的有效范围内，其它化学的杀螨剂也可以达到增效作用，这里不作P艮定，但A/L是釆用化学杀螨剂或杀虫药剂与黄花蒿丙酮提取物类化合物进行组黄花蒿提取物增效醚或/和增效磷乳化剂綠剂水配所形成的新的组合物，都应该视为以上非限定性范围。同样乳化剂和^H剂，如果用同类性质的产品作为替代物组合出新的杀螨或杀虫剂，也视为属于以上非限定性范围。所述的植物性杀螨药剂的制备方法是这样的选用黄花蒿叶、茎，粉碎后用丙酮浸泡24h-72h、提取、过滤，用旋转蒸发仪浓缩后得黄花蒿丙酮提取物；按比例加入增效剂、乳化剂，充分混合后，加入分散剂混合，加入水补充有效成分达到一定含量，然后充分搅拌，包装后即得产品。所述工艺中，最佳的方案是选用7月收获的黄花蒿叶作原料:其丙酮提取物的"t是耳又方法为称黄花蒿七月叶粉石科勿——^丙酮室内冷浸48h-^过滤获得提取液对提取液—进fr^转蒸发浓缩至一定体积-^寸所得浓缩物利用石油醚进行循环脱月^-^所得物质再进行旋转蒸发浓缩成膏状-^膏状物质即为黄花蒿叶丙酮l是耳又物。黄花蒿丙酮提取物是采用可产生挥发性组分及其他成分的方法进行，以及当选取除根夕卜的所有植物部分时获得的产物称作"提取物"。提取物一般都是很多物质的混合物质。它们的不同组分^4现为其理化性质上的差异。提取方法变化多端，其他的如用索氏提取器，微波助溶法，或超临界C02萃取法为更为合适的提取方法。本领域普通技术人员还可采用其它已知方法。如本发明实施例所述，可以使用部分纯化的提取物。此外，本发明才是耳又物优选与载体或稀释剂混合(选择的载体或稀释剂应使其不会显著地降{財直物提取物的杀螨活性)以^得杀螨《且合物。本发明组合物可与大量已知载体混合，这些载体的非限定性实例包括用于形成乳剂、水乳剂或其他液体制剂、也可以包括喷4斜分剂或固体制剂等。本发明采用的乳化剂不仅可以有效地增力口有岁械分的溶解度，而且可以对作物表面的蜡质层进行适当的净化，更有利于有刻喊分在植物叶面的附着。这些剂型可根据不同的需要进行加工和配制。溶剂和稀释剂的非限定性实例包括水、脂族和芳族烃以及醇等。表面活性剂(乳化剂)可以才艮据需要进行选用，非限定性的实例包括不同离子型或非离子型的表面活性剂。本发明优化方案选用的乳化剂是苯乙烯聚氧丙稀聚氧乙烯醚，根据经验，^i^酸或类似物的异丙胺盐以及环氧乙烷等乳化剂在适当的比例下，也可以增加活性成分在水中的溶解性。;^发明还可以孑t^]的享W匕剂如表2所示表2乳化剂的商品名乳化剂的化学名称或主要组分农药享'l4t剂500#十二絲^嫩钩河北邢台蓝天精细化工有限公司农药乳化剂600#苯乙基酴聚氧乙烯醚河北邢台蓝A^f青细化工有限公司农药乳化剂700#;t，盼甲醛树脂聚氧乙雄醚山东^X页化工厂农乳400#特歹#乙曱趁树脂聚氧乙烯醚河北邢台蓝天精细化工有限公司农乳1600#三苯乙基^i^聚氧丙烯聚氧乙烯嵌山东》M页化工厂农乳34#》4芳基聚氧乙烯聚氧丙烯醚河北邢台蓝天精细化工有限公司农乳2201非离子、阴离子表面活性剂和溶剂山东3&侦化工厂RhodacalDS-10十二^^嫩内PhonePoulenc,CranburyNJ"StepanolDEA二乙醇胺A诚月桂酯St印anCo.NorthfieldILAterosolOT-75二辛基碌化琥珀酸钠CytecIndustriesInc.，MorristownNJRhodacalA246L(C14-C16)烯烃磺S臾钠RhonePoulence,CranburyNJRhodafacRE610壬烷-9-磷酸酯RhonePoulence,CranburyNJRhodapexCO-436壬綠(4E0)硫酸铵RhonePoulence,CranburyNJMacolNP-9.5壬if》(PEO9.5)乙lu^化物PPGIndustries,GurneeILAlkamuisEL-719rt油(M摩尔E0)PhonePoulenc,C-ranburyNJSpan80失水山梨糖醇单油酸酯ICISurfactantsWilmingtonDE吐温20聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯佛山市科的气体化工有p艮公司吐溫80聚氧乙烯去水山梨醇单油酸酯佛山市科的气体化工有限公司上面所列的乳化剂并非穷举，还可以使用乳化剂的二元和三元';給物以获得具有所需理化性质的植物提取物的稳定的微滴乳状剂。