专利名称：温度、光照和营养综合调控条斑星鲽性腺成熟排卵方法
技术领域：
本发明属于条斑星鲽生殖调控产卵技术，是一种人工控制光照、水温，并利用营养
强化措施促进条斑星鲽亲鱼性腺成熟排卵的方法。
背景技术：
条斑星鲽(Verasper moseri)为冷水性底栖大型鲽类，主要分布于日本茨城县以 北的太平洋沿岸和若狭湾以北的日本海沿岸。我国黄海和渤海以前也有分布，现在已多年 未见渔获。条斑星鲽在适宜的养殖条件下，经一年的养成，体重可达到900克/尾以上，生 长速度快，耐低温、抗逆能力强，成活率高，饵料转换率高，养殖成本低，病害发生率低，是一 种优良的养殖鱼类，可在我国北方地区进行广泛养殖。2007年，条斑星鲽人工繁育技术获得 突破，为该名优鱼种养殖的产业化开发奠定了良好的基础。 条斑星鲽的繁殖主要有自然产卵技术和人工诱导产卵技术。采用水温剌激法可获 得条斑星鲽的自然产卵(中国科学院海洋研究所，肖志忠等，2007)，但是存在自然产卵的 亲鱼数量少、产卵期短、诱导产卵条件复杂获得受精卵的数量少、收集受精卵困难等问题， 在规模化苗种生产过程中尚不能普及推广应用；采用激素诱导方法同样可以获得受精卵， 但是单纯使用激素诱导获得优质受精卵的技术不稳定，同样存在亲鱼性腺对激素效应时间 各异，各批次卵子受精率和孵化率差异较大的问题，不能满足批量化苗种的生产需要。通常 在人工温光调控条件下，亲鱼性腺成熟排卵，但是卵母细胞常常因营养物质的缺乏不能达 到最终成熟，或者质量低下，影响优质受精卵的获得。营养强化是针对亲鱼卵母细胞发育所 需营养物质进行专门的营养物质调控，可促进亲鱼卵母细胞发育成熟，大大提高卵子质量。 因此，利用温度、光照和营养综合调控条斑星鲽性腺最终发育成熟并顺利排卵，是稳定获取 优质受精卵的重要保障。目前尚未见有报道。
发明内容
本发明的目的提供一种温度、光照和营养强化综合调控条斑星鲽性腺成熟排卵 技术方法。
本发明按以下技术方案实现主要内容包括亲鱼优选、培育及饲料饲喂，水温和光 照调控亲鱼发育，营养强化促进性腺成熟排卵三方面
—、亲鱼的优选和培育
1、亲鱼优选 选择形态、体色正常、个体大、健康无伤的3龄以上雌性亲鱼，全长达40-65厘米， 体重1300-3500克；雄鱼达2龄以上，全长29-45厘米，体重达600-1500克。
2、亲鱼培育及饲料饲喂 亲鱼置于专用温光调控培育池(30m2)内进行强化培育，亲鱼入池的性比为早$ =1 : 1 1.5，饲养密度3 5kg/m2。培育水温6 18t:，连续充气、流水培育，换水率 400-600% ，定时清池换水。水质条件溶解氧>6. Omg/L，PH 7. 6-8. 2，盐度29-33。亲鱼的饵料以小黄花鱼、杂虾为主。日投喂2次，日投喂量为鱼体体重的2%-3%，及时清除残饵、 排污。 二、水温、光照调控
1、水温调控 在温度、光照调控前，将条斑星鲽的培育水温控制在14-15°C，自然光照，光照强度 为100Lux左右；繁殖期到来前2-3个月，开始调控水温，当自然水温降至12t:时，开始控 温。控温方式每5天水温缓慢降低rC，直至降至6t:后维持不变并停留10-15天。然后
水温从6t:开始回升，每5天水温缓慢升高rc，直至升值至9t:后维持不变，定期观察亲鱼
性腺发育情况。水温靠地下井水和自然海水混合调节控制，日换水率400%-500%。每天 12次监测水温的变化，精确调控每天温度变化在±0. 2t:范围内。
2、光照的调控 在温度调控过程中，当水温降至到6t:时开始进行光照调控。将亲鱼培育池用黑色
不透光篷布完全遮盖，在培育池水面1米高度处悬挂白炽灯，调节光照强度为260-300Lux。 当水温为6t:时控制光照时间为IO小时，以后每5天增加光照时间1小时，直至光照时间达 到16小时并维持不变，以定时器精确管理每天的光照时间。
三、营养强化调控亲鱼性腺成熟排卵 在亲鱼性腺发育开始启动后，在饵料中添加卵磷脂等添加剂(每公斤饵料鱼按照
3g卵磷脂添加)，进行营养强化。添加剂的制作及添加方法以复合维生素卵磷脂粉末 饲料鱼油=1 :i:6: 6的比例混合制作成粘的糊状，分成黄豆大小的粒状，以镊子夹 取置入饵料鱼口部后投喂，促进亲鱼性腺进一步成熟。在亲鱼性腺发育至in期后，每天增
