专利名称：一种蟹爪兰种苗的快速繁殖方法
技术领域：
本发明涉及一种蟹爪兰花卉种苗的快速繁殖方法，属于生物技术领域。
背景技术：
蟹爪兰为仙人掌科蟹爪兰属肉质多浆植物，附生类型，原产于巴西东部热带雨林 中。嫩绿色，新出茎节带红色，主茎圆，易木质化，植株分枝多并向四周扩展，外形酷似蟹爪， 叶状茎扁平多节，肥厚，卵圆形，先端截形，边缘具粗锯齿。花着生于茎的顶端，花被开张反 卷，花色有淡紫、黄、红、纯白、粉红、橙和双色等。常见栽培品种有大红、粉红、杏黄和纯白 色。其花色鲜艳、花朵密集、花形优美。蟹爪兰开花正逢圣诞节、元旦节，株型垂挂，花色鲜 艳可爱，适合于窗台、门庭入口处和展览大厅装饰，是一种深受人们喜爱的盆栽花卉。蟹爪兰常通过扦插或嫁接繁殖。但扦插或嫁接繁殖速度较慢，对母本材料要求高， 用量大，还受到季节的限制，难以进行规模化、标准化生产和优良品种的大面积推广。此外， 目前应用的繁殖方法生产成本较高、培养周期长，难于将筛选的优良性状固定下来。因此， 需要寻找一种新的成本低、时间短、成活率高，且能够将优良性状固定下来的无性繁殖方法 来扩大蟹爪兰繁殖量，进行蟹爪兰种苗的工厂化生产，以满足市场需求。
发明内容
针对现有蟹爪兰种苗繁殖技术存在的上述缺陷或不足，本发明的目的在于提供一 种蟹爪兰种苗的快速繁殖方法，以提高增殖率和生根率，同时将优良性状的种苗固定下来， 满足优质种苗的大规模生产需要。本发明提供的蟹爪兰种苗的快速繁殖方法经过下列步骤A、将选出并经消毒灭菌处理的蟹爪兰外植体接入下列培养基中MS基本培养液6-节胺基嘌呤 6-BA 1. 0 2. Omg/L萘乙酸NAA0. 05mg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LPH5. 8 6.0在光照强度为1500 20001x，温度为25士2°C，光照时间为10 12h/d的条件下， 同步进行诱导和增殖培养12 15天，更新相同培养基，并在相同培养条件下继续培养至外 植体萌发分化出0. 5 Icm的幼芽，切下幼芽；B、将A步骤切下的幼芽转接到新的与A步骤相同的培养基中，并在与A步骤相同 的培养条件下进行继代培养，每25 30d继代转接一次，如此继代培养至增殖倍数为3 4，得增殖的植株；C、取B步骤继代培养出的长度为2 3cm的健壮植株接种到下列培养基中1/2MS基本培养液
萘乙酸NAA吲哚乙酸IAA
0. lmg/L 30000mg/L 6500mg/L 5· 8 6· 0
0· 3 0· 5mg/L蔗糖琼脂pH在光照强度为1500 20001x，温度为25士2°C，光照时间为10 12h/d的条件下， 生根培养至植株基部长出3 5条细根；D、取C步骤的健壮生根植株于室外散射光下进行常规炼苗6 8d，取出炼苗，按常 规洗净苗上的培养基，放入质量浓度为0. 1 0. 2%的多菌灵溶液中消毒1 2min后，移 栽至装有下列质量比基质的育苗袋中腐植土 红土 珍珠岩=1.5 1 0. 5，在常规浇 水、施肥管理条件下，生长40d后，即得移栽苗。所述A步骤的外植体选择是选择生长旺盛的蟹爪兰幼嫩叶状茎段，切取顶部3 4cm长的初生茎段作为外植体。所述A步骤的外植体消毒灭菌处理是将切下的外植体先用自来水冲洗lOmin，后 用常规洗衣粉水漂洗5min，在无菌超净台中将外植体放入质量浓度为70 75%的乙醇溶 液中浸泡10s，用无菌水漂洗2次，再在质量浓度为0. 的升汞中浸泡15min，在质量浓度 为1. 5 2%的次氯酸钠加适量吐温的溶液中浸泡lOmin，最后用无菌水漂洗4 5次，得 消毒灭菌处理的外植体。本发明具有下列优点和效果1、用组织培养技术在培养室内即可实现周年生产，既节约了土地资源，又提高了 经济效益，克服了种苗无法周年进行生产的难点。2、繁殖速度快，25 30天为一个周期，繁殖倍数可达3 4。3、解决了常规繁育体系生产的种苗亲本来源复杂，种苗质量不稳定的难题，通过 本发明，使种苗性状稳定，种苗来源单一，易于标准化、工厂化操作，有效地提高了种苗质 量，可为市场提供统一标准的优良种苗。4、本发明在外植体的选择方面，选择优良株系，通过本发明中的快速繁殖方法将 蟹爪兰品种的优良种性快速地固定并保持下来，有效缩短了繁育周期。5、对整个蟹爪兰种苗生产技术流程中的关键环节进行优化整合，对诱导培养基进 行调配，同步进行芽诱导和增殖培养，简化了组培技术的培养程序，只需两种培养基配方， 不经过愈伤组织的形成，直接长成新芽，减少不定芽发生变异的机率，可有效控制变异株的 产生，利于安排生产计划。6、无菌生根苗直接移栽进入育苗袋中，省去了组培苗营养钵移栽的环节，移栽成 活的种苗便于运输，摘去育苗袋后直接栽种。
