专利名称：一种提高杜鹃花杂交种成苗率的方法
技术领域：
本发明是一种提高部分常规播种成苗率低的杜鹃花种子培养基播种的育苗方法，
属于植物组织培养技术领域。
二背景技术：
杜鹃花(Rhododendron)作为著名观赏植物，在世界各种广为种植。我国的云南、 西藏、四川一带是世界杜鹃花的发祥地和现代分布中心，而我国大面积栽培的杜鹃花品种 却大部分依赖进口，这与我国丰富的杜鹃花资源优势极度不符。 杂交育种是杜鹃花新品种选育的主要技术手段，而播种育苗则是其成败的关键所 在。杜鹃花种子细小，对播种基质和微环境要求都很严格，而且不同杂交组合的种子发芽率 和成苗率差异很大，部分组合种子的发芽率和成苗率都很高，而部分组合种子的发芽率较 高成苗率却很低，也有的组合发芽率和成苗率都很低。 我国关于这方面的研究起步较晚，研究也较少。杜鹃花种子发芽率的高低及幼苗 的生长与播种时间、播种基质及温湿度相关。杜鹃花的播种时间以3 5月份为宜；比6 8月播种的种子发芽率高20% 30%;播种基质以腐叶土和腐叶土十山土 (1 : l)为佳；播 种的适宜气温为9°C 28。C，空气显度为60 % 75%;基质温度为6. 7°C 25。C，基质含水 量为30% 40%。黄毛杜鹃种子在恒温25。C 30。C条件下发芽率很低，而在15°C 20°C 条件发芽率明显提高，此外用H^(^和ABT生根粉处理可提高种子发芽率和出芽整齐度。而 关于如何提高杜鹃花种子成苗率研究则未见报道。
三
发明内容
技术问题本发明主要针对部分杜鹃花杂交种常规播种成苗率低的现状，以
小叶铁红M羊掷躅为实验材料，采用培养基无菌播种和组织培养相结合的方法，提高杂交
种的播种成苗率，对杜鹃花的新品种选育工作具有积极和深远的意义。
9小叶铁红xc 羊踯躅 —种提高杜鹃花杂交种子成苗率的方法，包括 1)材料
杜驟花？小叶铁红x3羊踯躅杂交组合的种子 2)培养基 基本培养基为McCown&Lloyd(1982)，其中蔗糖改为30g/L，琼脂粉改为5. 0g/L 5. 4g/L ;播种培养基:附力口 TDZ0. 2mg/L 0. 5mg/L， NAA 1. 5mg/L 2. 0mg/L ;
壮苗培养基附加NAA 0. 2m/L 0. 5mg/L ; 生根培养基:附力口 NAA 1. 5mg/L 2. 0mg/L， IBA 0. 5mg/L 1. 5mg/L，活性炭2g/L ; 上述各种培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值为5. 4 ;
3)方法 第一步外植体灭菌以杜鹃花的种子为外植体，用滤纸包裹，用70%酒精浸泡 3min 5min，无菌水漂洗后0. 1 %的升汞浸泡摇动10min 15min，无菌水漂洗3次 5次， 每次lmin 2min ; 第二步无菌播种将灭过菌的种子点播于播种培养基上，株行距1. 0cm 1. 5cm， 30d 45d将壮根苗移栽于混合基质中； 第三步壮苗培养将弱根苗取其上胚轴，转接于壮苗培养基上培养25d 30d ; 第四步生根培养将高2cm 3cm的壮苗转接于生根培养基上培养30d 45d ;
第五步移栽将生根苗移栽于混合基质中； 培养条件培养室温度23 °C 士2t:，光照强度15001ux 25001ux，光照时间为 12h 14h/d ;混合基质泥碳珍珠岩=2 : 1 ;移栽条件温度15°C 25"，湿度75%
85%，遮荫30% 50%，时间维持10d 15d。 有益效果本发明与现有技术相比，具有如下优点和积极效果 1、本发明采用无菌播种的方式进行杜鹃花杂交种的育苗，解决了常规基质育苗过
程中种子污染霉烂和外界因子可控度低的问题，是提高种子发芽率和成苗率的有效方法和
途径之一。 2、将弱根苗进行壮苗和再生根培养，是提高弱势苗成活率的关键技术，能使常规 播种条件下能发芽但无法成苗的种子发育成完整植株，大大提高种子的成苗率，并最大限 度的获得变异单株。 以杜鹃花9小叶铁红x( 羊踯躅杂交组合的种子或果实为材料，可将种子的成苗率提 高30%以上，对黄色杜鹃花的选育具有积极意义。
具体实施例方式以下结合实例对本发明做进一步的详细说明