加加投喂沙蚕，沙蚕每天投喂一次，每次按照体重的2%投喂，强化亲鱼磷脂、卵黄蛋白、DHA
及EPA营养物质的摄入。待亲鱼性腺完全成熟后，人工挤压亲鱼腹部获得成熟的卵子，人工
采卵受精获得受精卵。 本发明与已有技术对比其特点 本发明综合利用水温、光照、营养强化措施调控诱导条斑星鲽亲鱼性腺发育成熟 排卵，是一种连续完整的成套技术。亲鱼经营养强化后，卵子可达到最后成熟并排卵，人工 采卵获得的卵子质量高，以人工采卵受精技术获得大批量优质受精卵，可保证苗种规模化 生产的顺利进行。 本发明根据条斑星鲽性腺发育的生理生态规律，采用温度(降温_再升温)、光照 调控法(逐渐延长光照时间)，调控亲鱼性腺同步发育至四期，性腺发育成熟的亲鱼比率高 达75%。 本发明采用的专门的营养强化措施，包括添加剂和沙蚕的使用。添加剂主要成分 为卵磷脂，沙蚕为高蛋白和高不饱和脂肪酸(DHA和EPA)的来源，这些营养物质可充分促进 卵母细胞发育所需卵黄蛋白和其它营养物质的获取，有效促进亲鱼卵母细胞的最终成熟和 提升卵子质量。
图1 :温光、营养综合诱导条斑星鲽产卵期内产卵量。
图2 :温光、营养综合诱导条斑星鲽产卵期内上浮卵率。
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图3 :温光、营养综合诱导条斑星鲽产卵期内受精率。
图4 :温光、营养综合诱导条斑星鲽产卵期内孵化率。
具体实施例方式
下面通过具体实施例结合附图叙述本发明的技术内容。 为了获得条斑星鲽优质受精卵，于2007-2008年在莱州基地，采取温度、光照和营 养综合调控措施，诱导条斑星鲽亲鱼性腺发育成熟，人工采卵受精获得批量优质受精卵，具 体实施过程如下
实验方法 实验方法主要包括亲鱼优选和培育，水温和光照调控亲鱼发育，营养强化促进亲
鱼成熟排卵等部分。
1.亲鱼选择及培育 实验选用条斑星鲽3龄以上亲鱼680尾(370早310 $ )，雌鱼平均体重2408 克，雄鱼平均体重839克。亲鱼体形、体色正常，健康无损伤。亲鱼放入长方形抹角培育池 (30m、水深1. 5米)进行培育。培育用水为砂滤自然海水，水质条件为DO > 6. Omg/L， pH =7. 6-8.2，盐度29-33。 亲鱼的饲料佴料以冰鲜小黄花鱼和杂虫下为主。日投喂2次，日投喂量为鱼体体重 的2%_3%，在繁殖季节前饵料中添加卵磷脂(每kg饵料按照1.5X添加)等添加剂，并保 持较高换水率(300-500% )，促进亲鱼性腺的发育，整个繁殖季节保持相同的投喂率。投喂 过程中及时清除残饵、排污。
2.水温、光照调控措施 在温度、光照调控前，将条斑星鲽的培育水温控制在14-15°C，自然光照，光照强度 为lOOLux左右；繁殖期到来前2-3个月，开始调控水温，当自然水温降至12t:时，开始控 温。控温方式每5天水温缓慢降低rC，直至降至6t:后维持不变并停留10-15天。然后
水温从6t:开始回升，每5天水温缓慢升高rc，直至升至9t:后维持不变，定期观察亲鱼性
腺发育情况。水温靠地下井水和自然海水混合调节控制，日换水率400%-500%。每天12
次监测水温的变化，精确调控每天温度变化在±0. 2t:范围内。在温度调控过程中，当水温降至到6t:时开始进行光照调控。亲鱼培育池用黑色 不透光篷布完全遮盖，在培育池水面1米高度处悬挂白炽灯，调节光照强度为260-300Lux。 当水温为6t:时控制光照时间为IO小时，以后每5天增加光照时间1小时，直至光照时间达 到16小时并维持不变，以定时器精确管理每天的光照时间。
3.营养强化促进最终成熟和排卵 在亲鱼性腺发育启动后，开始在饵料中添加卵磷脂等添加剂(每公斤饵料鱼按照
3g卵磷脂添加)。添加剂的制作及添加方法以复合维生素卵磷脂粉末饲料鱼油= l:i:6: 6的比例混合制作成糊状，分成黄豆大小的粒状，以镊子夹取放入饵料鱼口内 后投喂。在亲鱼性腺发育达到in期后，每天增加投喂沙蚕，一天投喂一次，每次按照体重
的2%投喂，强化亲鱼的蛋白、DHA及EPA等营养物质的摄入。观察到亲鱼性腺松软有一定 透明度的时候，人工挤压亲鱼腹部获得成熟的卵子，人工采卵受精获得受精卵。
4.人工采卵受精获取受精卵
