专利名称：：一种防治线虫、土传病害的混合农药胶囊制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及利用化合物1,3-二氯丙稀(通用名为1,3-dicWoropropene,化学式C3KUCl2)防治蔬菜、草莓、花舟、瓜类、芦夢、芹菜、胡萝卜、甘薯、大豆、果园、葡萄园、中草药等保护地等作物上的根结线虫及其它土壤线虫，该化合物对土传病原菌镰刀菌(Fwar&mspp)有很好的抑制作用；对腐霉(P;^&wspp)、疫霉(尸/y^少/^oraspp)属真菌也有一定的防治效果。三氯硝基甲烷能有效控制喙担子菌属、刺盘孢属、柱果霉属、镰刀菌属、疫霉属、须壳孢属、腐霉属、丝核菌属、轮技菌属真菌，对土壤杆菌属细菌也有效，对地下害虫和土壤线虫也有一定的效果。1,3-二氯丙稀防治土传病害的效果相对较弱，而三氯硝基甲烷防治根结线虫效果较差，所以将三氯硝基甲烷与1,3-二氯丙烯混用提高对土壤线虫的防治效果。具体做法是将两种化合物按照比例混合后加工制成胶囊剂型，用于田间使用。
背景技术：
：土传病害是由土壤中存活的病原物侵染，所引起的一类植物病害。在蔬菜、瓜果、观赏类植物、林木上发生严重，尤其在保护地作物上危害严重。近年来，随着农业生产和农村经济的发展，温室保护地作物种植面积逐年扩大，如保护地蔬菜面积200万公顷。而保护地栽培作为一项增加农民收入、由传统农业向现代农业转变的一项重要农业措施，在未来将继续快速发展，栽培的作物也将由当前的蔬菜、草莓向花丼、瓜果、苗圃、中草药等方向发展。温室大棚的发展也为土传病害的发生、发展提供了适宜的环境，通常栽培3-5年后，作物的产量和品质受到严重的影响，一般造成减产20%-40%,严重的减产60%以上甚至绝收。随着温室大棚栽培继续扩大和高附加值作物的连年栽培，土传病害的问题越来越突出。3传统的防治土传病害的方法有抗病育种、嫁接、实行轮作、深翻、换土、化学农药灌根等。但由于土地有限和实行集约化种植，轮作很难实施。抗多种土传病害的品种和玷木很难培育。深翻和换土在经济上不可行。化学农药灌根效果有..限，并且需要大量的药剂，易造成农药残留超标和地下水污染。当前最有效的方法是用溴甲烷(methylbrcmMe)土壤熏蒸消毒，该技术能很好地消灭土壤中的线虫、真菌、害虫、杂草等，作物增产显著，生产中深受农民欢迎。但是由于甲基溴破坏臭氧层物质，被《蒙特利尔议定书》列为受控物质，在2015年将禁止使用。所以尽快研究寻找甲基溴土壤熏蒸消毒替代技术，便成为环境保护和农业生产中一项很有意义的工作，本研究正是在此背景下展开的。经过室内生测实验得出1,3-二氯丙稀对土壤中线虫有很好的防治效果，但是对土传病害的防治效果有一定的局限性。但是三氯硝基甲烷对土壤中病原菌则有较好的防治效果，但是对土壤中线虫的防治效果一般。1,3-二氯丙稀、三氯硝基甲烷的传统制剂为液体制剂，施用不方便，同时由于这两种化合物挥发性极强，施用时对环境污染大，尤其是三氯硝基甲烷对施用人员造成的伤害很大。所以本实验在研究的基础上寻求两种农药的最佳配比，制成胶囊制剂以便于农民安全、科学的使用，并减少对环境的污染。
发明内容本发明釆用的技术方案是一种防治线虫、土传病害的混合化合物的胶囊制剂加工技术，其特征在于(a)有效成份A为1,3-二氯丙稀(通用名为1，3-dicWoropropene,化学式C3H4C12);(b)有效成份B为三氯硝基甲烷(通用名为chloropicrin,别名氯化苦)；(c)有效成分A与有效成分B的总含量为SO%-95%;(d)胶囊包衣材料为三聚氰胺甲醛树脂、脲醛树脂、明胶、阿拉伯胶中某一个或某几个的混合物，重量百分含量为1%-20%;(e)胶囊的形状为圆形、橄榄形、椭圆形，其大小为0.5-2cm3,单个胶囊重量为0.2-5g。本发明的具体制备方法是首先把两种化合物混合后，再装入制粒机，然后用准备好的包衣材料按照设计好的胶囊重量制粒，接着干燥固化、质检、成品。具体实施方式为了更好地说明本发明，下面通过实施例予以进一步说明。但本领域的技术人员应该理解的是，本申请并不仅仅限定在下述实施例的范围。实施例子98%农药原药A75.41克，90%农药原药B46.91克，脲醛树脂、明胶、阿拉伯胶单一或混合物14.5g。按图1生产工艺流程可加工成96。/。AB微胶囊剂。1，3-二氯丙稀与三氯硝基甲烷混用对土壤线虫和病原菌毒力测定结果1、供试药剂93.6%1，3-二氯丙烯(美国陶氏化学有限公司)；99%三氯硝基甲烷原药(大连染料化工有限公司)。2、供试材料根结线虫(Me/ozY/ogy"espp.);镰刀菌(Fw^zrz'wms/y.);本实验室提供疫霉菌(P/^top/^oras，.)；本实验室提供河北固安温室大棚根结线虫发病较重的土样。