用于通过在转化过程中诱导bbm提供可育植物的方法

专利名称：用于通过在转化过程中诱导bbm提供可育植物的方法
用于通过在转化过程中诱导BBM提供可育植物的方法本发明涉及一种用于提供成熟的转基因植物的方法，其中所述植物是顽拗植物(recalcitrant plant)。本发明还涉及可通过本发明方法获得的成熟的转基因植物、其植物材料、其后代、其植物部分、其种子或其克隆。本发明还涉及通过本发明方法获得的成熟转基因植物或其植物部分作为共转化系统的用途。转基因是生命科学领域中使用的并且本身可用在多种生物体中以实现多种目的的方法。此技术已经并且正在大量在生命科学研究的许多领域中应用。此技术的一个方面是其可用于鉴别单个核苷酸分子(例如遗传元件和/或基因)或由这类核苷酸分子编码的蛋白的功能。所得到的转基因生物可用于基础或应用研究或者用于工业应用。转基因在是植物科学领域中一种强有力的技术，因为它使得可将目的核苷酸分子 转移到受体植物物种中。这种核苷酸分子可包含蛋白质功能基因的启动子、基因、终止子、抑制子或增强子等。例如，转基因可用于研究将目的蛋白加至受体植物中的效应。在这样的情况下，将编码目的蛋白的基因——其通常是较大核苷酸分子的一部分——引入所述受体植物。为了获得转基因植物，可应用这样的方法，即所述方法包括转化，然后再生，之后使转化的、再生的植物材料发育成为成熟的转基因植物。这种方法只可以成功地适用于特定的植物物种，所述植物物种易于进行所述转化和再生阶段以及随后成为成熟转基因植物的进一步发育。这种植物物种包括例如拟南芥(Ariabidopsis thaliana)或油菜(Brassicanapus)。在转化过程中，目的核苷酸分子被引入植物细胞。在再生过程中，使转化的植物材料从一定程度上未定型的结构(例如愈伤组织)发育为植物器官(例如叶状结构(leaflike-structure)、芽状结构(shoot-like structure)或体细胞胚(somatic embryo)),从而使得可由其得到成熟的转基因植物。所述转化阶段可包括使植物细胞或植物材料与包含Ti (肿瘤诱导)质粒的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefciens)接触,所述质粒含有目的核苷酸分子。所述Ti质粒至少包含由根癌农杆菌转移到宿主植物中的DNA区段，即T-DNA元件。所述T-DNA元件的侧翼是DNA重复序列，即所谓的左边界和右边界。基因工程允许将目的核苷酸分子置于Ti质粒的左右T-DNA边界之间。在所述植物细胞或植物材料与所述根癌农杆菌的接触过程中，至少所述Ti质粒的T-DNA元件一包括目的核苷酸分子一被从根癌农杆菌转移到所述植物细胞中，在这里所述元件被稳定整合到核基因组或细胞器基因组(例如线粒体或叶绿体的基因组)中。其他转化方法也可应用于植物材料。当从宏观角度考虑合适的再生时，再生中的植物细胞或组织可发育成无定形细胞团块(即愈伤组织)，从所述愈伤组织可形成芽状结构或叶状结构。通常，如果需要，在合适的植物激素的影响下，从这样的结构可形成伸长的茎。随后，如果需要，在一种或多种合适的根诱导剂的影响下，这类结构会开始形成根系统以发育成适于支持进一步发育的高级根系统。随后，可将处于合适的高级发育阶段的植物材料从试管内(in-vitro)环境移植到试管外(ex-vitro)环境。随后将所述植物在允许获得成熟转基因植物的合适条件下进行试管外培养，例如在土壤、蛭石、岩棉等中培养。所述再生过程可包括此一般概念的附加或替代步骤。或者，再生可通过形成体细胞胚来进行，所述体细胞胚可长成成熟的植物。这种转化和再生的方法优选地适用于幼小的植物体细胞组织，所培养的细胞(例如原生质体或器官)作为起始材料。这些组织(例如幼小植物组织的外植体或来自幼苗的植物材 料块)包含具有不同分化程度或决定程度的细胞。可能是由于在这些组织中存在具有不同分化水平或程度的异源细胞群，因此这些组织对再生处理的初始阶段特别敏感。