对于本领域任〗可普通技术人员来说制备用作杀螨、杀虫物质的其它稳定的微滴乳状剂制剂是显而易见的。另外，本发明活性成分可与增进活性成分^L性的农业上已知的可接受的载体和表面活性剂掺混。本应该认识到本发明杀螨组合和提取物的最终制剂以Aife用方式可能会影响到其活性。当然，本发明提供了不同类型组合物杀螨效果的测定方法。本发明中选用的M剂是一种具有高黏度的(5~10Pa.s)物质，例如纸浆废液的浓縮物、废蜜糖等，通过才;U成作用，可将原来分散不理想的原药^胶体颗粒或者便于在水中很好溶解和M。本发明使用的这些载^l史量和类型都是杀虫杀螨剂领域里常规使用的。本制剂具有良好的理化特性，并JL^室温、37。C情况下储存6个月后是稳定的。本发明的活性组合物可用在防治不同类型环境，包括农业、园艺植物环境中和家庭储藏物中的害螨。可以理解的是根据环境情况、被螨类4曼染或易受其侵染的区域情况，可以相应调整组合物的比例。iM，十螨，学名re红s/7/c力:w￡/朋^3,//7^被认为是杀螨剂生物测定实验的模型实验革￡#。几篇文章老財艮道了用于测试杀螨剂及其制剂活性的各种毒理学方法，并且大多凄^r法使用^M，十虫剔乍为实验物种。参照FA04M的测定螨类抗药性的标准方法——玻片浸渍法(FAO(联合国粮农组织).21世会M直物生产和保护，推荐^^1的测定杀虫剂抗性方法.FAO，1980,49-54.)并加以改进。糸漆玻片双面胶带上供试螨在温度26士rC、6080y。RH的环境下放置411，用双目解剖4i^全查，剔除死亡和不活泼的个体，记载活螨数。将带螨的一端浸入事先配好的药液中，^后取出，akii用吸7K纸吸干螨体及其周围多余的药液。同才"f^i牛下培养3d，每24h检查一次结果。用毛笔轻触其身体，以±禹足不动者为死亡。每个浓度重复3次，对照因具体i劲全而定。》f印的触杀活性观J定参照IRAC(InsecticidalResistanceActionCommiUee,2000)方法，采集新鲜的未估狄理的5A豆叶片洗净晾干，在叶背划出一个约3citf区域，叶背朝上放置在垫了一层湿棉花的培养脏(直径5cm)中，区域两侧用湿棉花覆盖，使叶片紧贴棉花。用0号软毛笔向区域内接15头雌成螨，放置在养虫室中任其产卯12h，移去成螨。将粘有螨卵的叶片在药液中浸渍5s。药液设置一系列浓度，每个处理设置3次重复，1%土温20溶液作为对照。叶片晾干后按照上述方法重新it7v培一中，检查并记录剩余螨卵数。每曰往培^^中加水保湿，每24h观察卯將化情况，连续观察4天，当对照卵几乎4^卩印ff匕时，处理卯还没有孵化的视为判断死亡的标准。试验数据方差分析、D皿can氏检验由SPSS12.0完成，使用I腿软件完成线性回归分析。此外，本发明提供了防治危害植物的螨类和食品中螨类的方法，该方法包括如何将研制出的植物性杀螨药剂应用到需要防治的植物上或者地点。本发明主要应用于蔬菜、柑橘、苹果等作物和果树对植食性螨类和坊虫的控制，另夕卜，对食品中经常发生的粉螨^4"理想的控制效果。特别适用于^M)对螨、全爪螨、腐*螨、甘蓝坊和桃虫牙的控制。对螨类和蚜虫的各发育阶段均有效。处理时采用常失见喷雾器进^"4面喷雾，杀螨时，药剂浓度为原药稀释600-1000倍。喷雾处理后24h内下雨，应重新施药。对于食品中粉螨类的控制可以采用将本发明的组合物与食品〉T洽的方法进行，一般用量为该药与食品的混合比例为1:1000。