技术简介：
本发明针对蓝莓繁殖系数低、成活率不高的问题，提出了一种利用嫩茎段进行组织培养的方法。该方法包括选取未木质化的嫩茎，在无菌环境下处理后切割为带芽茎段，并采用特定培养基依次进行诱导生芽及丛生芽的继代增殖，提高了繁殖效率和苗木质量。
关键词：蓝莓繁殖,组培技术,快速繁育
专利名称：蓝莓嫩茎段组培快繁工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及蓝莓组织培养技术领域，特别是ー种蓝莓嫩茎段组培快繁エ艺。
背景技术：
蓝莓属于杜鹊花科越橘属灌木，为ー种小浆果果树，其果实具有很高的营养价值和经济价值。目前市场对蓝莓的需求量不断增长，但是我国蓝莓的种植业刚刚起步，各地在建立种植园时急需大量优良品种苗木。采用常规的硬枝、绿枝扦插成活率低，周期长，速度慢，且易带病毒，无法满足市场对蓝莓苗木数量日益增长的需要。
发明内容本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供ー种繁殖率高、繁殖速度快的蓝莓 嫩茎段组培快繁エ艺。本发明的目的通过以下技术方案来实现蓝莓嫩茎段组培快繁エ艺，它包括以下步骤
51、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50 60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20 30min，然后用75%酒精消毒20 30s，无菌水冲洗3 5次，之后在超净工作台上,放入O. 1%氯化汞消毒液中8 lOmin，用无菌水冲洗2 3次；然后在超净エ作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；
52、诱导培养在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3. Omg/L+IBA O. lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6. 5g/L，调节其pH为 5. 25. 8 ;
53、继代培养待嫩茎上长出Icm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代増殖培养基上进行丛生芽诱导并继代増殖，每40 50天为ー个继代培养周期，继代増殖培养基是指MS+ZT O. 5I. 5mg/L+IBA0. 05O. lmg/L+ 蔗糖 30g/L+ 琼脂 6. 5g/L,调节其 pH 为 5. 25. 8 ;在蓝莓出瓶移栽之前2 3个继代培养周期中，采用MS+ZT O. 3 O. 7mg/L培养基进行苗木复壮。本发明具有以下优点
I、本发明繁殖率高、繁殖速度快，生产组培苗成本低廉，得到的组培苗遗传状一致，克服了常规繁殖系数低的缺点。2、组培微繁生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，为后期树体生长结果奠定良好的基础。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进ー步的描述，但本发明不限于如下所述。实施例I :
蓝莓嫩茎段组培快繁エ艺，它包括以下步骤51、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20min，然后用75%酒精消毒30s，无菌水冲洗5次，之后在超净工作台上，放入O. 1%氯化汞消毒液中8min，用无菌水冲洗3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；
52、诱导培养在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3. Omg/L+IBA O. lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6. 5g/L，调节其pH为 5. 4 ;
53、继代培养待嫩茎上长出Icm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代増殖培养基上进行丛生芽诱导并继代増殖，每40天为ー个继代培养周期，继代増殖培养基是指MS+ZT1. 5mg/L+IBA0. lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂6. 5g/L，调节其pH为5. 4 ;在蓝莓出瓶移栽之前2个继代培养周期中，采用MS+ZT O. 7mg/L, pH为5. 4的培养基进行苗木复壮。
实施例2
蓝莓嫩茎段组培快繁エ艺，它包括以下步骤
51、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗30min，然后用75%酒精消毒20s，无菌水冲洗3次，之后在超净工作台上，放入O. 1%氯化汞消毒液中lOmin，用无菌水冲洗2次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；
52、诱导培养在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3. Omg/L+IBA O. lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6. 5g/L，调节其pH为 5.2 ;
53、继代培养待嫩茎上长出Icm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代増殖培养基上进行丛生芽诱导并继代増殖，每50天为ー个继代培养周期，继代増殖培养基是指MS+ZTO. 5mg/L+IBA0. 05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6. 5g/L，调节其pH为5. 2 ;在蓝莓出瓶移栽之前3个继代培养周期中，采用MS+ZT O. 3mg/L, pH为5. 2的培养基进行苗木复壮。实施例3
蓝莓嫩茎段组培快繁エ艺，它包括以下步骤
51、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗55min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗25min，然后用75%酒精消毒25s，无菌水冲洗4次，之后在超净工作台上，放入O. 1%氯化汞消毒液中9min，用无菌水冲洗3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；
52、诱导培养在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3. Omg/L+IBA O. lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6. 5g/L，调节其pH为 5.8 ;
53、继代培养待嫩茎上长出Icm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代増殖培养基上进行丛生芽诱导并继代増殖，每45天为ー个继代培养周期，继代増殖培养基是指MS+ZTO. 5 I. 5mg/L+IBA0. 08mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6. 5g/L，调节其pH为5. 8 ;在蓝莓出瓶移栽之前2 3个继代培养周期中，采用MS+ZT O. 3 O. 7mg/L，pH为5. 8的培养基进行苗木复壮。
权利要求1.蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，其特征在于它包括以下步骤S1、从田间选取未木质化的嫩茎，清水冲洗50 60min后，在无菌工作台上，用添加洗洁精的水清洗20 30min，然后用75%酒精消毒20 30s，无菌水冲洗3 5次，之后在超净工作台上,放入O. 1%氯化汞消毒液中8 lOmin，用无菌水冲洗2 3次；然后在超净工作台上将嫩茎切成带芽茎段，去掉部分枝叶；S2、诱导培养在超净工作台上，将剪好的带芽茎段接种于诱导培养基上进行生芽培养，诱导培养基是指MS+ZT 3. Omg/L+IBA O. lmg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6. 5g/L，调节其pH为 5· 25· 8 ;S3、继代培养待嫩茎上长出Icm长的新芽后，将新芽切下，接种于继代增殖培养基上进行丛生芽诱导并继代增殖，每40 50天为一个继代培养周期，继代增殖培养基是指MS+ZT O. 5I. 5mg/L+IBA0. 05O. lmg/L+ 蔗糖 30g/L+ 琼脂 6. 5g/L,调节其 pH 为 5. 2.5.8 ;在蓝莓出瓶移栽之前2 3个继代培养周期中，采用MS+ZT O. 3 O. 7mg/L培养基进行苗木复壮。
全文摘要本发明公开了蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，它包括以下步骤S1、从田间选取未木质化的嫩茎，洗净消毒，切成带芽茎段；S2、诱导培养，采用的诱导培养基为MS+ZT3.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L；S3、继代培养，采用的继代增殖培养基为MS+ZT0.5～1.5mg/L+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L；在蓝莓出瓶移栽之前采用MS+ZT0.3～0.7mg/L培养基进行苗木复壮。本发明的有益效果是繁殖率高、繁殖速度快，生产组培苗成本低廉；生产的苗木质量好，均匀一致，容易脱去病毒，根系发达，为后期树体生长结果奠定良好的基础。
文档编号A01H4/00GK102812905SQ201210340299
公开日2012年12月12日 申请日期2012年9月14日 优先权日2012年9月14日
发明者陈川菊 申请人:四川立益生态农业开发有限公司