具体实施例方式为了更好地说明本发明，下面给出本发明的实施例，但本发明的内容并不仅限于 此。实施例11、外植体选择开花时，选择花多且株型优美，枝条硬，无病虫害，无畸型的植株做好标记，标记的植株作为备用的外植体植株；晴天上午，选择生长旺盛的蟹爪兰幼嫩叶状茎 段，用手术刀切取顶部长约3 4cm的初生茎段；2、将1步骤的初生茎段先在自来水下冲洗lOmin，后用常规洗衣粉水漂洗5min，在 无菌超净台中将茎段放入质量浓度为70 %的乙醇溶液中浸泡10s，用无菌水漂洗2遍，再在 质量浓度为0. 的升汞中浸泡15min，又在质量浓度为1. 5%的次氯酸钠加适量吐温的溶 液中浸泡lOmin，最后用无菌水漂洗4遍，在浸泡过程中充分摇动器皿；3、芽诱导和增殖同步培养将经过2步骤消毒灭菌的茎段作为外植体，并切成 0. 5 Icm长，接入下列诱导和增殖培养基中MS基本培养液6-苄胺基嘌呤(6_BA) 2mg/L萘乙酸(NAA)0. 05mg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LPH5. 8在光照强度15001x，温度为25士2°C，光照时间为12h/d条件下，同步进行芽诱导 和增殖培养12天，把无污染的外植体及时转入更新的相同培养基中，以减少外植体的褐 化，并在相同培养条件下继续培养25d，在外植体上萌发分化出0. 5cm的幼芽，切下幼芽；4、继代培养将3步骤切下的幼芽转入新的与3步骤相同的诱导和增殖培养基中， 并在与3步骤相同的培养条件下进行继代培养，且每25d继代转接一次，如此培养至增殖倍 数为4，使之达到生产所需的植株种源基数；5、生根培养取4步骤继代培养得到的长度为2 3cm的健壮植株，接种到下列生 根培养基中1/2MS基本培养液萘乙酸(NAA)0. 3mg/L吲哚乙酸(IAA)0. lmg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LpH5. 8在光照强度为15001x，温度为25士2°C，光照时间为12h/d条件下，进行生根培养 25d后，在植株基部长出3 5条细根，得生根苗，其生根率在95%以上；6、炼苗和移栽将5步骤的健壮生根苗放在室外散射光下锻炼6d后，将练苗从瓶 内取出，用清水洗净苗上培养基，放入质量浓度为0. 1 %的多菌灵溶液中消毒2min后，移栽 至装有下列质量比基质的育苗袋中腐质土 红土 珍珠岩=1.5 1 0.5，育苗袋为直 径5cm、高IOcm的透明塑料薄膜袋，按常规浇水、施肥管理，前期注意保湿和遮阴，以后逐渐 减少遮阴并适当控水，成活率可达90%以上，40d后，得移栽苗，即可移栽到花盆中。实施例21、外植体选择开花时，选择花多且株型优美，枝条硬，无病虫害，无畸型的植株做 好标记，标记的植株作为备用的外植体植株；晴天上午，选择生长旺盛的蟹爪兰幼嫩叶状茎 段，用手术刀切取顶部长约3 4cm的初生茎段；
2、将1步骤的初生茎段先在自来水下冲洗lOmin，后用常规洗衣粉水漂洗5min，在 无菌超净台中将茎段放入质量浓度为75 %的乙醇溶液中浸泡10s，用无菌水漂洗2遍，再在 质量浓度为0. 的升汞中浸泡15min，又在质量浓度为2%的次氯酸钠加适量吐温的溶液 中浸泡lOmin，最后用无菌水漂洗5遍，在浸泡过程中充分摇动器皿；3、芽诱导和增殖同步培养将经过2步骤消毒灭菌的茎段作为外植体，并切成 0. 5 Icm长，接入下列诱导和增殖培养基中MS基本培养液6-苄胺基嘌呤(6-BA) lmg/L萘乙酸(NAA)0. 