专利名称：一种抗菌促生长剂糖萜素的提取方法
技术领域：
本发明涉及饲料添加剂生产技术领域，更具体地涉及一种糖萜素的提取方法。
背景技术：
美国食品与药物管理局(FDA)在1950年首次批准抗生素用作饲料添加剂，此后，世界各国相继进行抗生素的饲喂试验，并用于畜牧生产。抗生素作为饲料中添加剂，大大提高了饲料的转化率，促进了饲养动物的生产性能。然而随着抗生素的长期大量使用，给养殖业发展带来前所未有的推动，但也会造成负面效应，如病原微生物的抗药性、动物消化道菌群失调、自身免疫力降低，而且抗生素在畜产品中残留，直接危害人类健康等。在欧盟、日本发达国家相继颁布了禁止和限制使用抗生素添加剂在饲料中的应用。因此，动物性食品安全问题日益成为各国政府与民众关注的焦点之一。寻找天然替代饲用抗生素作为饲料添加齐U，是饲料工业研究领域中一个长期的努力方向。近年来，国内外的抗生素替代产品主要有酶制剂、中草药、益生素、寡糖、甜菜碱和抗菌肽等。而糖職素(Saccharicterpenin)作为一种新的绿色饲料添加剂,糖職素是纯天然的植物提取物，是由糖类O 30%)，三萜皂甙O 30%)和有机酸组成的纯天然生物活性添加剂，是从山茶属植物种子饼柏中提取的三萜皂甙类与糖类的混合物，是一种棕黄色、无灰微细状结晶。它不溶于乙醚、氯仿、丙酮、苯、石油醚等溶剂，可溶于温水、二硫化碳、醋酸乙酯，易溶于含水甲醇、含水乙醇、正丁醇以及冰醋酸。糖萜素可以替代饲用抗生素药物，且无残留，无污染，是全国唯一 AA级纯天然绿色添加剂，具有良好的市场前景，正受到越来越广泛的关注。目前已列入农业部1126号公告《饲料添加剂品种目录》。糖萜素的作用机制明显有别于抗生素。抗生素主要是抑制动物小肠、盲肠等消化器官内的有害微生物，从而有利于养分的渗透和吸收，增进动物的食欲，增加采食量，促进机体生长发育。而糖萜素是通过提高动物的整体免疫性能和内分泌系统功能，提高动物的健康水平，从而改善动物的生产性能。糖萜素作为饲料添加剂具有明显的调节动物机体神经内分泌免疫网络、提高机体免疫功能、消除自由基、促进蛋白质合成和提高消化酶活性的作用，能明显调节cAMP/ cGMP系统，并具有一定的抗应激和抗氧化作用。糖萜素还能明显提高畜禽和水产动物的成活率、生长性能和产品质量，在养殖业中能够替代抗生素饲料添加剂，是一种新型、安全和无公害的绿色饲料添加剂，对生产安全优质的动物食品和保护人类健康具有重要的意义。但是，糖萜素的系统化生产亟待进一步完善。一是要提供大量廉价的油茶柏饼作为提取糖萜素的原材料。二是要开发一套高效的深加工油茶柏饼的工艺技术。随着油茶产业的深入发展，提取糖萜素要提供大量廉价的油茶柏饼作原材料问题将很快得到解决，而如何合理开发利用油茶柏饼，是油茶的产业链将面临和亟待解决的一个难题。目前，糖萜素有两种制备方法一是用纯净的茶皂素水解(酸解或酶解均可)得到一种五环三萜化合物和一种寡糖，二者的混合物就是“糖萜素”，其缺点是首先需要提取茶皂素；二是先用酸或者适当的酶水解茶枯饼，再从水解液中提取三萜化合物和寡糖，按一定的比例混合即为“糖萜素”，其缺点是提取收率较低。中国专利CN101756023A公布了一种新型饲料添加剂糖萜素的提取方法，取油茶科植物的种子，干燥后去皮粉碎，用乙醇为溶剂，微波加热提取三次。合并提取液，将其减压浓缩，用正丁醇萃取，萃取液经减压浓缩干燥，得到提取物粉末。其缺点是利用油茶的种子直接提取，浪费了其中的油茶油。但是其采用萃取工艺，操作复杂，且在其说明书中明确记载，收率只有15%左右。中国专利CN101695336A公布了茶籽壳生物活性提取物应用及制备方法，提供了茶籽壳生物活性提取物的应用及制备方法，涉及农业废弃物资源综合利用技术领域。该提取物是从油茶果和茶叶果的外壳中提取的包含糖萜素及茶多酚等的生物活性物质。其缺点是利用有机溶剂提取，有机溶剂容易残留。超声波提取本身有两个含义超声技术的应用和物质中所含成分的提取。即就是利用超声波所产生的的空化等特殊作用，来用于物质化学成分提取工艺中，将所含成分以 快速高效地提取出来的一项新的提取技术。在现有技术中也有对其他植物比如人参、红景天等，采用热水超声提取工艺提取多糖和三萜皂苷，但是其提取的目的在于提取单项组分且提取率也不足15%，且采用的原料昂贵。油茶种籽饼柏是山茶科种子榨油的残渣，目前的现状是大部分饼柏被当作燃料烧掉，或廉价出口到日本、东南亚等国家和地区，这种局面应该得到改观。
发明内容
