用于预防感染、降低感染的严重性、及治疗感染的胸腺素α肽的制作方法

用于预防感染、降低感染的严重性、及治疗感染的胸腺素α肽的制作方法
【专利摘要】本发明提供了用于预防感染、治疗感染或降低感染的严重性的方法，所述感染包括细菌性、病毒性和真菌性感染，且包括病因学更为复杂的感染。本发明涉及施用α胸腺素肽方案，使得引发或增强患者针对病原体暴露的免疫应答。在某些实施方案中，就潜在的或预期的病原体暴露而言对α胸腺素方案安排日程表或时机。如本文中描述的α胸腺素肽方案给患者提供更为强力的针对病原体暴露的免疫应答，包括更高的抗体滴度和/或更快的抗体应答。在某些实施方案中，患者是免疫缺陷的或免疫受损的，和/或患者是住院的或安排住院的，从而α胸腺素肽方案帮助保护患者免于医源性感染或疾病，或降低医源性感染或疾病的严重性。
【专利说明】用于预防感染、降低感染的严重性、及治疗感染的胸腺素
a肽
[0001]优先权
[0002]本申请要求2011年2月9日提交的美国临时申请N0.61/441，250的优先权和权益，在此通过提及将其完整收录。
发明领域
[0003]本发明涉及感染领域，包括感染的预防、感染严重性的降低、或感染的治疗，且包括用于免疫受损的患者(诸如年老的和患慢性病的)，所述感染包括急性和医院获得性感染。
[0004]发明背景
[0005]医院获得性感染(诸如肺炎和败血病)造成相当大的患者死亡率和发病率，并且显著增加健康护理的总体成本[Michael Klompas, Prevention of ventilator-associated pneumonia.Expert Rev.Anti Infect.Ther.8(7):791-800(2010);Wheeler DS et al.，Novel PharmacoloRic Approaches to the ManaRement of Sepsis:TarRetinR the Host Inflammatory Responses, Recent Pat.1nflamm.Allergy Drug Discov.3⑵:96-112 (2009)]。实际上，在2004年报告败血病是死亡的第10位原因 [Wheeler et al.(2009)]。医院获得性感染由于药物抗性微生物日益增加的流行而进一步恶化，这对常规的抗生素武器库不断施加压力。因此，预防和/或治疗感染(包括医院获得性感染)是一项现行的需要。
[0006]强烈且快速的针对病原体的免疫应答对于预防许多急性感染和疾病(包括急性病毒性、细菌性、和真菌性感染)或者降低其严重性是重要的。例如，针对呼吸道合胞病毒 (RSV)表面蛋白的体液应答在预防RSV感染(其经常是医院获得性的)以及感染消退中起较大的作用[Olson and Varga，Pulmonary immunity and immunopatholoRY: lessons from respiratory syncytial virus.Expert Rev.Vaccines7 (8): 1239-1255 (2008)]。实际上， 诱导快速且强烈的针对病原体攻击的抗体应答是大多数疫苗接种的主要目标。然而，针对所有潜在病原体(尤其是那些可以表现为医源性感染诸如肺炎或败血病的病原体)，并且尤其对于免疫受损患者给个体接种疫苗是不可能或不划算的。
[0007]非常需要以方便且划算的方式加强针对病原体的初始免疫应答的手段以降低感染(包括医源性感染)的影响，以及降低与此类感染有关的比率、死亡率、和发病率。
[0008]发明概述
[0009]本发明提供了用于预防感染、治疗感染、或降低感染的严重性的方法，所述感染包括细菌性、病毒性、和真菌性感染，并且包括病因学更为复杂或未知的感染。本发明牵涉施用a胸腺素肽方案，使得引发或增强患者针对病原体暴露的免疫应答。
