专利名称：一种草莓脱毒快繁技术的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种草莓栽培、繁殖技术，具体涉及一种草莓脱毒快繁技术，属林果加工技术领域。
背景技术：
近几年来，草莓病毒感染严重的问题已经成为致使生产的草莓果个偏小，品质较差，果个不整齐的重要因素。同其它无性繁殖植物一样，草莓在生产过程中易感染病毒，从而造成草莓品种的种性退化。因此，无性繁殖数量越大，病毒传播也越快。草莓感染病毒后易出现叶片皱缩、果实畸形、品质变劣、产量下降、植株生长缓慢等退化现象。病毒是引起草莓产量和品质下降的一个重要因素。
发明内容
本发明的目的是为克服上述现有技术的不足之处，提供一种草莓脱毒快繁技术， 采用花药培养和超低温处理等方法，对草莓进行脱毒处理，建立了高效的草莓脱毒繁育体系，利用超低温脱毒法可以简便有效的脱除SMYEV病毒，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作。本发明是以如下技术方案实现的一种草莓脱毒快繁技术，其特征是该技术包括花药培养脱毒、超低温处理脱毒，具体按如下步骤进行(1)花药培养脱毒将取自于田间健壮草莓花蕾，发育时期为单核靠边期(横径 4-6mm)，在冰箱里4°C冷处理72h，然后将花蕾分别用70%酒精和0. 1 %升汞消毒，将消毒好的花蕾用无菌吸水纸吸干表面的水后剥取花药，接种到愈伤组织诱导培养基中，然后转到再生培养基中，再将诱导出的草莓健壮苗转接到继代培养基上，最后转到生根培养基进行生根处理；(2)超低温处理脱毒利用结合内标的RT-PCR进行草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的检测，对含有该病毒的植株，拨取茎尖做初代培养，继代扩繁5次以后，拨取2mm左右的茎尖，利用玻璃化超低温液氮处理技术对SMYEV进行脱除，在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0. 5mol/L，处理3d ；装载处理为25°C，Ih ；玻璃化处理为0°C，2h ；液氮处理Ih后，进行 40°C水浴2min，草莓茎尖的存活率为76%，轻型黄边病毒的脱毒率达到95%。本发明的优点是采用该技术对草莓进行脱毒处理，建立了高效的草莓脱毒繁育体系，利用超低温脱毒法可以简便有效的脱除SMYEV病毒，超低温脱毒法不仅脱毒率很高， 而且简单易行，便于操作。
具体实施例方式实施例、一种草莓脱毒快繁技术，该技术包括花药培养脱毒、超低温处理脱毒，具体按如下步骤进行
(1)花药培养脱毒将取自于田间健壮草莓花蕾，发育时期为单核靠边期(横径 4-6mm)，在冰箱里4°C冷处理72h，然后将花蕾分别用70%酒精和0. 1 %升汞消毒，将消毒好的花蕾用无菌吸水纸吸干表面的水后剥取花药，接种到愈伤组织诱导培养基中，然后转到再生培养基中，再将诱导出的草莓健壮苗转接到继代培养基上，最后转到生根培养基进行生根处理；(2)超低温处理脱毒利用结合内标的RT-PCR进行草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的检测，对含有该病毒的植株，拨取茎尖做初代培养，继代扩繁5次以后，拨取2mm左右的茎尖，利用玻璃化超低温液氮处理技术对SMYEV进行脱除，在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0. 5mol/L，处理3d ；装载处理为25°C，lh ；玻璃化处理为0°C，2h ；液氮处理Ih后，进行 40°C水浴aiiin，草莓茎尖的存活率为76%，轻型黄边病毒的脱毒率达到95%。
权利要求
1. 一种草莓脱毒快繁技术，其特征是该技术包括花药培养脱毒、超低温处理脱毒，具体按如下步骤进行(1)花药培养脱毒将取自于田间健壮草莓花蕾，发育时期为单核靠边期(横径 4-6mm)，在冰箱里4°C冷处理72h，然后将花蕾分别用70%酒精和0. 1 %升汞消毒，将消毒好的花蕾用无菌吸水纸吸干表面的水后剥取花药，接种到愈伤组织诱导培养基中，然后转到再生培养基中，再将诱导出的草莓健壮苗转接到继代培养基上，最后转到生根培养基进行生根处理；(2)超低温处理脱毒利用结合内标的RT-PCR进行草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的检测，对含有该病毒的植株，拨取茎尖做初代培养，继代扩繁5次以后，拨取2mm左右的茎尖， 利用玻璃化超低温液氮处理技术对SMYEV进行脱除，在病毒脱除过程中，预培养蔗糖浓度为0. 5mol/L,处理3d ；装载处理为25°C，Ih ；玻璃化处理为0°C，2h ；液氮处理Ih后，进行 40°C水浴2min，草莓茎尖的存活率为76%，轻型黄边病毒的脱毒率达到95%。
全文摘要
本发明涉及一种草莓栽培、繁殖技术，具体涉及一种草莓脱毒快繁技术，属林果加工技术领域。该技术采用花药培养和超低温处理等方法，对草莓进行脱毒处理，建立了高效的草莓脱毒繁育体系，利用超低温脱毒法可以简便有效的脱除SMYEV病毒，超低温脱毒法不仅脱毒率很高，而且简单易行，便于操作。
文档编号A01H4/00GK102369880SQ20101025333
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月9日 优先权日2010年8月9日
发明者苗茹 申请人:苗茹