实例1 取杜鹃花？小叶铁红X( 羊踯躅杂交组合的成熟的种子为材料。第一步无菌播种， 将杂交种以滤纸包裹严实至种子不散落，用70 %酒精浸泡3min 5min，无菌水漂洗后 0. 1 %的升汞浸泡摇动10min 15min，无菌水漂洗3次 5次，每次lmin 2min ;第二 步将灭过菌的种子以株行距1. Ocm 1. 5cm的密度点播于播种培养基上，播种培养基为 WPM+TDZ0. 2mg/L 0. 5mg/L+NAA 1. 5mg/L 2. Omg/L，再加入琼月旨5. Og/L 5. 4g/L，蔗 糖30g/L， pH值为5. 4，高压灭菌15min 20min，置于温度23士2。C，光照强度15001ux 25001ux，光照时间为12h 14h/d的培养室中，30d 45d将壮根苗移栽于泥碳珍珠岩 =2 : 1的混合基质中，保持温度15" 25"，湿度75% 85%，遮荫30% 50%，时间 维持10d 15d ;第二步壮苗培养，将根系发育不良的弱根苗和弱势苗取其上胚轴，转接于 壮苗培养基上进行壮苗培养25d 30d，壮苗培养基为WPM+NAA 0. 2 05mg/L，再加入琼脂 5. Og/L 5. 4g/L，蔗糖30g/L， pH值为5. 4，高压灭菌15min 20min，培养条件同上；第三 步生根培养，将苗高2cm 3cm的壮苗转接于生根培养基上培养30d 45d，生根培养基为WPM+NAA 1. 5mg/L 2. 0mg/L+IBA0. 5mg/L 1. 5mg/L，再加入琼月旨5. Og/L 5. 4g/L，蔗糖 30g/L，活性炭2g/L， pH值为5.4，高压灭菌15min 20min，培养条件同上；第四步移栽， 当根长至0. 5cm 1. Ocm左右，每株有根3条以上时，将培养瓶移至室外炼苗3d 5d，后洗
净根部培养基，移栽于泥碳珍珠岩=2 : l的混合基质中，温度i5t: 25t:，湿度75X
85%，遮荫30% 50%，时间维持10d 15d即可。 以上是以杜鹃花杂交组合9小叶铁红xc 羊踯躅的种子为具体实验材料对本技术方 案做出了详细的说明，但此技术方案并非仅限于本组合，以本发明技术方案的数据范围的 其他数据在其他成苗率低的杂交种子的无菌播种育苗上，达到了同样的技术效果，在此不 再赘述。
权利要求
一种提高杜鹃花杂交种子成苗率的方法，其特征在于(1)材料选用杂交组合♀小叶铁红×羊踯躅的种子或者果实为实验材料；(2)培养基基本培养基为McCown & Lloyd(1982)，以下简称WPM培养基，其中蔗糖改为30g/L，琼脂粉改为5.0～5.4g/L；播种培养基附加TDZ 0.2～0.5mg/L，NAA 15～2.0mg/L；壮苗培养基附加NAA 0.2～0.5mg/L；生根培养基附加NAA 1.5～2.0mg/L，IBA 0.5～1.5mg/L，活性炭2g/L；上述各种培养基在高压灭菌前用氢氧化钠和盐酸调整pH值为5.4；(3)方法用常规基质播种成苗率极低的杂交组合♀小叶铁红×羊踯躅的种子为实验材料，将种子或果实用滤纸包裹严实不散落，用70％酒精浸泡3～5min，无菌水漂洗后0.1％的升汞浸泡摇动10～15min，无菌水漂洗3～5次，每次1～2min，后点播于播种培养基上，株行距1.0～1.5cm，30～45d将壮根苗移栽于泥碳∶珍珠岩＝2∶1的基质中；将弱根苗取其上胚轴，转接于壮苗培养基上培养25～30d，再转接于生根培养基上培养30～45d，移栽于泥碳∶珍珠岩＝2∶1的基质中。
2. 根据权利要求1所述的简易的一品红扦插方法，其特征在于组织培养条件为培养 室温度23±2"，光照强度1500 25001ux，光照时间为12 14h/d。
全文摘要
本发明提供了一种杜鹃花杂交种子培养基播种的育苗方法，属于组织培养技术领域。包括将杜鹃花种子以滤纸包裹灭菌，后点播于附有TDZ 0.2～0.5mg/L、NAA 1.5～2.0mg/L的诱芽培养基上，30d～45d后将壮根苗移栽于泥碳∶珍珠岩＝2∶1的基质中；将弱根苗取其上胚轴，转接于附有NAA0.2～0.5mg/L壮苗培养基上培养25d～30d，再转按与附有NAA 1.5～2.0mg/L、IBA 0.5～1.5mg/L，活性炭2g/L的生根培养基上培养30d～45d，移栽于泥碳∶珍珠岩＝2∶1的混合基质中。本发明可将部分成苗率低的杜鹃花杂交种的成苗率提高30％以上，对杜鹃花的新品种选育有积极意义。
文档编号A01H4/00GK101695284SQ20091023359
公开日2010年4月21日 申请日期2009年10月29日 优先权日2009年10月29日
发明者刘晓青, 李畅, 苏家乐 申请人:江苏省农业科学院;