[0010]在某些实施方案中，a胸腺素方案是有效方案，其牵涉药剂的相对少数几次施用， 和/或在时间上隔开以使治疗剂和成本效率最大化，和/或就潜在的病原体暴露而言安排日程表或时机。如本文中描述的a胸腺素肽方案给患者提供较强力的针对病原体暴露的免疫应答，包括较高的抗体滴度和/或较快的抗体应答，而且在少到一次或两次施用a胸腺素的情况中提供此类优点长至约50天。在某些实施方案中，患者是免疫缺陷的或免疫受损的，和/或患者是住院的或安排住院的，从而a胸腺素肽方案在住院期期间帮助保护患者免于医源性感染或疾病，或降低医源性感染或疾病的严重性。
[0011]更具体地，在一个方面，本发明提供了用于预防感染或降低感染的严重性的方法， 所述感染可以源自预期的病原体暴露或机会性环境。所述方法包括对患者施用胸腺素a 肽(例如胸腺素a I或“TA1”)的有效方案。一般地，在启动a胸腺素方案时，患者尚未诊断为感染，或者没有显示感染的体征或症状。在某些实施方案中，在启动a胸腺素方案时， 患者是医院或健康护理机构收治的，和/或安排进行手术或侵入性医学规程的，或者需要侵入性医学装置(例如通气机)的。在这类实施方案中，本发明针对微生物暴露的此不可避免的增加和/或引入对于某些病原体机会性环境增强免疫应答，由此预防所致感染或降低所致感染的严重性。
[0012]在另一个方面，本发明提供了通过施用a胸腺素方案治疗感染的方法。在此方面，患者已经诊断为具有感染，诸如急性呼吸系统感染、系统性感染、泌尿系统感染、或皮肤或粘膜表面的局部感染。感染可以是细菌性、病毒性、真菌性、或混合的或病因学未知的。感染可以是医院获得性的，并且可以表现为败血病(S印sis)、肺炎(pneumonia)、尿路感染(urinary tract infection)、心内膜炎(endocarditis)、骨髓炎(osteomyelitis)、 或其它状况。在一些实施方案中，感染牵涉药物抗性微生物，诸如金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、假单胞菌(Pseudomonas sp.)、大肠杆菌(E.coli)、克雷伯氏菌 (Klebsiella sp.)、和/或艰难梭菌(Clostridium difficile)。可以与护理标准(诸如抗生素或抗病毒疗法)并行施用a胸腺素方案。依照本发明的此方面，a胸腺素方案缩短感染的持续时间，和/或缩短需要的抗细菌、抗病毒、或抗真菌治疗的持续时间。在某些实施方案中，在感染明显消退后给予、或继续、或重复所述方案，以帮助防止完成抗生素或抗病毒疗法后的复发。
[0013]不论预防还是治疗感染，以足以增强针对病原体暴露的免疫应答的方案对患者施用胸腺素肽(例如TA1)。例如，以就预测导致病原体暴露的事件而言的剂量、频率和/或时机对人患者施用胸腺素肽的有效方案，从而保护或治疗患者。有效方案足以在少到一次或两次施用a胸腺素的情况中治疗或保护患者长至50天。在一些实施方案中，a胸腺素的剂量是至少约0.5mg (例如1.6mg),或至少约3mg (例如3.2mg),或至少约5mg (例如6.4mg)。 在某些实施方案中，以约2至约Smg的范围内的剂量施用胸腺素肽(例如TA1)。一般地，1 至4次(诸如一次或两次)施用胸腺素肽。在提供多次a胸腺素施用的情况中，可以在例如一周、10天、两周、或I个月的过程里隔开施用。在一些实施方案中，至少两次连续a胸腺素施用以范围为约5天至约10天的时段隔开，例如，对于TAl的大致每周一次施用，相隔约 7天。