05mg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LPH6. O在光照强度20001x，温度为25士2°C，光照时间为10h/d条件下，同步进行芽诱导 和增殖培养15天，把无污染的外植体及时转入更新的相同培养基中，以减少外植体的褐 化，并在相同培养条件下继续培养25d，在外植体上萌发分化出Icm的幼芽，切下幼芽；4、继代培养将3步骤切下的幼芽转入新的与3步骤相同的诱导和增殖培养基中， 并在与3步骤相同的培养条件下进行继代培养，且每30d继代转接一次，如此培养至增殖倍 数为3，使之达到生产所需的植株种源基数；5、生根培养取4步骤继代培养得到的长度为2 3cm的健壮植株，接种到下列生 根培养基中1/2MS基本培养液萘乙酸(NAA)0. 5mg/L吲哚乙酸(IAA)0. lmg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LpH6. O在光照强度为20001x，温度为25士2°C，光照时间为10h/d条件下，进行生根培养 25d后，在植株基部长出3 5条细根，得生根苗，其生根率在90%以上；6、炼苗和移栽将5步骤的健壮生根苗放在室外散射光下锻炼8d后，将练苗从瓶 内取出，用清水洗净苗上培养基，放入质量浓度为0. 2%的多菌灵溶液中消毒Imin后，移栽 至装有下列质量比基质的育苗袋中腐质土 红土 珍珠岩=1.5 1 0.5，育苗袋为直 径7cm、高6cm的透明塑料薄膜袋，按常规浇水、施肥管理，前期注意保湿和遮阴，以后逐渐 减少遮阴并适当控水，成活率可达80%以上，40d后，得移栽苗，即可移栽到花盆中。
权利要求
一种蟹爪兰种苗的快速繁殖方法，其特征在于经过下列步骤A、将选出并经消毒灭菌处理的蟹爪兰外植体接入下列培养基中MS基本培养液6 苄胺基嘌呤6 BA1.0～2.0mg/L萘乙酸NAA 0.05mg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LPH 5.8～6.0在光照强度为1500～2000lx，温度为25±2℃，光照时间为10～12h/d的条件下，同步进行诱导和增殖培养12～15天，更新相同培养基，并在相同培养条件下继续培养至外植体萌发分化出0.5～1cm的幼芽，切下幼芽；B、将A步骤切下的幼芽转接到新的与A步骤相同的培养基中，并在与A步骤相同的培养条件下进行继代培养，每25～30d继代转接一次，如此继代培养至增殖倍数为3～4，得增殖的植株；C、取B步骤继代培养出的长度为2～3cm的健壮植株接种到下列培养基中1/2MS基本培养液萘乙酸NAA 0.3～0.5mg/L吲哚乙酸IAA 0.1mg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/LpH 5.8～6.0在光照强度为1500～2000lx，温度为25±2℃，光照时间为10～12h/d的条件下，生根培养至植株基部长出3 5条细根；D、取C步骤的健壮生根植株于室外散射光下进行常规炼苗6～8d，取出炼苗，按常规洗净苗上的培养基，放入质量浓度为0.1～0.2％的多菌灵溶液中消毒1～2min后，移栽至装有下列质量比基质的育苗袋中腐植土∶红土∶珍珠岩＝1.5∶1∶0.5，在常规浇水、施肥管理条件下，生长40d后，即得移栽苗。
全文摘要
本发明提供一种蟹爪兰种苗的快速繁殖方法。它将选出并经消毒灭菌处理的蟹爪兰外植体接入诱导和增殖培养基中，同步进行诱导和增殖培养至外植体萌发分化出幼芽，再继代培养至增殖倍数为3～4，转接到生根培养基中，生根培养至植株基部长出3～5条细根，按常规进行炼苗后，移栽至腐植土、红土和珍珠岩的混合基质中，按常规浇水、施肥后，生长得蟹爪兰种苗。本发明对整个蟹爪兰种苗生产技术流程中的关键环节进行优化整合，对诱导培养基进行调配，同步进行芽诱导和增殖培养，简化了组培程序，缩短了繁育周期，只用两种培养基，不经过愈伤组织的形成，就直接长成新芽，减少不定芽发生变异的机率，有效控制变异株的产生，并能将蟹爪兰品种的优良种性快速地固定并保持下来，提高了种苗质量，解决了常规繁育体系生产的种苗亲本来源复杂，种苗质量不稳定的难题。
文档编号A01H4/00GK101940160SQ201010269109
公开日2011年1月12日 申请日期2010年9月1日 优先权日2010年9月1日
发明者单芹丽, 李金泽, 杨春梅, 汪国鲜, 赵培飞, 龙江 申请人:云南省农业科学院花卉研究所