一种适于水煎提取青蒿素的方法
【技术领域】
[0001]本发明公开了一种适于水煎提取青蒿素的方法，属于青蒿素制备技术领域。
【背景技术】
[0002]青蒿素是一种无色针状晶体，分子式为C15H2205(31976年通过化学反应、光谱数据和X射线单晶衍射方法证明其为一种含有过氧基的新型倍半萜内酯。由于其具有特殊的过氧基团，它对热不稳定，易受湿、热和还原物质的影响而分解。青蒿素是从复合花序植物黄花蒿草中提取得到，入药最早见于马王堆三号汉墓出土 (公元前168年左右)的帛书《五十二病方》，后在《神农本草经》、《本草纲目》等书中均有记载。1972年我国科学家在整理民间验方及实践的基础上从青蒿中分离出这种活性物质，是我国特有的植物资源黄花蒿研制成功的一种全新的抗疟有效单体，它的发现成为世界抗疟药史上继奎宁之后的又一个重要里程碑。由于其结构独特，抗疟机理特别，对抗氯喹的恶性疟和脑性疟有特效，且有高效低毒的特点，而被WHO称为“世界上目前唯一有效的疟疾治疗药物”。
[0003]青蒿素的制备方法主要包括化学合成、生物合成、植物组织培养合成青蒿素和从黄花蒿植物中提取青蒿素。目前，天然提取仍然是应用最广泛的青蒿素制备方法。天然提取的方法主要包括有机溶剂提取、超临界CO2萃取、微波萃取等方法。
[0004](I)目前国内黄花蒿中提取青蒿素的工艺主要是传统的有机溶媒提取分离法，SP采用有机溶剂如乙醇，丙酮、乙醚等对黄花蒿进行提取得到提取液浸膏后，再经过大孔树脂或硅胶柱分离结晶得到青蒿素纯品，该技术工艺简单成熟，国内绝大多数青蒿素生产企业都沿用这种经典的提取方法；
(2)超临界二氧化碳萃取法也称绿色提取法，该法广泛地用于香料的提取，具有环境良好、操作安全、不存在有害物残留、产品品质高且能保持固有气味等特点；
(3)微波萃取是利用电磁场的作用使固体或半固体物质中的某些有机物成分与基体有效的分离，并能保持分析对象的原本化合物状态的一种分离方法。微波是指频率在300兆赫至300千兆赫的电磁波。
[0005]传统的有机溶剂提取法，提取率低，时间长，且有机溶剂使用量大，杂质较多;超临界CO2萃取技术也有其缺点，即适用于亲脂性、分子量较小物质的萃取;对极性大，分子量太大的物质的分离提取时要加夹带剂，并在很高的压力下进行，给工业化带来一定的难度并且成本较高;微波提取可以节省大量的溶剂，时间短，但其存在的缺点是需要极性溶剂、设备较为昂贵。
[0006]因此，寻找一种提取效率高、青蒿素含量高、溶剂使用量低、药效保持性好、利于工业应用的青蒿素提取方法，是本领域一直以来致力解决的问题。
【发明内容】
[0007]本发明主要解决的技术问题:针对目前传统方法在提取青蒿素的过程中，往往采用有机溶剂如乙醚、丙酮提取，不仅能源消耗大、提取率低，而且在不破坏药性、不破坏结构的情况下，只能够在低温的条件下进行，导致提取时间长的现状，提供了一种将黄花蒿种子通过浸泡后，利用乙醚从青蒿中提取得到的青蒿素溶液对其进行淋洗，使其发芽，随后将发芽后的青蒿素种子植入土壤中，用乙醇从青蒿中提取得到的青蒿素溶液对其进行浇灌，使其长叶，成幼苗，接下来再用微波提取从青蒿中得到的青蒿素溶液对幼苗进行喷雾，使其成熟，最后通过将成熟的黄花蒿幼苗转移到沙漠中生长，并摘取叶子进行煎煮，从而得到适于水煎提取青蒿素的方法。该方法独特新颖，原料天然易得，不仅在操作过程中避免了有机溶剂的加入，天然安全，而且周期短，操作温度接近常温，青蒿素不会发生裂解等化学变化，使得最终得到的青蒿素收率高达85%以上，纯度达到95%以上，有很好的工业应用前景，适合大规模推广应用。
[0008]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:
(1)称取80?10g黄花蒿草种子，置于盛有清水的容器中，不断搅拌，浸泡45?55min，待浸泡结束，去除漂浮在水面的种子，滤出剩余种子，用清水反复冲洗后，放入装有30?35°C温水的烧杯中，浸泡4?5h，待浸泡结束，将浸泡后的黄花蒿草种子取出，均匀平铺在垫有消毒后纱布的培养皿中；
(2)将通过乙醚从青蒿中提取得到的青蒿素溶液放入淋洗罐中，调节pH值为5.5?6.2后，每隔一天对上述培养皿中的黄花蒿草种子进行淋洗，淋洗5?1天，使得黄花蒿草种子胚芽长达2?3cm，随后再次调节淋洗液pH值为5.8?6.3，每隔5h对已长芽的黄花蒿种子进行淋洗，使其继续发芽，待黄花蒿种子完全发芽，胚芽长达5?6cm时，停止淋洗，用清水喷洒发芽种子表面，每隔I?2天喷洒一次，总共喷洒2?4次；