应该注意的是，该药剂只是可以发挥用来控制食品中的粉螨的作用，对于处理后的食品是否对人体绝对安全，应该由有关部门进行鉴^来提供M的使用意见。本发明的杀螨组合物以及杀螨和杀虫组合物的优选实施方案的优越之处是它们的环對目容l"生或环境安全性。本发明的其它目的、优点和棒性将通过阅读下述非限定性优选实施方案的描述而理解的更为清楚，但是这些实施方案是举例性的，不应理解为限制本发明的范围。本发明的优点1、本发明以黄花蒿叶丙酮提取物为有-线分所组合的植物性杀螨剂，不仅具有杀螨作用，在田间常规晴况下进行喷雾处理，药剂稀释1000倍就可以达到M95°/。的杀螨效果，而且也具有杀蜂作用，稀释1000倍对甘蓝虫牙虫的控制效果在70~85%。在一定浓度范围内，该药剂对危害食品品质的粉螨^良好的效果。因此，该植物性杀螨剂可以用来对蔬菜、柑橘、苹果等作物和果树对植食性螨类、食品中的粉螨和危害植物的奸虫进行控制，特别适用于朱砂对螨、全爪螨、腐食酪螨、甘蓝坊和桃坊的控制。在常规条件下可以储藏120d以上，而且可以对作物表面的蜡质层进行适当的净化，更有利于有步iA分在植物叶面的附着。在植物表面喷雾时沉积量与常规化学农药基科目当，这可以确保药剂負M艮好i4^挥作用。3、本发明的主要有效成分来自天然植物黄花蒿，黄花蒿因盛产青蒿素而闻名于世，青蒿素是第一个真正得到全5^NH人的中药产品，青蒿素作为中药制剂已经成为越来越多国家治疗痴疾的首选药物，目前仍无负面影响的报道。因此，对人类健康没有伤害，属于绿色农药的范围，乳化剂本身没有生物活性。因此，该药剂是无公害的植物性杀虫杀螨剂，可以满^/、们对绿色食品安全性的要求。附图1为本发明制备方法的^^呈图。M实施方式实施例l黄花蒿植林部位的选捧黄花蒿六月份不同植物部位的杀螨活性差异用5mg/ml的黄花蒿六月份的不同溶剂提取物，在实验室^#下测定不同植物部位对朱妙叶螨的触杀毒力，结果如表3所示表3六月##花蒿不同溶剂提取物对朱妙"十螨的生物活性(5mg/ml，48h)校正死亡率％(平均值±#准误)茎叶石油醚I36.54土l.llcdBCD53.35±0.92bcB71.39±2.51bcB石油醚n43.6肚l,82bcBC52.8^t3.72bcB76.63士0.65bB乙醇45.10±2.26bBC51.25士2.68cB69.90i2.06cB丙酮66.00±3.05aA72.53±3.66aA85.11士1.46aA水23.27±3.05eD17.35士2.48eD31.82士2.78eD石油醚n顺序30.82±2.52dCD60.00±1.28bB60.63士l,53dC乙醇顺序46.06±1.60bB33.33±2.26dC69.1处0.85cB丙酮顺序36歲L31cdBCD57.69±l.llbcB69.76±1.36cB水顺序35.76±1.21dBCD34,59±6.29dC32.71士1.66eD注石油醚I"R4^油醚30-60°C;石油醚n^^S油醚60-90°C,下同。/A43看出，六月份的黄花蒿几乎全部的根、茎、叶提取物对朱妙"十螨都表现出比四月#^口五月份较高的生物活性，尤其是叶，除水平行和顺序提取物"卜，都表现出较强的生物活性，处理48h，对^5H"螨的校正死亡率均在60%以上。六月^"t花蒿叶的丙酮平行提取物对朱砂对螨的校正死亡率最高，处理48h为85.11°/。。从表3中不难看出，所有的溶剂的提取物中，以丙酮的提取物的活性最高，所以本发明所指的提取物优选丙酮提取物。实例2黄花蒿叶丙酮提取物的杀螨活性比较对四、五、六、七和九月份的黄花蒿的100多种提取物生物测定结果表明，五个月份黄花蒿叶的丙酮平行提取物对朱砂对螨的生物活性与同组的提取物均存在显著差异。为进一步研究五种提取物的活性差异，测定了五种提取物对朱妙吋螨的毒力回归分析，并求出了五种丙酮提取物在Smg/ml浓度下的致死中时(Medianlethaltime,LT5。)