仅有一些植物或植物物种被证明对转化和再生方法反应良好。已经可以以较简单的方式应用已知方法来转化和再生这些植物。相反，已证明其他植物或植物物种对这些转化和再生方法无反应。这些植物不以合适的方式再生并且/或者根本不能再生为成熟植物。这些植物、植物变种(variety)或植物栽培种被称为“顽拗”或“再生无能(regeneration incompetent)”。 哪些内在的分子或生理因子起作用或决定植物是否顽拗在很大程度上是未知的。这表明目前需要开发可适用于多种植物物种的可靠的植物特异性转化和再生方法。事实上，仅针对少数物种或物种的栽培种开发出了用于有效提供成熟转基因植物的合适转化和再生方法。当对顽拗植物进行转化和再生方法然后使其发育为成熟转基因植物的处理时，已观察到多种不同的问题并发现这些问题难以克服。这些问题包括无法转化来自受处理的植物细胞或植物材料的植物细胞。或者在可实现转化的情况下，这些转化材料可能不会发育为成熟的转化植物。转化的细胞或植物材料最多可再生至某个发育阶段，就显示出异常行为例如改变或异常的生长、发育的提前终止、严重延缓的发育或不正确的发育。而且，已知会形成假阳性植物。这类未转化的植物材料可逃避选择性试剂的压力并再生为成熟的植物。此外，已知所述方法的适用性、可靠性和适合性方面存在以下问题再现性可能成问题；所述方法的结果不可预知，再生中的芽、根或幼苗的数量可能太低而不适用于工业条件；所述方法仅适用于单一植物物种，或给定植物物种的栽培种的特定类；所述方法可能不适合高通量或常规应用；所述方法的合适适用性可能依赖于特定的细菌菌株。人们清楚的是这些方法不适用于符合成本效益的工业应用。因此，仍然需要可应用于顽拗植物物种的用于提供成熟转基因植物的有效且可靠的方法。因此，本发明的一个目的是提供用于获得成熟的转基因植物的方法，其中所述植物是顽坳植物，并且其中所述方法包括转化阶段和再生阶段。此外，本发明的目的是提供可通过本发明方法获得的转基因植物。上述目的是由所附权利要求中限定的方法提供。具体地，本发明涉及一种用于提供成熟的转基因植物的方法，所述方法包括转化和再生植物细胞或植物材料，其中所述植物细胞或植物材料被包含编码BBM蛋白的核苷酸序列的核苷酸分子转化，其中所述BBM蛋白的活性在所述转化植物细胞或植物材料的转化和/或再生过程中被诱导，并且其中所述植物细胞或植物材料来源自顽坳植物。在获得本发明的研究过程中，发现能够通过在转化和再生过程中诱导BBM而使来自数种顽拗植物(如甜椒和矮牵牛W138)的植物材料再生为成熟的转基因植物，而在这些阶段不诱导BBM时这些植物不发育为成熟的转基因植株。本领域和本文中的顽拗植物是这样的植物，即当对来自这些植物的植物材料进行用于反应良好的植物的适合转化和再生方法时，其根本不会再生和发育为成熟的转基因植物。这种方法的基础是与包含植物激素(优选生长素、细胞分裂素、赤霉酸，以及脱落酸、こ烯或其抑制剂)的培养基接触的经转化植物材料使得可再生所述经转化的植物材料，就像对于反应良好的植物那样。在本文中，顽坳植物是在任何这类条件下均不能发育成为成熟转基因植物的植物。不少 顽坳植物——特别是属于具有重要经济价值的植物物种、作物或变种的顽坳植物——一直是广泛研究的对象，所述研究g在开发使用再生来提供成熟的转基因植株的合适方法。考虑到顽坳植物(例如甜椒)以其不能再生为成熟的转基因植物而著称，连同在尝试使用现有方法转化和再生来自此类植物的植物材料为成熟的转基因植物时遇到的多种不同的问题，本发明的效率令人惊讶。本发明的ー个优点是，明显地，可任选地通过加入ー种或多种生物活性试剂(例如植物激素或模仿植物激素作用的物质)，使来自顽拗植物的植物细胞或植物材料发育为成熟的转基因植物。当使用生物活性试剂时，可将这种生物活性试剂加入培养基，在所述培养基上培养转化的植物材料以使得所述转基因植物材料发育为成熟的转基因植物。将这种生物活性试剂加入其中未诱导BBM活性的植物细胞或植物材料时不能使这种植物细胞或植物材料再生为成熟的转基因植物。