[0014]在某些实施方案中，可以在医院收治或侵入性医学规程，和/或引入侵入性医学装置前I至10天(例如前5至8天)，并且在此类事件当天再次，且任选地在事件后施用胸腺素肽方案，由此以预防任何源自预期病原体暴露的感染或降低该感染的严重性。可以在增加的病原体暴露(例如医院收治或侵入性医学规程)的时间前约7天，并且在此类预期暴露当天再次施用胸腺素肽。[0015]在又一些方面，本发明提供了用于降低医院获得性感染的比率或发生率的方法， 其通过对有风险的患者提供如本文中描述的a胸腺素方案进行。在此类实施方案中，在医院或健康护理机构收治后对有风险的患者启动a胸腺素妝方案，尤其在将患者安排在该机构中暂住大于5天，或大于I周，或大于2周，和/或安排进行侵入性医学规程或需要侵入性医学装置的情况中。在某些实施方案中，约每5至10天，或大致每周一次对此类患者给予TAl施用。
[0016]本发明的其它目的和方面从以下详细描述看会是显而易见的。
[0017]附图简述
[0018]图1显示了以指定剂量且以相对于Fluvirin?施用的不同时间接受胸腺素肽后达到针对3种流感株的期望抗体滴度的小鼠数目。
[0019]图2显示了以指定剂量且以相对于疫苗施用(Fluvirin? )的不同时间接受胸腺素肽后达到期望抗体滴度的小鼠数目。如显示的，与疫苗一起及在疫苗前7天接受胸腺素肽的小鼠均针对3种流感株得到保护。
[0020]图3显示了在与没有佐剂的疫苗同一天及在一些情况中前7天施用时用3.2和
6.4mg的人当量的胸腺素在白鼬中实现的抗体滴度。加佐剂的疫苗作为阳性对照显示。
[0021]图4显示了需要血液透析的末期肾病患者中的结果。患者在(用Focetria?)疫苗接种当天及前7天接受胸腺素肽。左侧小图显示了在第21天时实现血清保护的患者的百分比。右侧小图显示了在第21天时实现抗体滴度升高至少4倍的患者的百分比。
[0022]图5显示了需要血液透析的末期肾病患者中的结果。患者在(用Focetria?)疫苗接种当天及前7天接受胸腺素肽。该图显示了疫苗接种后的21天时段里抗体滴度的发展。
[0023]图6显示了单独或与3.2或6.4mg TAl方案一起接受流感疫苗的患者中的百分比血清转化和抗体滴度(几何均值比，或GMR)。血清转化定义为阴性疫苗接种前血清(即，HI 滴度〈1: 10)和疫苗接种后HI滴度> 1:40或自非阴性(> 1:10)疫苗接种前HI滴度升高 4倍。GMR=第X天/第0天几何均值HI滴度比。图6A显示了第21天的结果。图6B显示了第42天的结果。
[0024]图7显示了单独或与3.2或6.4mg TAl方案一起接受一剂流感疫苗的患者中的百分比血清转化和几何均值比(HI测试)。图7A显示了第21天的结果。图7B显示了第42天的结果。
[0025]图8显示了在基线时为阴性(HI滴度〈1:10)的患者中的百分比血清转化的百分比疫苗接种后滴度>1:40。图8A显示了第21天的结果。图8B显示了第42天的结果。
[0026]图9显示了在流感疫苗接种后84天时段里所有患者中的血清转化(HI测试)，及 95%置信区间。对于接受第二次疫苗接种的受试者，第21天滴度持续至第42天和第84天。
[0027]图10显示了在流感疫苗接种后84天时段里所有患者中的血清保护(HI测试)，及 95%置信区间。对于接受第二次疫苗接种的受试者，第21天滴度持续至第42天和第84天。
`[0028]图11对所有患者显示了流感疫苗接种后84天时段里的几何均值滴度(HI测试)， 及95%置信区间。对于接受第二次疫苗接种的受试者，第21天滴度持续至第42天和第84 天。
[0029]图12对所有患者显示了流感疫苗接种后84天时段里的几何均值滴度(HI测试)， 及95%置信区间。对于接受第二次疫苗接种的受试者，第21天滴度持续至第42天和第84天。[0030]发明详述
[0031]本发明提供了用于保护感染、治疗感染、或降低感染的严重性的方法，所述感染包括医院获得性感染和与侵入性医学规程或侵入性医学装置引入相关的感染。在某些实施方案中，本发明牵涉治疗免疫缺陷或免疫受损的患者或保护免疫缺陷或免疫受损的患者免于感染。如本文中在流感疫苗接种的上下文中公开的，有效的TAl方案可以引发免疫系统实现对初始抗原或病原体暴露的更大或更快的应答，并且在暴露后提供此类益处长至50天， 这足以覆盖大多数住院期的时间、抗生素疗法的过程、和/或免疫抑制药物的周期。