。结果列于表4和表5。表4五个月伤贵花蒿叶的黄花蒿丙酮提取物对朱妙对螨的毒力回归分析(48h)处理毒力回归直线相关系数致死中浓度及其95%置信限(mg/ml)四月份"l,3732+1.1549x0.99191.3817(1.01201.8863)五月份y=0.9444+1.3632x0.96240.9443(0.71411.2486)六月份y=0.1146+1.6743x0.98830.8376(0.6508~1.0524)七月份y=1.8462+1.1957x0.98000.4341(0.2708~0.6957)九月份y=1.5818+1.2308x0.99510.5986(0.4201~0.8530)乂A44看出，黄花蒿不同月O十的丙酮平行提取物对朱砂对螨的LC5。随釆集的季节的不同而有所变化，四月份、五月份、六月份、七月^^口九月份的La,。分别为0.8376，0.9443,1.3817，0.4341和0.5986mg/ml。总体上表现出四月份至七月份叶丙酮提取物活性呈逐步提高的趋势，九月份又开始有所下降。七月^^花蒿活性最高，从黄花蒿的生长周期来看，这段时间是营养生长的关键时期，对外界的纟iU卸能力也是最强的，与il睑所4寻结合吻合。表5五个月伤嘴花蒿叶的黄花蒿丙酮提取物对朱砂对螨的致死中时(LT5。)分析(5mg/ml)处理回归方程相关系数LTs。及其95y。的置信限(h)四月份y=0.4038+2.9258x0.962437.2343(32.5238^42.6271)五月份"l,5283+452卯x0.967527.6346(25.0965~30.4293)六月份"0,9726+42932x0.976124.6137(22.1039~27.4085)七月份y=0.6559+43303x0.929920.2355(17.9431~22.8208)九月份产0.4445+3,8319x0.972626.3532(23.6366~29.3820)乂A45看出，黄花蒿叶的;Ut丙酮提取物对朱砂对螨的LTs。也是随着采收季节的不同而有所差异。在5mg/ml浓度下，四月份、五月份、六月份、七月^^口九月份的黄花蒿叶的丙酮平行提取物对朱砂对螨的LT^分别为37.2343、27.6346、24.6137、20.2355和26.3522h。从而可以看出，七月1"錄花蒿叶丙酮提取物对朱砂"十螨的致死中时最短，为20.2355h。实例3蒿叶丙酮提取物柱层析所得不同组分的杀螨活性比较采用生物活性iii宗法测定黄花蒿叶的丙酮提取物柱层析所得不同组分的杀螨活性，结果如表6。由表6可以看出，在最乡f^离出的13种组分中，组4分12的杀螨活性最高，48h内的校正死亡率分别ii^99.20%，其95%CI为96.24~102.34,组分5和6次之，48h内的平均校正死亡率分别赵)J82.52%、89.74%,其95。/。CI分别为81.7983.24、85.08~94.41mg/ml。由此可见，黄花蒿杀螨活性物质主要存在于丙酮提取物中，其中又以叶的丙酮提取物中含量最高。表6黄花蒿叶丙酮提取物柱层析组分杀螨活性(5mg/ml,48h)不同组分校正死亡率(%)校正死亡率95%的置信区间132.85fgF28.54^37.16237.12ff34.1"0.09360.54eE56.35~64.74462.46eE55.34~69.58582,52cC81.7983.246狄74bB85.08~94.41779.47cCD71.1887.77827.36gF20.35~34.37931.23fgF27.6734.791026.95gF21.37~32.541175.84cCD68.95~84.571299.29aA96.24~102.341373.07dD65.76~80.38对活性较高的第12组分进行了毒力回归分析，结果列于表7。