本发明的另ー优点包括在所述转化和/或再生过程中控制BBM活性的时间选择的可能性。调节BBM的时间活性可进ー步优化通过本发明从顽拗植物得到的成熟转基因植物的质量或数量。本发明的另ー优点涉及确保转化的植物材料通过繁殖性发育阶段进行适当发育的可能性。通过防止在植物发育繁殖阶段BBM蛋白的不合适表达和/或活性，有关部分或完全不育的问题可被避免或减轻。本文的再生包括转化的植物细胞发育为体细胞胚、叶状结构或芽状结构。在之后的阶段，这些植物组织可进ー步发育为成熟的转基因植物。本发明因此首次使得可通过在转化和再生过程中活化BBM而从来自顽拗植物的植物材料有效地获得成熟的转基因植物。本文的BBM活性是指转化的BBM的表达对转化的宿主植物的基因转录的影响。因为BBM是转录因子，其活性包括影响ー个或多个BBM靶基因的转录。BBM的活化可通过以下方式实现使BBM在诱导后定位于核内，也可诱导其转录或其翻译。可以想到，BBM的活化可通过BBM与调控核苷酸和/或蛋白序列的直接或间接结合而导致对其靶基因的转录的诱导或抑制。不考虑BBM活性的潜在机制，从表达构建体表达的BBM蛋白的诱导活性的后果是进行转化和再生处理的来自顽拗植物的植物材料可发育为成熟的转基因植物。本文“成熟的转基因植物”是指这样的植物，即所述植物已达到发育晚期阶段从而使得所述植物产生至少ー个繁殖器官，优选更多这些器官例如包含种子的果实，其中从这种繁殖器官可获得能存活的后代。本文的术语“成熟的植物”可与术语“可育植物”互換。这种繁殖器官可为有性繁殖器官(例如花)，或无性繁殖器官(例如块茎、匍匐枝、根茎、球茎、鳞芽或鱗茎。特别感兴趣的是可根据本发明获得的成熟的转基因植物，由所述成熟的转基因植物可如本文所述从繁殖器官获得能存活的后代。本文中的花可为单性的，即具有至少ー个雄性繁殖器官(雄蕊)或至少ー个雌性繁殖器官(雌蕊)；本文中的花也可为双性的，即具有至少ー个雄性繁殖器官和至少ー个雌性
繁殖器官。本文中的花优选地为可育的，但也可包含有功能的花粉或有功能的卵细胞。对于可育的花，这样的花具有有功能的花粉和ー个或多个有功能的卵细胞，其随后可产生能存活的后代。具有有功能的花粉和ー个或多个有功能的卵细胞的花可通过自体受精或杂交受精产生ー个或多个种子。对于包含有功能的花粉或有功能的卵细胞的花，这样的花不从自体受精产生种子，但可从杂交受精产生种子。因此，这样的花可为雄性不育的或雌性不育的。然而，雄性不育的花可被来自另ー朵花的有功能的花粉授精。雌性不育花的花粉可用于使另ー朵花受精。这种花的雄性不育性可能是由于细胞质雄性不育(CMS)、孢子体自交不亲和性、配子体自交不亲和性或任何其他不育性体系。上述生物学术语以其本领域公认的含义使用。还应想到以下情况的可能性，即从原代转化的植物材料获得外植体，从所述外植体可获得成熟的转基因植物。从原代转化体的外植体获得的这种成熟转基因植物也落入本发明的成熟转基因植物的含义中，并且作为通过本发明的方法直接获得的产物。本文中的术语“植物细胞”是指从植物或植物材料获得的任何细胞。还指来自液体悬浮液的原生质体或任何细胞等。本文中的术语“植物材料”是指来源自植物的任何结构、组织或器官获得的任何外植体、碎片或插条。本文中的植物材料还可指植物的任意组织或器官。所述植物组织或器官——从其获得所述外植体、碎片或插条——包括子叶、下胚轴、上胚轴、种子、愈伤组织、叶、根、茎、花、花药、花粉、胚珠、卵细胞、果实、分生组织、原基、花序、叶柄、原生质体、库组织(sink tissue)、源组织、幼苗、库器官(sink organ)、源器官、块莖、合子胚、体细胞胚或来源自双倍体或单倍体的胚。在此方面还包括细胞培养物，例如单细胞培养物、悬浮液、产雄培养物、产雌培养物。特别地，术语植物材料是指幼苗产生的组织，例如子叶或其碎片。本文中的术语“转化，，是指将核苷酸分子(例如表达载体或构建体)导入受体植物细胞的方法。这样的转化方法可用于阐明基因或蛋白或另ー遗传元件(例如启动子、增强子、終止子等)的功能。