3、生测方法3.1线虫的分离取100g土壤，溶于1000ml量杯中，搅动土壤，使土壤充分分散，静置3-5min,依次过40目和400目筛，将400目筛里的泥浆(内含线虫)洗入离心管(50ml)中，称重平衡，2000卬m离心3min;去上清夜，加入蔗糖液(50%),2000rpm离心；收集上清液，加水稀释，转移至培养皿中，显微镜下观察、计数问。3.2病原菌的分离3.2.1镰刀属真菌的分离试验釆用Komada方法(Komada,1975)。取15g土样加到100ml已经灭菌的0.1%琼脂水中，在摇床上摇动30min，配制成土壤悬浮液。在培养基A成分47.5ml中加入2.5ml的B成分，摇匀，加入lml土壤悬浮液摇匀，倒入3只培养皿中，24-25"培养5-6天后检查镰刀菌菌落数目[7]。培养基的组成如下6表1A成分成分名称用量K2HP042gKC1lgMgS04lgL-Asparagina4gDgalattosio40gAgar-Agar30g表2B成分成分名称用量Fe-NaEDTA0.02gNa2B4O7*10H2O2gOxgalllgStreptomicinasolfatolg>CNB1.5g3.2.2、疫霉属真菌的分离试验釆用Massago方法。取5g土样加到100ml已经灭菌的0.1%琼脂水中，在摇床上摇动30min,配制成土壤悬浮液。在培养基A成分47.5ml中加入2.5ml的B成分，摇匀，加入1ml土壤悬浮液摇匀，倒入3只培养皿中，24-25。C培养5-6天后检查腐霉、疫霉菌落数目[8]。培养基的组成如下表3A成分成分名称用量Cornmealagar34gGlucose40g表4B成分成分名称用量PCNB0.15gAmpicillina0.03gRifampicina0.02g2.3数据处理试验数据采用EXCEL电子表格软件对数据进行处理，建立数据库，用DPS数据软件进行回归方程及LD50的求解等统计分析。真菌抑制率%=对照菌，:=菌落数><100%对照菌落数线虫存活率^总"f虫数x酵/0总虫数校正死亡率％(抑制率％)J寸照组存活率-处理组存活率4、测定结果1)线虫结果表5不同配比处理对土壤线虫防治效果酉己t匕浓度(ul/kg)活虫数个/100g土才羊总虫数个画土样存活率％校正死亡率％18.7203400.00100.00单剂9.367968411.6088.351,3-二氯丙4.684297143.3454.15蜂2.34530103751.1246.481.17688105365.3432.5848.00546847.9493.06单剂24.008151715.7484.48三氯硝基甲12.0042484050.5046.48烷6.0055190361.0034.563.0052194655.0430.94复配27.0003910.00100.001,3-二氯13.50576049.4987.62丙蜂二三氯6.75590124547.4349.33硝基甲烷3.3842375456.0841.32(3:1)1.69782113069.2328.08复配27.00246723.5796.681,3-二氯13.5011281713.6786.49丙烯三氯6.75555110450.3048.20硝基曱烷3.3S57492661.9737.15(2:1)1.6972595176.2419.88复配27.00162706.0494.971,3-二氯13.5012886014.9286.02丙烯三氯6.75546109050.0847.63硝基曱烷3.3851688458.4140.55Cl:"1.6964993669.3427.38复配27.00384348.6893.051,3-二氯13.50438101143.3455.87丙蹄三氣6.75577108853.0243.21硝基曱烷3.38750107269.9828.42(1:2)1.69824103879.3616.50复配27.004437111.9487.751，3-二氯13.5027385232.0953.24丙歸三氯6.75663108761.0432.28硝基甲烷3.3862883475.3019.7S(1:3)1.6968484680.8414.31各种复配比例回归方禾呈表6不同配比处理对土壤线虫回归方程及增效情况<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>二对土壤病原菌结果2.1镰刀菌结果^_表7不同配比处理对Fiwahw附印p.