由表7看出，在分离出的D个组份中，组份12的LCs。为0.1586mg/ml，而丙酮提取物的1A。为0.3832mg/ml，组分12的活'f封目对于丙酮提取物而言提高了约2倍。表明第U组份对朱妙"十螨具有较好的触杀活性，进一步证实黄花蒿杀螨活性物质主要存在于叶的丙酮提耳又物中，且该提取物可能含有两种不同的高效杀螨活性物质。表7黄花蒿丙酮提取物和分离的第12组分对朱石，十螨的毒力回归分析<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>实施例4实施例3中组分12的成分分析iN主层析分离得到的组分12,并经GC-MS的方法进行M分析。组分12主要含有下列含量较高的化^4勿1,8—桉树醇(42.3%)、蒿酮(13.7%)、軒檬烯(15.4%)、樟脑(20.5%)。实施例5创制出杀螨剂的主要l"生能指标外观浅绿色剂型7j0'L剂有效成分黄花蒿丙酮提取物有效成分含量比(重量百分比)5%pH:6.8稳定性室温访文置180天无沉淀热稳定性合格实施例6植物性杀螨剂的活性教方法及其室内毒力对于植食性朱砂叶螨的活性测定，参照FAO推荐的测定螨类抗药性的标准方法一玻片浸渍法并力。以改进。才4^玻片双面胶带上供试螨在温度26士rC、60%80%RH的环境下放置4h，用双目解剖镇验查，剔除死亡和不活泼的个体，记载活螨数。用微量毛细管吸取事先配好的药液中，小心均匀地点在螨体腹面。同样^^牛下培养3d，每24h检查一次结果。用毛笔轻触其身体，以螨足不动者为死亡。每个浓度重复3次，对照因具体试验而定。/A48看出，本发明所创制的植物性杀螨剂对朱砂对螨表现出较高的生物活性。朱砂对螨的校正死亡率与药剂浓度密切相关。但稀释100倍，400倍和1OQO倍处理48h对朱砂对螨的校正死亡率无显著差异，而处理72h时，对朱石，十螨的校正死亡率都为100%，并且其校正死亡率要高于常规化学杀螨剂喊螨灵2000倍液。主要测定结果如下所示表8本发明创制的植物性杀螨剂对朱砂叶螨的生物活性<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>以黄花蒿七月叶丙酮提取物为原料，研究开发出一种可用于防治叶螨类害虫的新型植物性杀螨剂。参见图l，主要配制方法是，选用黄花蒿干燥的叶3Kg，粉碎后用丙酮浸泡^是耳又48小时，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后得样品，加/v增效剂增效醚，乳化剂土温20或土温80，样品充分';曰^^后，与^:剂〉V曰洽，加入水补充有效成分达到一定含量。然后充分搅拌，包装后即得植物性杀螨剂的样品HHH-OOl。实施例8植物性杀螨剂的毒f生教将5%HHH-001与生产上推广应用杀螨剂。达螨酮的毒性比较，如表9所示表9植物性杀螨剂的毒性^H^表___<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>从表9看出，新型植物性杀螨剂5%HHH-001的毒f生很低，对人畜没有什么毒副作用。从医学上看，该药剂的主要成分具有消炎、清热、g和活血的功效，因此，在果树、蔬菜和茶叶上^^来控制螨类是十分安全的。实施例9植物性杀螨剂的活性成^^且成的非P艮定性实例在以下范围内的各成分的组合物都可以组配出植物性的杀螨剂，可以理解为在效成分的改变，杀螨效果会产生一些变化。例(1):黄花蒿丙酮提取物2.0%,增效醚2.0%,含量95%以上的。达螨酮1%乳化剂吐温205.5°/。、溶剂型高衬量錄剂狄。，补充水至100%。例(2):黄花蒿丙酮提取物4.5%，增效醚5%,乳化剂吐温807%、溶剂型高W量^lt剂8%,补充水至1001例(3):黄花蒿丙酮提取物2.5%,增效磷l.8%,乳化剂NP-IO8%、高分子量湿润*剂9%，补充水至100%例(4):黄花蒿丙酮提取物6°/。