所述核苷酸分子优选地来源于植物或者基于来源于植物的核苷酸序列。所述核苷酸分子还可为合成来源的。所述核苷酸分子可通过使用细菌载体(例如根癌农杆菌)(參见例如Bent, 2000)或适于植物转化的其他细菌(參见例如Broothaerts etal.，2005)被引入所述植物细胞。所述转化方法还可包括粒子轰击、机械注射或适于用于本发明的其他转化技术。这些技术均为本领域技术人员所知并且无需付出创造性劳动即可用于实施本发明。本发明的另一方面涉及来自选自以下的植物的植物细胞或植物材料茄属(Solanum)、矮牵牛属(Petunia)、郁金香属(Tulipa)、百合属(Lilium)、番红花属(Crocus)、鳶尾属(Iris)、唐菖蒲属(Gladiolus)、菠菜属(Spinacia)、舌甘菜属(Beta)、藜属(Chenopodium)、菜豆属(Phaseolus)、豌豆属(Pisum)、辣椒属(Capsicum),特别是来自爺科的植物。本发明更特别地涉及马铃薯(Solanum tuberosun)、矮牵牛(Petuniahybrida)、郁金香属、百合属、番红花属、鳶尾属、唐菖蒲属、菠菜(Spinacea oleracea)、甜菜(Beta vulgaris)、昆诺阿藜(Chenopodium quinoa)、菜豆(Phaseolus vularis)、红花菜豆(Phaseolus coccineus)、豌豆(Pisum sativum)、辣椒(Capsicum annuun)特别是甜椒。、这些植物物种和/或几种植物物种的几种栽培种、变种或种类是以顽拗和难以转化和/或再生为成熟转基因植物而著称。本发明特别涉及顽拗的马铃薯种类或变种，矮牵牛种类或变种如W138，更特别涉及甜椒辣椒(sweet pepper,Capsicum annuum)种类或变种,其中至少甜椒是被本领域技术人员认为和知晓以顽拗而著称的。辣椒的种已根据果实的味道被分成两组，即甜(或淡味)辣椒种类和辣(红辣椒)辣椒种类。甜椒种类的组包括带有无刺激性的、甜味的果实的辣椒植物。这些果实——在更高的果实成熟水平下——在果实中具有低水平的辣椒素(8-甲基-N-香草基-6-壬烯酰胺)。本文·中的甜椒组包含方椒(blocky)、铃型(bell)、太空椒(lamuyo)、红辣椒(paprika)、匈牙利辣椒、新墨西哥辣椒、南瓜辣椒(squash pepper)、西班牙红辣椒、西班牙甘椒(pimiento)、Italian frying、日本甜椒、Vie jo arruga dulce 和古巴变种(Deffitt&Bosland, 1997)。甜椒被认为是ー种高度顽拗的辣椒。当对甜椒植物进行包括转化和再生的方法吋，已报道了观察到以下现象不能从愈伤组织形成叶原基；无法通过再生阶段形成叶状结构；再生组织中无芽；枝芽不能伸长；从枝芽发育为芽状畸胎瘤；顶端分生组织不能伸长；再生芽的顶端优势降低；在选择性压カ下由长成的愈伤组织再生非转基因芽；再生芽的繁殖率下降；不能从转基因芽发育成正常的根系统或者植物组织或器官的生长严重迟缓。而且已知会出现假阳性植物，即不含有所需的赋予抗性的基因的成熟非转基因植物，所述赋予抗性的基因使得植物可在选择性压カ下生长。因此可以说现有技术未教导用于提供成熟的转基因甜椒植物的合适的且有效的或可靠的转化和再生方法。本发明的优点在于提供了一种获得成熟的转基因甜椒植物的方法。应用本发明的方法使得可以提供成熟的转基因甜椒植物，特别是还导致提供来自这些植物的完全发育的甜椒果实和能存活的种子。此外，本发明可用于提供含有外源BBM核苷酸序列的萌发幼苗。对自体受精的成熟转基因植物的分离分析证明所述转基因被下一代的后代所继承。几种成熟转基因植物的后代的孟德尔分离对应于单一基因座的存在。表4示出了所述分离分析的結果。因此，本发明提供成熟的转基因甜椒植物，所述转基因甜椒植物产生包含所述转化的核苷酸序列的能存活的后代。