一株蓝莓根际促生阴沟肠杆菌及其应用的制造方法与工艺

本发明属于植物微生物技术领域，具体涉及一株蓝莓根际促生阴沟肠杆菌及其应用。

背景技术：
蓝莓(Vacciniumssp.L.)，又名越橘、蓝浆果，属杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(VacciniumL.)浆果类经济林木。其天然资源丰富，风味独特，而且具有相当的营养保健功效，有“水果皇后”美誉，经济价值极高。植物根际促生细菌是指生存在植物根圈范围中，对植物生长有促进或对病原菌有拮抗作用的有益细菌统称，对植物生长及病害防治有极其重要的作用。据不完全统计，已发现包括假单胞菌和芽抱杆菌等20多个属的植物根际促生细菌具有防病促生潜能的报道。植物根际促生细菌可分泌植物促生物质，包括植物激素、维生素、氨基酸和其它活性有机小分子及衍生物等；还可改善植物根际的营养环境，有效控制植物病害等。本发明人已从蓝莓根际土壤中筛选出了蓝莓根际促生纺锤芽孢杆菌L13(保藏编号为CGMCCNo.7068)和蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)L5(保藏编号为CGMCCNo.7667)，能适应蓝莓特定的根际土壤环境，并能促进蓝莓生长。然而蓝莓适宜在有机质含量高的酸性土壤(4.0～4.8)生长，限制蓝栽培的主要因素是土壤pH偏高，因此，土壤酸碱度的调节是非常重要的。在人工栽培条件下一般采用土壤施用硫磺粉的方法来调节和维持，这会导致蓝莓土壤pH持续降低，硫磺粉及土壤的强酸性使蓝莓根际土壤的微生物群落结构十分独特。使用微生物调节蓝莓土壤微环境特征是有必要的。而常用的功能微生物接种到蓝莓土壤中，难以存活和定殖，无法产生持续、稳定的功效。而基于上述原因，适宜蓝莓的PGPR菌株资源仍然十分匮乏。因此继续丰富蓝莓菌株资源，开发蓝莓专用菌剂，对蓝莓产业的健康发展具有重要意义。

技术实现要素：
针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一株蓝莓根际促生阴沟肠杆菌，该菌株具有降低蓝莓根际土壤pH，促进蓝莓生长的作用。具体的，本发明涉及以下技术方案：本发明的一个目的在于提供一株蓝莓根际促生阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)BIA070，该菌株已于2016年1月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11970。所述阴沟肠杆菌菌落特征及菌体形态为：LB培养基上菌落形态呈规则圆形，生长24h后菌落大小约为1-2mm，表面凸起，湿润，微黄色，半透明，镜检菌体形态为短杆状，无芽孢。所述阴沟肠杆菌菌株生理生化特征为：吲哚试验阴性，甲基红试验阴性，柠檬酸盐试验阳性，脲酶试验阳性，苯丙氨酸脱氨酶试验阴性，赖氨酸脱羧酶试验阴性，鸟氨酸脱羧酶试验阳性，D-葡萄糖产酸试验阳性，D-葡萄糖产气试验阳性，卫矛醇试验阴性，棉籽糖试验阳性，氧化酶试验阴性，D-木糖试验阳性。所述阴沟肠杆菌具有产吲哚乙酸(IAA)能力，可促进蓝莓生长。所述阴沟肠杆菌的16SrDNA序列分析：：将所测16SrDNA序列与GenBank数据库中的序列比对，结果表明：BIA070与阴沟肠杆菌Enterobactercloacae(ABA244288.1)的相似度达98.42％。结合菌落、菌体形态特征，生理生化特征和16SrDNA序列分析，将BIA070鉴定为阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)。本发明的另一目的在于提供上述阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)BIA070的培养方法，包括：将菌株阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)BIA070在LB液体培养基中在37℃，180rpm的条件下培养24h，按1％接种量将种子液接种至LB液体培养基中进行发酵，37℃，180rpm培养2d，制得活化菌液；进一步离心可收集阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)BIA070菌体。LB液体培养基配为：蛋白胨10g；NaCl10g；酵母浸膏5g；水1000ml；pH7.0-7.2。本发明还提供一种菌剂，其包括上述阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)BIA070菌体或阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)BIA070的培养物。此外，本发明还提供上述菌株或菌剂在促进蓝莓生长中的应用。本发明具有如下优点：本发明的蓝莓根际阴沟肠杆菌应用到蓝莓根系的土壤中，可有效适应并调节蓝莓根际土壤的生态环境，在一定程度上降低蓝莓土壤pH，同时可明显促进蓝莓主枝长...