[0032]一般地，本发明牵涉施用a胸腺素肽方案以增强针对病原体暴露，或潜在病原体暴露的免疫应答。胸腺素肽包括胸腺素a I (“TA1”)、和与TAl具有结构同源性的肽。TAl 是一种具有氨基酸序列(N-乙酸基)-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-1le-T hr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Gl u-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH(SEQ ID NO:1)的肽。美国专利4，079，137中披露了 TAl的氨基酸序列，在此通过提及将其公开内容收录。TAl是一种具有乙酰化N端和约3108分子量的非糖基化28个氨基酸的肽。TAl的合成型式以商品名称ZADAXIN在某些国家可购得。
[0033]TAl在血清中以约0.1至1.0ng/ml循环。注射3.2mg TAl (约40 u g/kg)后的峰血浆水平是约100ng/ml。循环中TAl的半衰期是约2小时。
[0034]最初自牛胸腺分离胸腺素a，显示了其在切除胸腺的动物模型中重建“免疫功能”。认为胸腺素在炎性和先天性免疫应答中发挥作用，并且在哺乳动物中促进区分自身与非自身。胸腺素活化PAMP (病原体关联分子样式)配体，导致刺激胞内信号转导途径，其导致表达共刺激分子、促炎症细胞因子、一氧化氮、和类二十烷酸(eicosanoid)。例如，胸腺素可以影响树突细胞、T细胞、B细胞、和NK细胞。
[0035]不意图受限于理论，认为胸腺素肽(例如TAl)活化Toll样受体9 (TLR)，导致Thl 细胞、B细胞、和NK细胞增加，由此引发免疫系统实现增强的免疫应答，等等。例如，TAl可以提高或增强淋巴细胞浸润、趋化性细胞因子的分泌、树突细胞的成熟和分化、胸腺生成性细胞因子(包括IFN-a、IL-7、和IL-15)的分泌、和B细胞生成抗体。
[0036]与本发明一起使用的胸腺素肽包括天然存在的TAl (例如自组织纯化或分离的 TAl )、以及合成的TAl和重组TAl。在一些实施方案中，胸腺素肽包含SEQ ID N0:1的氨基酸序列(其中酰化的(例如乙酰化)的N端是任选的)。在一些实施方案中，胸腺素肽包含与 TAl基本上相似的氨基酸序列，并且维持TAl的免疫调控活性。基本上相似的序列相对于 TAl可以(总共)具有例如约I至约10处氨基酸删除、插入、和/或替代。例如，胸腺素肽相对于TAl可以(总共)具有约I至约5 (例如1、2、或3)处氨基酸插入、删除、和/或替代。
[0037]如此，胸腺素肽可以包含缩短的TAl序列，例如，其相对于TAl具有I至约10个氨基酸、或约I至5个氨基酸、或1、2或3个氨基酸的删除。此类删除可以在N或C端，和/ 或在内部，只要肽的免疫调控活性基本上得到维持。或者/另外，基本上相似的序列相对于 TAl可以具有约I至约5处氨基酸插入(例如1、2、或3处氨基酸插入)，其中TAl的免疫调控活性基本上得到维持。或者/另外，基本上相似的序列可以具有I至约10处氨基酸替代， 其中免疫调控活性基本上得到维持。例如，基本上相似的序列可以具有I至约5、或1、2、或 3处氨基酸替代，其可以包括保守和非保守替代。在一些实施方案中，替代是保守的。一般地，保守替代包括化学相似氨基酸(例如极性、非极性、或带电荷)的替代。替代的氨基酸可以选自标准的20种氨基酸或者可以是非标准氨基酸(例如，保守的非标准氨基酸)。
[0038]在一些实施方案中，胸腺素肽包含与SEQ ID NO:1具有至少70%序列同一性的氨基酸序列，而维持TAl的免疫调控活性。例如，胸腺素肽可以包含与SEQ ID NO:1具有至少 80%、90%、或95%序列同一性的氨基酸序列。胸腺素肽可以包含与SEQ ID NO:1具有100% 序列同一性的氨基酸序列。在所有情况中，任选地，N端可以是酰化的(例如乙酰化的)或烷基化的，例如用C1-10或C1-C7酰基或烷基基团。