通过本发明方法获得的转基因甜椒种子以保藏号NCMB 41732保藏。本发明的另一方面涉及BBM蛋白或其功能性同源物(homolog),其特征在于与SEQID No 1有至少50%、60%、70%、优选80%、更优选90%、甚至更优选至少95%、最优选至少98%的同一性，或者其中所述BBM蛋白是SEQ ID No:l。蛋白是否是BBM同源物可通过以下方式来确定与SEQ ID No:l的BBM蛋白相比，评估目的蛋白是否导致与BBM靶基因的启动子连接的报告基因发生类似的表达。所述靶基因包含例如肌动蛋白解聚因子9 (ADF9;GenelD829649，TAIR :AT4G34970)。或者，候选基因可使用编码所述候选BBM蛋白的表达载体来被转化到甜椒植物中，所述表达载体提供所述BBM候选蛋白的可诱导核转录活性。根据本发明，当转化到甜椒植物的植物细胞中后，所述受试植物材料会发育为ー个或多个成熟的转基因植物。确定基因或蛋白是否是本发明的BBM功能性同源物完全在技术人员的能力范围之内。在初始研究中，技术人员可查阅由例如NCBI (http://www. ncbi. nlm. nih. gov/)的研究所或任何其他这样的研究所提供的现代电子分子生物技木工具和数据。这样的工具和数据库向技术人员提供手段以快速评估是否存在任何迹象表明任何未知的基因或蛋白是否可为BBM的功能性同源物。这种迹象可包括在相关进化枝或相同进化枝的进化保守性和分类方面与BBM有关的未知序列的信息；所述未知序列是否属于BBM相关的基因或蛋白类，例如包含ANT、PLTU PLT2的AP2家族；特定结构域(例如AP2结构域)的共享；这些共享的结构域(例如单一或重复的AP2结构域)的数量；基因或蛋白的命名，例如称为BBM样的序列。因此，仅有限数量的基因或蛋白在研究的第二阶段需要被转化到顽拗植物(特别是甜椒)中以证实目的序列是否是BBM的功能性同源物。因此，根据此方法，现代生物技术领域的技术人员会能够不付出过度劳动即确定基因或蛋白是否为BBM的功能性同源物。本文中的术语“序列同一性 ”被定义为在SEQ ID No: I的全长BBM蛋白上相同氨基酸的数量除以全长的氨基酸数量再乘以100。例如，与SEQ ID No: I具有90%同一性的序列包含在SEQ ID No: I的579个氨基酸的全序列上521个相同的氨基酸，作为实例如下计算:521/57肿100=90%。BBM对于多种不同的物种是保守的，例如欧洲油菜(Brassica napus)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、襄藜苜宿(Medicago trunculata)、大豆(Glycine max)、玉米(Zea mays)。如在本申请中公开的，可使用十字花科(Crucifers或Brassicaceae)分类群的植物的BBM基因，通过包括转化和再生的方法来获得不同并远缘的茄科的成熟转基因植物。进化保守的水平似乎使这些蛋白适于对不同顽拗植物物种——包括茄科，或者甚至从单子叶植物到双子叶植物——应用所述方法。
权利要求
1.用于提供可育转基因植物的方法，所述方法包括 a)用编码babyboom蛋白(BBM)的表达载体转化植物细胞,其中所述表达载体提供所述babyboom蛋白(BBM)的可诱导核转录活性； b)在引起所述babyboom蛋白(BBM)的核转录活性的诱导条件下使所述转化的植物细胞再生为体细胞胚、芽状结构(SLS)和/或叶状结构(LLS)； c)在导致所述babyboom蛋白(BBM)的核转录活性基本缺失的非诱导条件下将所述体细胞胚、芽状结构(SLS)和/或叶状结构(LLS)培养为可育的转基因的植物。
2.权利要求I的方法，其中所述植物细胞是选自以下的植物细胞茄属(Solanum)、甜菜属(Beta)、郁金香属(Tulipa)、百合属(Lilium)、番红花属(Crocus)、鳶尾属(Iris)、唐菖蒲属(Gladiolus)、菠菜属(Spinacia)、藜属(Chenopodium)、菜豆属(Phaseolus)、豌豆属(Pisum),优选爺科,更优选是矮牵牛属(Petunia)和辣椒属(Capsicum)。