本发明提供一种高效的提取糖萜素的技术。为获得上述效果，本发明提供一种抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，包含以下步骤，
51.取油茶柏饼，粉碎；
52.加水，加热，超声波提取，得提取液，
53.浓缩提取液，得浓缩液，
54.干燥浓缩液，即得。所述的步骤S2中的加热至6(T80°C，优选为75°C。所优选的温度能更好的彻底的溶解糖萜素，且不会分解糖萜素。所述的步骤S2中的超声波的功率为400W 6000W，时间为5 15分钟，优选为在4500W下，超声10分钟。所述的步骤S2中的提取的次数为2飞次，优选3次，3次提取能提取97%以上的糖帖素，效率最闻；提取的时间为I 4小时,优选2个小时,2个小时基本上能将所有的糖帖素提取完成，且不会因为时间的延长，导致糖萜素分解。所述的步骤SI中粉碎成3(Γ40目。所述的步骤S3中的浓缩为减压浓缩，所述的减压为减至-O. 080MPa -O. 099MPa，优选-O. 095MPa,最为高效节能的减压压力。所述的步骤S4中的干燥为流化喷雾干燥法。所述的硫化喷雾干燥法采用流化喷雾干燥机(型号为ZDG3X0. 3)实现。流化喷雾干燥法能大大的提高生产效率，节省生产周期，从而降低成本，节省能源。
超声波提取中药材的优越性，是基于超声波的特殊物理性质。主要是主要通过压电换能器产生的快速机械振动波来减少目标萃取物与样品基体之间的作用力从而实现固一液萃取分离。I)加速介质质点运动。高于20 KHz声波频率的超声波的连续介质(例如水)中传播时，根据惠更斯波动原理，在其传播的波阵面上将引起介质质点(包括药材重要有效成分的质点)的运动，使介质质点运动获得巨大的加速度和动能。质点的加速度经计算一般可达重力加速度的二千倍以上。由于介质质点将超声波能量作用于药材中药效成分质点上而使之获得巨大的加速度和动能，迅速逸出药材基体而游离于水中。2)空化作用。超声波在液体介质中传播产生特殊的“空化效应”，“空化效应”不断产生无数内部压力达到上千个大气压的微气穴并不断“爆破”产生微观上的强大冲击波作用在中药材上，使其中药材成分物质被“轰击”逸出，并使得药材基体被不断剥蚀，其中不属 于植物结构的药效成分不断被分离出来。加速植物有效成份的浸出提取。3)超声波的振动勻化(Sonication)使样品介质内各点受到的作用一致,使整个样品萃取更均匀。
综上所述，中药材中的药效物质在超声波场作用下不但作为介质质点获得自身的巨大加速度和动能，而且通过“空化效应”获得强大的外力冲击，所以能高效率并充分分离出来。为了能更好的解释本发明，但是不能理解为对本发明的限制，综合的提取方法如下
51.称取一定量的油茶柏饼，粉碎，用30-40目过筛；
52.加入一定比例的水，加热温度60-80°C，然后用超声波辅助提取，提取三次。S3.提取完毕后合并提取液，将其纳滤浓缩成悬浮液，悬浮液进一步经减压浓缩； S4.最后浓缩液再通过流化喷雾干燥法制得产品，称重。本发明具有一下优点1.本发明将废弃的油茶种籽饼柏开发成新型纯天然绿色添加剂，解决了目前禽畜使用抗生素带来的危害，有益于人类健康。2.本发明采用一种新型的提取工艺方法，通过热水超声提取技术与膜分离纯化技术相结合，然后低温真空浓缩，最后浓缩液再通过流化喷雾干燥法制得产品。该工艺操作简单，是一种清洁的生产工艺，收率高达50%以上、产品质量好，明显优于现有的提取技术。3.提高了糖萜素的提取率，从原来的15%提高到超过50%，而且给出了一种廉价的糖萜素提取原料，即在油茶种子榨油后的残渣中高效的提取糖萜素，这样进一步的提升了油茶种植的综合效益。4.本发明提供的在油茶柏饼中高效提取糖萜素的方法，比背景技术中所记载的提取糖萜素的方法的提取率都要高很多，且其中的多糖和三萜含量均高于平均水平。
具体实施例方式实施例1
51.取油茶柏饼100g，粉碎，过30目；
52.加蒸馏水1L，加热至60°C，在功率为400W的超声波下，提取5分钟，去上清提取液，将残渣再反复提取两次。
S3.合并上清提取液，在O. 5PA的条件下浓缩提取，
S4.将步骤S3得到的浓缩液通过流化喷雾干燥法干燥，即得。称量所得产品，得56. 2g糖職素。实施例2
51.取油茶柏饼100g，粉碎，过40目；
52.加蒸馏水1L，加热至75°C，在功率为300W的超声波下，提取10分钟，去上清提取液，将残渣再反复提取两次。S3.合并上清提取液，在O. 25PA的条件下浓缩提取，