，增效磷7%，乳化剂1600#3%、溶剂型高分子量#剂10%,补充7jc分至iooy。。例(5):黄花蒿丙酮提取物5°/。，增效醚1.5%,增效磷1.5%，乳化剂1602#3%、高^"量湿润#剂8%,补充水分至100°/。。例(6):黄花蒿丙酮提取物3%，增效醚l.5%,增效磷l.5%,含量95。/。以上的峻螨酮1%、乳化剂1602#8%、高分子量湿润綠剂4%,补充7K分至100%。实施例10植物性杀螨剂与农药的M方向相吻合本发明是低毒性的触杀性杀螨剂。由于本发明的主要活性成分来自于天然植物黄花蒿，该草可整草入药，是中药青蒿素的主要来源植物，对人体的作用主要是保健作用，对人体^^甫乳动物无害，因此这些组合物与病虫害综合治理(1PM)是相容的。由于本发明产品组成的复杂性，即含有一种以上的活性成分，也使得害螨在经过多次处理后不太可能产生抗性。IPM鼓励^錢"生物合理农药"(也称为#^4生或生物杀虫剂)。生物合理农药比传统的化学农药的优越之处是它们对輩巴标害虫的选棒性，对有益昆虫以財民或温室工作人员的更低的毒性以及可以在施药后能够尽早采收的较短时间的安全间隔期。正因为该发明对防治对象的良好效果，加上环境的安全性比较好，又不易诱发害螨产生抗性，因此该发明的产物适应与当前农药的发展的方向。权利要求1、一种植物性杀螨药剂，其特征是以蒿属植物黄花蒿的提取物主要包括萜类化合物、黄酮类化合物、挥发油类化合物和载体所形成的组合物，其中植物黄花蒿提取物的重量比例占所述组份的1％～15％。2、根据权利要求1所述的植物性杀螨药剂，其特征在于各组分的有效成分重量比为萜类化合物0.5°/。~6%、黄酮类化合物O.1%~2%、挥发油类化合物0.4%~5%,载体2%_35%，其余为水。3、根据权利要求2所述的杀螨药剂，其特征在于所述碎类化合物包括至少一种选自1，8-桉树醇、蒿曱醚的化合物。4、根据权利要求2所述的杀螨药剂，其特征在于所述黄酮类化合物包括至少一种选自蒿酮、黄酮、异黄酮、黄烷酮、异黄烷酮的化合物。5、根据权利要求2所述的杀螨药剂，其特征在于所述挥发油类化合物包括至少一种选自a-蒗烯、揽香烯、柠檬烯、异龙脑、樟脑的4匕合物。6、根据权利要求1或2所述的杀螨药剂，其特征在于所述的载体包括乳化剂、分散剂，在整个药剂中所占的有效成分重量比为乳化剂1~10%，分散剂1~15%。7、根据权利要求1或2所述的杀螨药剂，其特征在于所述的载体包括乳化剂、分散剂，增效剂，在整个药剂中所占的有效成分重量比为乳化剂1~10%，分散剂1~15%，增效剂0.5~10%。8、根据权利要求7所述的杀螨药剂，其特征在于所述增效剂选自增效醚、增效磷和哒螨酮中的至少一种。9、权利要求1或2所述的植物性杀螨药剂的制备方法，选用黄花蒿叶、茎，粉碎后用丙酮浸泡24-72h、提取、过滤，用旋转蒸发仪浓缩后得相对密度为1.52-1.55的黄花蒿丙酮提取物；按比例加入乳化剂或乳化剂和增效剂，充分混合后，加入分散剂混合，加入水补充有效成分达到一定含量，然后充分搅拌，包装后即得。全文摘要本发明涉及一种源于黄花蒿的植物源杀螨药剂，是以黄花蒿的提取物为主要成分，同时包括增效剂、乳化剂和分散剂，其中植物黄花蒿提取物的质量比例占所述组合物的1％～15％。所述提取物含有萜类化合物、黄酮类化合物、挥发油类化合物等物质。该杀螨剂可用于控制危害蔬菜、柑橘、苹果等作物和果树上的植食性螨类以及对食品中的粉螨。特别适用于对朱砂叶螨、柑橘全爪螨、腐食酪螨的控制。具有高效、低毒、无公害，不影响农产品品质等特点。本发明还涉及所述植物杀螨药剂的制备方法。文档编号A01P7/02GK101116451SQ20071009251公开日2008年2月6日申请日期2007年8月2日优先权日2007年8月2日发明者伟丁,静吴,周宇杰,尚德斌,张永强,李春华,骆星丹申请人:西南大学