一种深红虫草及利用其制备卵孢菌素的方法和其用途的制作方法

文档序号:315818阅读:293来源:国知局
专利名称:一种深红虫草及利用其制备卵孢菌素的方法和其用途的制作方法
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,具体而言,涉及一株虫草属菌株-深红虫草 (Cordycepscardinalis)C033及利用该菌株发酵制备真菌毒素卵孢菌素(oosporein)的方法。本发明还涉及上述深红虫草C033作为生物防治剂的应用和作为生物防治剂的活性成份。
背景技术
生物防治是指利用有益生物及其代谢产物和基因产品等控制有害生物的方法。生物防治具有许多优于化学防治的特点,如对人畜安全,不污染环境,不会(或较少)产生抗性,以及由于仅杀伤或抑制防治对象,因此,能参与生态环境的调控,保持生态平衡,有利于农业可持续发展,提高经济效益、社会效益和生态效益,发展前景广阔。1971年建立了生物防治国际组织(International Organization for Biological Control,I0BC),并在世界各大区设立地区分部。此后世界生物防治发展极为迅速,在宏观决策上,发达国家已将生物防治技术作为缓解当今世界所面临的五大危机的战略决策之一。真菌杀虫剂、真菌杀菌剂等新型生物农药在病虫害防治中也显示出良好的应用前景。国际生防组织(IOBC)使用黄绿绿僵菌防治沙漠蝗虫,美国引进舞毒蛾噬虫霉防治舞毒蛾,巴西使用金龟子绿僵菌防治甘薯沫蝉等,均取得了显著效果。哈茨木霉T39已在以色列、希腊等国家登记,主要用于防治灰霉病。我国开展真菌生物农药制剂的研究开发已有30 多年的历史,其中主要以研究球孢白僵菌(Beaurevia bassiana)为主。木霉菌剂也已开发成功,主要用于防治各种作物的霜霉病,具有较为理想的效果和应用前景。本发明涉及的化合物卵孢菌素结构式如下式(I)所示
权利要求
1.深红虫草(Cordyc印Scardinalis)C033,保藏编号为CCTCC NO :M 2010256。
2.一种制备卵孢菌素的方法,其特征在于,卵孢菌素是从权利要求1所述的深红虫草 (Cordyceps cardinalis)C033的发酵培养物中分离制备得到的。
3.根据权利要求2所述的制备卵孢菌素的方法,其特征在于,所述的从权利要求1所述的深红虫草(Cordyc印s cardinalis) C033的发酵培养物中分离制备得到卵孢菌素,包括以下步骤(1)制备深红虫草(Cordyc印scardinalis)C033的发酵培养物;(2)将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离,取发酵液,向发酵液中加入不与水混溶的有机溶剂萃取,获得萃取液;(3)向萃取液中加入碱性水溶液进行反萃取,得到反萃取液;(4)向反萃取液中加入酸性溶液至析出沉淀,分离出沉淀,得到卵孢菌素粗品;(5)用碱性水溶液溶解粗品,再加入酸性溶液至析出沉淀,分离出沉淀;(6)重复步骤(5)数次,以去除杂质,收集沉淀,用蒸馏水洗涤,干燥后即得卵孢菌素纯品 O
4.根据权利要求3所述的制备卵孢菌素的方法,其特征在于,所述的不与水混溶的有机溶剂为氯仿或乙酸乙酯或其混合物。
5.根据权利要求3所述的制备卵孢菌素的方法,其特征在于,所述的步骤C3)和步骤 (5)的碱性水溶液为lmol/L的氢氧化钠溶液。
6.根据权利要求3所述的制备卵孢菌素的方法,其特征在于,所述的步骤(4)和步骤 (5)的酸性溶液为浓盐酸。
7.根据权利要求3所述的制备卵孢菌素的方法,其特征在于,所述的步骤(1)制备深红虫草(Cordyc印s cardinalis)C033的发酵培养物包括以下步骤挑取深红虫草 (Cordycepscardinalis) C033的菌丝接种于种子培养基中,在、120r/min条件下培养3 天,获得种子液,再将种子液以10%的接种量接种到发酵培养基中,在、120r/min条件下培养7天,获得深红虫草(Cordyc印s cardinalis) C033的发酵培养物,所述的种子培养基和发酵培养基配方相同,其配方按总质量分数100 %计,包含葡萄糖5 %,蛋白胨1 %,KNO3 0. 2%, MgSO4 0. 2%, CaCl2 0. 01%, (NH4)3Ρ04 · 3H20 0.02%,余量为水。
8.权利要求1所述的深红虫草(Cordyc印scardinalis)C033作为生物防治剂的应用。
9.一种生物防治剂,其特征在于,包含权利要求1所述的深红虫草(Cordyc印s cardinal i s) C033作为活性成份。
全文摘要
本发明公开了一种深红虫草及利用其制备卵孢菌素的方法和其用途。深红虫草(Cordyceps cardinalis)C033,于2010年9月29日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),地址中国,武汉,武汉大学,保藏编号为CCTCC NOM 2010256。从该虫草菌的发酵培养物中能制备出卵孢菌素。该制备方法具有培养条件温和、培养基配置简单易行、发酵时间短、提取步骤简单、使用有机溶剂少、产物得率高等优点,能够比较方便解决研究或应用卵孢菌素所需的原料问题。该虫草菌还能够作为生物防治剂的活性成份,为研究和开发新的生物防治剂提供了候选菌种。
文档编号A01G1/04GK102168108SQ201010594470
公开日2011年8月31日 申请日期2010年12月17日 优先权日2010年12月17日
发明者李义勇, 李冬利, 王磊, 章卫民, 陈玉婵 申请人:广东省微生物研究所
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