[0039]在某些实施方案中，上文描述的基本上相似的且同源的肽相对于TAl (SEQ ID NO:1)可以以至少约50%、70%、80%、90%、或约100%的水平发挥功能。
[0040]胸腺素肽可以例如通过固相合成来合成制备，或者可以通过已知的技术重组生成
并纯化。
[0041]可以以冻干形式提供胸腺素肽，并在施用前用无菌(例如水性)稀释剂将其重建。 可以通过皮下注射，或者其它有效路径施用胸腺素肽的配制剂。
[0042]在某些实施方案中，将胸腺素肽进行PEG化以延长其在循环中的半衰期。此类用于延长治疗性蛋白质的半衰期的策略是公知的。
[0043]依照本发明，以如下的方案对受试者或患者施用胸腺素肽(例如TA1)，所述方案足以增强针对病原体暴露的免疫应答，持续至少一周、至少一个月、或至少两个月的时间段， 从而保护面对升高的病原体暴露、感染风险、或预期免疫缺陷的预计期的患者。多个实施方案中的a胸腺素方案是“有效”方案。也就是说，在预期产生病原体暴露或机会性事件中， 所述方案以a胸腺素的相对少数几次施用和/或通过对a胸腺素施用确定时间实现其目的。“事件”不是疫苗接种，而是对潜在传染原的暴露或升高的易感性。a胸腺素的有效方案对于患者而言是相对方便且舒适的，以及更为负担得起且有效的。
[0044]在一些实施方案中，有效方案采用相对较高剂量的a胸腺素(例如至少1.6mg、
3.2mg、或6.4mg)，其中仅施用1、2、3、或4剂，且在大多数实施方案中，3剂或更少。a胸腺素施用可以相隔约5至9天，并且在一些实施方案中可以每周一次给予，如本文中更为详细描述的。在方案过程期间，一些实施方案中的患者没有接受疫苗接种。
[0045]在其它实施方案中，有效方案采用相对较高剂量的a胸腺素，并且在预测产生病原体暴露或机会性事件前约I至10天(但是优选5至9天)时对方案的启动确定时间。本文中描述了例示性的事件。在这些中的一些实施方案中，有效方案牵涉I至4次施用a胸腺素，诸如3次或更少。a胸腺素施用可以相隔约5至9天，并且在一些实施方案中可以每周一次给予。在方案过程期间，患者不需要接受疫苗接种。
[0046]仍在其它实施方案中，有效方案牵涉I至4次施用a胸腺素，诸如3次或更少，并且在预期导致病原体暴露或机会性事件前对方案确定开始时间。例如，可以在事件前2至 10天，诸如前5至10天启动有效方案，并且可以在事件当天施用第二剂。a胸腺素施用可以相隔约5至9天，并且在一些实施方案中可以每周一次给予。在方案过程期间，患者不需要接受疫苗接种。
[0047]仍在其它实施方案中，有效方案牵涉相对较高剂量的a胸腺素，其大致每周(例如每5至9天)提供，持续2、3、4或更多周。在方案过程期间，患者不需要接受疫苗接种。
[0048]仍在其它实施方案中，患者接受2剂胸腺素a (诸如每剂2_8mg)，并且此类剂量以约5至10天隔开，或大致每周一次。此方案可以大约每月，或每隔一月重复，并且对于保护患慢性病的和免疫缺陷的患者免于感染可以是特别有益的。本文中描述了这些实施方案使用的各种类型的免疫缺陷。
[0049]如本文中公开的，少到一次或两次a胸腺素施用足以提供较强力的对抗原/病原体暴露的免疫应答长至约50天，这足以覆盖大多数住院期和恢复期的时间长度，以及抗生素治疗的标准过程和/或免疫抑制药物的周期。
[0050]本发明可适用于人和兽医健康两者。如此，受试者一般是哺乳动物，诸如人、家畜 (例如母牛、马、猪、绵羊等)、或家养哺乳动物(例如猫或犬)。