防治效果配比单剂1，3-二氯丙烯单剂三氯确基曱烷复配1，3-二氯丙烯三氯硝基曱烷(3:1)复配1,3-二氯丙烯三氯硝基曱烷(2:1)复配1，3-二氯丙烯三氯硝基甲烷(1:"复配1，3-二氯丙烯三氯硝基曱烷(1:2)复配1,3-二氯丙烯三氯硝基曱烷(1:3)浓度(ul/kg)菌落数个/g土冲羊抑制率％18.7286776.779.3694775.194.68107368.182.34128251.361.17132249.3548.0020794.6624.0026792.7812.00118064.946.00152450.073.00246419.4327,00146756.2213.50145853.756.75157847.723.38168747.611.69164747.5127.00133159.2913.50137858.416.75139157.093.38144254.201.69156248.9927.0093374.7313.50142059.386.75152255.223.38165652.421.69166248.6727.0052986.2713.50168772.126.75152952.453.38156450.661.69190243.4427.0033890.8313,50104065.316.75128456.603.38158745.651.69158443.00各种复配比例回归方程_表8不同配比处理对.的回归方程及增效情况<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>2.2疫霉菌结果表9不同配比处理对尸/^to/^/zoras/y.防治,支果酉己t匕浓度(ul/kg)菌落数个/g土样抑制率％单剂18.72132083.461,3-二氯丙埽9.36251167.324.68302060.742.34456040.89U7537330.39单剂48.0056093.33三氯硝基甲烷24.0088089.5712.00288463.106.00418245.663.00618219.59复配27.00400947.331,3-二氯13.50433344.06丙烯三氯硝基曱烷6.75431843.17(3:1)3.38454240.921.69551628.82复配27.00208071.711，3-二氯13.50381849.91丙烯三氯硝基甲烷6.75553628.39(2:1)3.38560426.831.69570025.57复配27.00299160.881，3-二氯13.50345854.82丙烯三氯硝基曱烷6.75498935.16(1:1)3.38593323.051.69610720.36复配27.0077189.851,3-二氯13.50379650.93丙烯三氯硝基甲烷6.75427646.54(1:2)3.38579625.161.69638717.22复配27.0020997.401,3-二氯13.50328755.74丙烯三氯竭基曱烷6.75360453.15(1:3)3.38505834.201.69561327.1513各种复配比例回归方程表10不同配比处理对户/^op/^ora的回归方程及增效情况农药Y=a+bxLDS0(mg/L)95%置信限增效情况1，3隱二氯Y==4.3824+1.1987x3.27532.2883-5.6037丙稀三氯硝基Y=:3.1943+2.0837x7.35532.1336-12.1159曱烷31Y==4.4841+0.3411x32.5669不增效21Y==3.7948+1.1078x12.24663.4342-92869.14不增效11Y==3.8098+1.9290x13.39755.9520-76.4186不增效12Y==3.4326+1.0561x8.39422.5269-96358.47不增效13Y==3.9873+1.3339x5.74402.4180-65.5163增效14附件二1，3-二氯丙稀+三氯硝基甲烷胶囊在土壤中的扩散性实验结果l.实验步骤1)施药在实验过程中我们选取l粒l,3-二氯丙烯+三氯硝基甲烷胶囊(约L29g)放置在装有从河北固安带回的带病原菌和线虫的土样的45cmx40cmx30cm的整理箱中，胶囊放置的位置在土表以下5cm处。本实验中土壤湿度为18.71%:土壤容重为0.86:,土壤的质地为砂粒81.824%,粉粒16.221%,粘粒1.955%。熏蒸时间为15d，熏蒸时的土温为20°C-34°C。2)取样实验结東后我们在土表测量整理箱对角线交叉中心点开始取样，然后依次5cm间隔向外取样。编号为5-5-，5-10，5-15，5-20,5-25,5-30。纵向范围为每隔5cm深度取样，每5cm为一层。编号为10-5,15-5，20-5，25-5,30-5.即编号的第一个数字表示从土表开始纵向的深度取样距离，低二个数字表示横向的取样距离。取样后依次对土壤线虫的防治效果的测定釆用离心法(刘维志，2000)分离；对土传病原真菌镰刀菌的防治效果的测定采用Komada法(Komada，1975);对土传病原真菌疫霉菌的防治效果的测定采用M法(Komada，1975)。线虫分离测定时称取100g样品；病原菌测定时称取15g样品。