S4.将步骤S3得到的浓缩液通过流化喷雾干燥法干燥，即得。称量所得产品，得58. Og糖職素。实施例3
51.取油茶柏饼100g，粉碎，过30目；
52.加蒸馏水1L，加热至80°C，在功率为500W的超声波下，提取10分钟，去上清提取液，将残渣再反复提取两次。S3.合并上清提取液，在O. 5PA的条件下浓缩提取，
S4.将步骤S3得到的浓缩液通过流化喷雾干燥法干燥，即得。称量所得产品，得58. 6g糖職素。实施例4 测定糖萜素中的多糖含量测定 以葡萄糖为标准品，采用苯酚-硫酸比色法测定。首先进行标准曲线的确定正确称取IOOmg的葡萄糖标准品，用水定容至100ml，则葡萄糖标准液浓度为1. Omg/mL。吸取葡萄糖标准液10mL，用水稀释10倍，葡萄糖终浓度为0. lmg/mL。精密吸取葡萄糖标准应用液0. 10,0. 20,0. 40,0. 60,0. 80、1. OOmL(分别相当于葡萄糖 0. 01,0. 02,0. 04,0. 06,0. 08,0.1Omg)补水至 2. OmL，加入苯酚溶液(50g/L)1. OmL,浓硫酸溶液10mL，混匀，沸水浴2min，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白为参t匕，测定吸光值，以葡萄糖浓度为横坐标、吸光值为纵坐标绘制标准曲线。由标准曲线获得回归方程式为y=8. 9221x-0. 0035，y为吸光值，x为葡萄糖浓度，mg/mL。 测定实施例1至3获得的糖萜素中的多糖含量，分别称取IOOmg实施例1至3获得的糖職素加入80mg蒸懼水中，加入苯酹溶液(50g/L)l. OmL,浓硫酸IOmL,再定容至IOOmL,的糖萜素含量为lmg/mL的溶液，沸水浴2分钟，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白为参比，测定吸光值，再代入回归方程式中计算得多糖浓度，测定结果如表I所示。表I实施例1至3获得的糖萜素中多糖的含量测定结果
权利要求
1.一种抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，包含以下步骤， 51.取油茶柏饼，粉碎； 52.加水，加热，超声波提取，得提取液， 53.浓缩提取液，得浓缩液， 54.干燥浓缩液，即得。
2.根据权利要求1所述的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，所述的步骤S2中的加热至6(T80°C。
3.根据权利要求1所述的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，所述的步骤S2中的超声波的功率为400W飞000W，时间为5 15分钟。
4.根据权利要求1所述的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，所述的步骤S2中的提取的次数为2飞次，提取的时间为Γ4小时。
5.根据权利要求1所述的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，所述的步骤SI中粉碎成30 40目。
6.根据权利要求1所述的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，所述的步骤S3中的浓缩为减压浓缩，所述的减压为减至-O. 080MPa -O. 099MPa。
7.根据权利要求1所述的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，其特征在于，所述的步骤S4中的干燥为流化喷雾干燥法。
全文摘要
本发明提供一种高效的抗菌促生长剂糖萜素的提取方法，具体采用热水超声提取和流化喷雾干燥结合的的方法，在油茶粕饼中提取糖萜素。本发明方法简单易行，效率高效，且使用的原料易得，不但提高了现有技术在提取糖萜素方面的效率，而且扩大了糖萜素的原料，提高了油茶作为经济农作物的经济效益。
文档编号A23K1/14GK103005162SQ201210582118
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月28日 优先权日2012年12月28日
发明者杨亚勇, 陈益钦, 蒋顺进, 方文棋, 黄炜乾, 刘宗新, 陈景勇, 曾玉勤 申请人:清远容大生物工程有限公司, 杨亚勇