(3)待上述喷洒结束，将已长出胚芽的黄花蒿种子采用地膜覆盖栽培，均匀移入苗棚中，每颗种子之间间隔为30?35cm，移植完成后，在苗棚上加盖一层遮光率为75%的遮阳网，控制苗棚室内温度为25?28 °C，保持土壤湿度为75?85%，并用通过乙醇从青蒿中提取得到的青蒿素溶液浇灌黄花蒿种子胚芽，每天早上8点浇灌一次，下午5点再对其浇灌一次；
(4)待上述黄花蒿种子胚芽长出青嫩叶子，成为幼苗时，停止浇灌，自然生长3?5天后，使用通过微波提取从青蒿中得到的青蒿素溶液对幼苗进行喷雾，每日喷雾I次，连续喷雾10?15天，使得黄花蒿幼苗复壮，长出碧绿的成熟叶子；
(5)以上述已成熟的黄花蒿株苗为中心，挖取一个半径为10?15cm，深为15?20cm的圆形沟槽，将黄花蒿株苗连根带泥挖起，随后移入沙漠中，根部用泥土压实，并用清水浇灌，持续浇灌5?8天后停止浇灌，使其自然生长；
(6)待沙漠中的黄花蒿长至高达100?150cm、基部直径达到3?4cm时，可摘取黄花蒿叶子，放入煮锅中，并向其中加入清水，使其完全浸泡黄花蒿叶子，在80?90°C下煎煮I?3h，即可在水煎的条件下得到青蒿素。
[0009]本发明的应用方法是:将本发明制得的青蒿素放入烘箱中，在温度100?105°C下烘干至恒重，得青蒿素粉末，随后将得到的青蒿素粉末通过胶囊机制成青蒿素胶囊，其中每个胶囊中含有0.1?0.3g青蒿素，服用时，配以200?250mL温水，每天早晚饭后服用一次，每次服用I?3粒，坚持服用7?14天，能迅速消灭人体内疟原虫，对恶性疟疾有很好的治疗效果O
[0010]本发明的有益效果是:
(I)本发明操作简便，制备过程中避免有机溶剂的加入，安全卫生，是环保绿色生产工-H-
乙；
(2)本发明操作周期短，操作温度接近常温，青蒿素不会发生裂解等化学变化，保持了原有的药效，且无任何杂质；
(3)本发明最终使得青蒿素收率高达85%以上，纯度达到95%以上，有很好的工业应用前景，适合大规模推广应用。
【具体实施方式】
[0011]首先称取80?10g黄花蒿草种子，置于盛有清水的容器中，不断搅拌，浸泡45?55min，待浸泡结束，去除漂浮在水面的种子，滤出剩余种子，用清水反复冲洗后，放入装有30?35°C温水的烧杯中，浸泡4?5h，待浸泡结束，将浸泡后的黄花蒿草种子取出，均匀平铺在垫有消毒后纱布的培养皿中；然后将通过乙醚从青蒿中提取得到的青蒿素溶液放入淋洗罐中，调节pH值为5.5?6.2后，每隔一天对上述培养皿中的黄花蒿草种子进行淋洗，淋洗5?10天，使得黄花蒿草种子胚芽长达2?3cm，随后再次调节淋洗液pH值为5.8?6.3，每隔5h对已长芽的黄花蒿种子进行淋洗，使其继续发芽，待黄花蒿种子完全发芽，胚芽长达5?6cm时，停止淋洗，用清水喷洒发芽种子表面，每隔I?2天喷洒一次，总共喷洒2?4次;待上述喷洒结束，将已长出胚芽的黄花蒿种子采用地膜覆盖栽培，均匀移入苗棚中，每颗种子之间间隔为30?35cm，移植完成后，在苗棚上加盖一层遮光率为75 %的遮阳网，控制苗棚室内温度为25?28°C，保持土壤湿度为75?85%，并用通过乙醇从青蒿中提取得到的青蒿素溶液浇灌黄花蒿种子胚芽，每天早上8点浇灌一次，下午5点再对其浇灌一次;待上述黄花蒿种子胚芽长出青嫩叶子，成为幼苗时，停止浇灌，自然生长3?5天后，使用通过微波提取从青蒿中得到的青蒿素溶液对幼苗进行喷雾，每日喷雾I次，连续喷雾10?15天，使得黄花蒿幼苗复壮，长出碧绿的成熟叶子;接下来以上述已成熟的黄花蒿株苗为中心，挖取一个半径为10?15cm，深为15?20cm的圆形沟槽，将黄花蒿株苗连根带泥挖起，随后移入沙漠中，根部用泥土压实，并用清水浇灌，持续浇灌5?8天后停止浇灌，使其自然生长;最后待沙漠中的黄花蒿长至高达100?150cm、基部直径达到3?4cm时，可摘取黄花蒿叶子，放入煮锅中，并向其中加入清水，使其完全浸泡黄花蒿叶子，在80?90°C下煎煮I?3h，即可在水煎的条件下得到青蒿素。
[0012]实例I
首先称取SOg黄花蒿草种子，置于盛有清水的容器中，不断搅拌，浸泡45min，待浸泡结束，去除漂浮在水面的种子，滤出剩余种子，用清水反复冲洗后，放入装有30°C温水的烧杯中，浸泡4h，待浸泡结束，将浸泡后的黄花蒿草种子取出，均匀平铺在垫有消毒后纱布的培养皿中；然后将通过乙醚从青蒿中提取得到的青蒿素溶液放入淋洗罐中，调节PH值为5.5后，每隔一天对上述培养皿中的黄花蒿草种子进行淋洗，淋洗5天，使得黄花蒿草种子胚芽长达2cm，随后再次调节淋洗液pH值为5.8，每隔5h对