2，实验结果1)对线虫活性测定结果表l1，3-二氣丙稀+三氣硝基甲烷胶囊对土壤中线虫防效测定结果号总虫数活虫数死虫数活虫率％死亡率％校正死亡率％S陽51200012000.00100.00100.005-10300252758.3391.6790.55S-1S37510027526.6773.3369.755-203257525023.0876.9273.825-252505020020.0080.0077.315-302257515033.3366.6762.1810-547510037521.0578.9576.1210-1030010020033.3366.6762.1810-1537520017553.3346.6739.4910-201751255071.4328.5718.9610-2550037512575.0025.0014.9110-3045032512572.2227.7818.0615-54255037511.7688.2486.6515-10125507540.0060.0054.621S-152501757570.0030.0020.581S-202501757570.0030.0020.S815-252001505075.0025.0014.9115-302001257562.5037.5029.0920-562527535044.0056.0050.0820-1047530017563.1636.8428.3520-1527517510063.6436.3627.8020-201501005066.6733.3324.3720-252001505075.0025,0014.9120-303252755084.6215.384.0025-532520012561.5438.4630.182S-102251507566.6733.3324.3725-153753007580.0020.009.2425-201751502585.7114.292.7625-253503005085.7114.292.7625-305255002595.244.760.0030-527517510063.6436.3627.8030-1034024010070.5929.4119.9230-152401608066.6733.3324.3730-204203804090.489.520.0030-2S4404004090.919.090.0030-306806206091.188.820.00CK7406608089.1910.81CK6205408087.1012.90注活虫数个/100g土和死虫数个/100g土分别为每100g测定土壤中线虫的数量。校正死亡率％=(l-处理活虫率％/对照活虫率％)xl00"编号前面数字"表示纵向距离施药中心扩散距离；"编号后面数字"表示横向距离施药中心扩散距离."编号第一个数字5"为胶囊安放处。16由表l可以看出在本次实验土样中，l粒l,3-二氯丙稀+三氯硝基甲烷复配胶囊对线虫的纵向有效防治范围在25cm的地方仍然有接近30%的防治效果，在横向范围内在距离施药点25cm的地方具有高达60%的防效。可见该种混合药剂胶囊对土壤中的线虫具有很好的防治作用。2)对土壤中病原菌活性测定结果a对土壤中镰刀菌测定结果17表21,3-二氣丙稀+三氣硝基甲烷胶囊对土壌中镰刀菌属防效测定结果始县菌落数(个)菌落数(个)防治效果％IIIm/g土样S墨51054097.745-105438095.485-1526363464063.825-2025464879355.155-2546384183352.895-30556272126028.7710-58131423386.8110-1019131531382.2910-158181426784.9210-2016384868061.5610-2548324684052.5110-3042554896745.3515-514101626784.9215-1037374780754.4015-1549494394046.8615-20548657131325.7515-25595687134723.8715-30545464114735.1820-524342354069.4720-10585844106739.7020-15676836114035.5520-20337570118732.9120-25828647143318.9720-30884268132025.3825-546494392047.9925-10405464105340.4525-15763454109338.192S-20785870137322.3625-25524166106040.0825-30455858107339.3230-5596350114735.1830-10484664105340.4530-15836064138021.9830-20726070134723.8730-256410012018930.0030-30104887617870.00CK689680CK104641001787CK801001041893"编号前面数字"表示纵向距离施药中心扩散距离；"编号后面数字"表示横向距离施药中心扩散距离;"编号第一个数字5"为胶囊安放处。