性腺成熟的亲鱼排卵后并吸水膨胀，性腺明显隆起，及时进行人工挤卵采集卵子。 采卵受精方式为用麻醉剂(MS222)对亲鱼进行轻度麻醉后，从生殖腺后端沿生殖腺向前 端进行挤压，获得卵子置于干燥洁净的器皿内，然后挤取成熟精子，以羽毛或玻璃棒搅拌均 匀后加入海水，静置10-15min，将沉卵和浮卵分离后，上浮卵移入专用孵化设施进行孵化。
5.实验结果 本实验中，亲鱼性腺成熟后人工采卵，获得的卵子质量高，可发育的潜力大。亲鱼 性腺发育成熟率75%以上，可进行采卵的亲鱼成熟率达85% 。本实验共采得卵子225公斤， 其中上浮卵151公斤(见图1)，可采得卵子的期间长达78天，获得优质受精卵数量多，上浮 卵率67% (见图2)，卵子受精率达到71.5% (见图3)，孵化率达到47.6% (见图4)。
2008-2009年，重复本发明所述的方法，证明效果可重复。 本发明提供的温度、光照和营养强化措施综合调控产卵技术对条斑星鲽亲鱼的产 卵调控效果优良，可用于获得大批量优质受精卵，保障规模化苗种繁育的顺利进行。
权利要求
一种温度、光照和营养综合调控条斑星鲽性腺成熟排卵方法，其特征在于它的方法内容包括亲鱼优选、培育及饲料饲喂，水温和光照调控亲鱼发育，营养强化调控亲鱼性腺成熟排卵三方面(1)、亲鱼的优选、培育及饲料A、亲鱼优选选择形态、体色正常、个体大、健康无伤的3龄以上雌性亲鱼，全长达40-65厘米，体重1300-3500克；雄鱼达2龄以上，全长29-45厘米，体重达600-1500克；B、亲鱼培育及饲料投喂亲鱼置于30m2专用温光调控培育池内进行强化培育，亲鱼入池的性比为♀∶♂＝1∶1～1.5，饲养密度3～5kg/m2；培育水温6～18℃，连续充气、流水培育，换水率400-600％，定时清池换水；水质条件溶解氧＞6.0mg/L，PH 7.6-8.2，盐度29-33；亲鱼的饵料以小黄花鱼、杂虾为主；日投喂2次，日投喂量为鱼体体重的2％-3％，及时清除残饵、排污；(2)、水温、光照调控A、水温调控在温度、光照调控前，将条斑星鲽的培育水温控制在14-15℃，自然光照，光照强度为100Lux左右；繁殖期到来前2-3个月，开始调控水温，当自然水温降至12℃时，开始控温，控温方式每5天水温缓慢降低1℃，直至降至6℃后维持不变并停留10-15天；然后水温从6℃开始回升，每5天水温缓慢升高1℃，直至升至9℃后维持不变，定期观察亲鱼性腺发育情况；水温靠地下井水和自然海水混合调节控制，日换水率400％-500％；每天12次监测水温的变化，精确调控每天温度变化在±0.2℃范围内；B、光照的调控在温度调控过程中，当水温降至到6℃时开始进行光照调控；将亲鱼培育池用黑色不透光篷布完全遮盖，在培育池水面1米高度处悬挂白炽灯，调节光照强度为260-300Lux；当水温为6℃时控制光照时间为10小时，以后每5天增加光照时间1小时，直至光照时间达到16小时并维持不变，以定时器精确管理每天的光照时间；(3)、营养强化调控亲鱼性腺成熟排卵在亲鱼性腺发育开始启动后，以鲜杂鱼为饵料，在饵料中添加卵磷脂，按每公斤饵料添加3g卵磷脂，进行营养强化；添加剂的制作及添加方法以复合维生素∶卵磷脂∶粉末饲料∶鱼油＝1∶1∶6∶6的比例混合制作成粘的糊状，分成黄豆大小的粒状，混入鲜杂鱼饵料中投喂，促进亲鱼性腺发育；在亲鱼性腺发育至IV期后，每天增加投喂一次沙蚕，投喂量为体重的2％，以增加性腺发育所需磷脂、卵黄蛋白、DHA及EPA营养物质的摄入；待亲鱼性腺完全成熟后，人工挤压亲鱼腹部获得成熟的卵子，人工采卵受精获得受精卵。
全文摘要
一种温度、光照和营养综合调控条斑星鲽性腺成熟排卵方法，其方法是在繁殖期开始前2-3个月，利用温度和光照调控亲鱼性腺同步发育，在亲鱼性腺发育启动时，在饵料中添加卵磷脂等添加剂促进亲鱼营养吸收，在亲鱼性腺发育至III期后，每天增加投喂沙蚕，促进卵母细胞的最终成熟和质量提升，该方法调控下可排卵的亲鱼比率高达85％，产卵效果良好。本发明可用于苗种规模化生产，可获得大批量优质受精卵，保证苗种繁育的顺利进行。
文档编号A23K1/18GK101790966SQ20101012230
公开日2010年8月4日 申请日期2010年2月9日 优先权日2010年2月9日
发明者刘新富, 孙中之, 徐永江, 柳学周, 王妍妍, 陈超 申请人:中国水产科学研究院黄海水产研究所