3.权利要求I或2的方法,其中所述植物细胞是甜椒辣椒(Capsicumannuum)或碧冬爺(Petunia hbrida)的植物细胞。
4.权利要求1-3中任一项的方法,其中在所述babyboom蛋白(BBM)具有转录活性的情况下，所述babyboom蛋白(BBM)与SEQ ID NO: I在氨基酸水平上有至少50%、至少60%、至少70%、优选至少80%，更优选至少90%，甚至更优选至少95%，最优选至少99%的序列同一性。
5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述可诱导的核转录活性是由转录调控元件、核靶向序列或翻译调控元件提供。
6.权利要求5的方法，其中所述核靶向序列由SEQID N0:2的核苷酸序列编码。
7.权利要求6的方法，其中所述诱导条件由地塞米松提供。
8.权利要求1-7中任一项的方法，其中所述表达载体还编码一种或多种选择性标记、一种或多种目的蛋白和/或一种或多种目的转录产物。
9.权利要求1-8中任一项的方法，其中所述方法还包括 d)从所述可育转基因植物获得植物细胞； e)用编码一种或多种目的蛋白或转录产物的表达载体转化所述植物细胞； f)在引起所述babyboom蛋白(BBM)的核转录活性的诱导条件下使所述转化的植物细胞再生为体细胞胚、芽状结构(SLS)和/或叶状结构； g)在导致所述babyboom蛋白(BBM)的核转录活性缺失的非诱导条件下将所述体细胞胚、芽状结构(SLS)和/或叶状结构(LLS)培养为可育转基因的植物。
h)任选地将步骤(d)-(g)重复一次或多次。
10.包含一种或多种权利要求1-9、优选权利要求1-8中任一项所定义的表达载体的可育转基因植物。
11.权利要求10的可育转基因植物，其中所述植物选自茄属、甜菜属、矮牵牛属、郁金香属、百合属、番红花属、鸢尾属、唐菖蒲属、菠菜属、藜属、菜豆属、豌豆属和辣椒属，优选茄科，或例如以保藏号NCMB41732保藏的植物。
12.权利要求10或11的可育植物，其中所述植物是辣椒植物，优选甜椒辣椒植物。
13.权利要求10-12中任一项的可育植物的种子或果实，其包含一种或多种权利要求1-9、优选权利要求1-8中任一项所定义的表达载体。
14.权利要求1-9、优选权利要求1-8中任一项所定义的babyboom蛋白用于产生可育转基因植物的用途，所述可育转基因植物优选地选自茄属、甜菜属、矮牵牛属、郁金香属、百合属、番红花属、鸢尾属、唐菖蒲属、菠菜属、藜属、菜豆属、豌豆属和辣椒属，更优选地选自茄科，甚至更优选地所述植物是辣椒植物，最优选地所述植物是甜椒辣椒植物。
15.—种或多种权利要求1-9、优选权利要求1-8中任一项所定义的表达载体用于产生可育转基因植物的用途，所述可育转基因植物优选地选自茄属、甜菜属、矮牵牛属、郁金香属、百合属、番红花属、鸢尾属、唐菖蒲属、菠菜属、藜属、菜豆属、豌豆属和辣椒属，更优选地选自茄科，甚至更优选地所述植物是辣椒植物，最优选地所述植物是甜椒辣椒植物。
全文摘要
本发明涉及一种用于提供转基因植物的方法，包括用包含编码BBM蛋白的核苷酸序列的核苷酸序列转化植物细胞或植物材料，其中所述BBM的活性是在所述转化的植物细胞或植物材料的转化和/或再生过程中被诱导，并且其中所述植物细胞或植物材料来源于顽拗植物。此外，本发明还涉及包含BBM蛋白的转基因植物或其材料，其中所述转基因植物是顽拗植物。
文档编号A01H4/00GK102725414SQ201080040478
公开日2012年10月10日 申请日期2010年7月5日 优先权日2009年7月10日
发明者B·J·M·德兰格, I·A·海德曼, K·A·鲍特里尔 申请人:基础服务农业研究院, 安莎种子集团公司