18防治效果％=对照菌=;=菌落数x100对照菌落数从表2可以看出实验结東后，该胶囊对镰刀菌表现很好的防治效果。在距离施药点横向和纵向20cm的距离处仍然有接近50y。的防效。b.对土壌中疫霉菌活性测定结果表31,3-二氣丙稀+三氯硝基甲烷胶囊对土壌中疫霉菌属防效测定结果编号——^岡，S:说防治效果％"5:5—..———………————5———T——————.——.—丁———■——---5-10108616095.785-15687692157358.555-20768868154759.255-25104140124245335.365-30160li158305319.56—10-56;———.—...———^7^—^■——'—1—3'7—10-10868892177353.2810-158612896206745.5510-20142164172318716.0410-25140204152330712.8810-3018618437471.29—15:S—1^0———.——T0^——元u—55—^)]S3—15-10140152160301320.6115-1596136148253333.2615-20160140124282725.5315-2522016822841070.0015-30100164140269329.0420^〖32——丽^:oi20-10164168152322714.9920-15180172160341310.0720-2021220418039730.0020-25100160160280026.2320-30186140110290723.42—一'..55i:2t巧i'^...................................................................................五—25-10220128120312017.8025-15132140196312017.8025-20164148168320015.6925-25176156120301320.6125-3016022020038670.00—;0:5.—i;—.—BS—30-10140100100226740.2830-1523419618641070.0030-2022622024045730.0030-2522018419640000.0030-30—，，》,CK1603『函CK1401982043613CK_120256200__"编号前面数字"表示纵向距离施药中心扩散距离；"编号后面数字"表示横向距离施药中心扩散距离;"编号第一个数字5"为胶囊安放处。防治效果L对照菌落g^g菌落数x刚从表3可以看出实验结束后，该胶囊对疫霉菌同样表现很好的防治效果。在距离施药点横向20cm的距离处仍然有接近60%的防效，在距离施药点纵向15cm距离处对疫霉菌的防治效果也可以达到40%。可见该胶囊对土传疫霉菌属病原真菌具有很好的防治效果。附图1列出了微胶囊剂生产工艺流程图。权利要求一种能防治线虫、土传病害的混合农药胶囊制剂加工技术，其特征在于1.将1，3-二氯丙稀(A，通用名为1，3-dichloropropene)与三氯硝基甲烷(B，通用名为chloropicrin，别名为氯化苦)组成混合物。2.根据权利要求1所述的混合物，其特征是将A和B两种物质按A:B=l:0.2-5比例加工而成胶囊制剂。3.胶囊包衣材料为三聚氰胺甲醛树脂、脲醛树脂、明胶、阿拉伯胶中某一个或某几个的混合物，重量百分含量为1%-20%;4.胶囊的形状为圆形、橄榄形、椭圆形，其大小为0.2-5cm3,单个胶囊重量为0.2-5g。全文摘要本发明涉及土壤熏蒸剂1，3-二氯丙烯与三氯硝基甲烷以合理比例形成的组合物及其相应剂型——胶囊制剂的加工方法。该制剂适用于防治蔬菜、草莓、花卉、瓜类、芦笋、芹菜、胡萝卜、甘薯、大豆、果园、葡萄园、中草药等作物上的根结线虫及其它土壤线虫，而且该化合物对土传病原菌镰刀菌属(Fusariumspp.)和疫霉菌属(Phytophthoraspp.)等土传病原菌有很好的防效。文档编号A01N25/26GK101480178SQ20081000098公开日2009年7月15日申请日期2008年1月11日优先权日2008年1月11日发明者宋兆欣,曹坳程,王秋霞,云赵,郭美霞,陶俊德申请人:中国农业科学院植物保护研究所