[0051]在某些实施方案中，受试者是免疫缺陷的。免疫缺陷性受试者(例如人受试者)展现出降低的抗击传染病的能力和/或降低的响应病原体暴露的能力。此类免疫缺陷性受试者的例子包括老年患者、新生儿、白血病或嗜中性白血球减少症患者、依靠血液透析(例如用于治疗慢性肾病)的患者、接受免疫抑制剂疗法的患者、AIDS患者、糖尿病患者、接受针对癌症的化学疗法或放射疗法的患者、由遗传缺陷、营养不良、药物滥用、酒精中毒、或其它引起免疫受损的疾病或状况引起的免疫缺陷。
[0052]在某些实施方案中，免疫受损的受试者是老年的。随着动物变老，其免疫应答降低，并且免疫应答的强度由于低亲和力抗体应答的流行而降低。因而，这些实施方案中的受试者可以是超过年龄45，或者超过年龄50的人患者。在一些实施方案中，受试者是年龄60 岁或更老、年龄65岁或更老、或年龄70岁或更老的人患者。
[0053]在一些实施方案中，受试者有医院获得性感染的风险。医院获得性感染是在住院时形成的感染。医院获得性感染的医学术语是“医源性”。由于抗生素在医院中频繁使用， 与医源性感染有关的微生物及其对抗生素的抗性可以与医院以外的隔离群有所不同。如本文中使用的，医源性感染是在医院收治前不在宿主中存在或潜伏，但是一般在收治后约2 天后出现的感染。
[0054]在本发明的一个方面，施用胸腺素肽方案以在感染方面有风险的患者中预防感染、或者降低感染的严重性。依照此方面，使用a胸腺素方案来引发患者的免疫系统，以提供更快速的对病原体暴露的响应，所述病原体暴露在一些实施方案中可以基于安排的事件对患者预期。
`[0055]例如，可以安排受试者进行侵入性手术规程，并且在这些实施方案中，a胸腺素方案降低术后感染的风险和/或严重性。一般地，侵入性医学规程携带感染风险，并且例示性规程包括关节置换、器官或组织移植或移植物、假体的引入、包括肿瘤或癌性组织的组织除去、扁桃体切除术、阑尾切除术、脾切除术、胸腺切除术、肾除去、截肢术、或骨髓的除去，或其它侵入性医学规程。在此类实施方案中，TAl方案可以降低心内膜炎、菌血症、败血病、肺炎、或骨髓炎、或切开部位周围组织的局部感染的风险。
[0056]在某些实施方案中，患者可以需要来自侵入性医学装置的辅助，所述侵入性医学装置使身体暴露于微生物，并且引入机会性环境。如此，所述装置可以导致升高的对潜在机会和病原体的暴露。此类装置包括但不限于通气机、尿导管、动脉尿管、饲管、1.V.、支架、肾透析、或人工器官。在这些实施方案中，a胸腺素方案帮助引发患者的免疫系统以预防任何所致的感染或降低任何所致感染的严重性。
[0057]在某些实施方案中，患者需要肺部通气机，或者在肺部通气机的辅助下，而TAl方案帮助引发患者的免疫系统，并且使免疫系统保持引发状态，从而降低通气机关联肺炎的风险或严重性。通气机关联肺炎(VAP)在经由气管内或气管造口术管依靠机械通气的患者中发生，并且源自肺泡中的感染。铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是最常见的引起VAP的革兰氏阴性细菌，并且假单胞菌属(Pseudomonas)对许多抗生素具有天然抗性。 VAP的其它致病物种包括肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae),其对一些￠-内酰胺抗生素(诸如氨节西林和/或碳青霉烯(carbapenum)、及头孢菌素和氨曲南(aztreonam)) 具有天然抗性。粘质沙雷氏菌、隐杆菌(Enterobacter sp.)、和不动杆菌(Acinetobacter sp.)也可以与VAP联系起来，而且对抗生素也可以是有抗性的。另外，金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)(包括MRSA)与VAP之间有日益增加的联系。
[0058]在某些实施方案中，安排受试者经历移植，接着用免疫抑制药物(诸如环孢霉素、 他克莫司(tacrolimus)、雷怕霉素(rapamycin)、或降低抗体生成的药剂)治疗。如此,在某些实施方案中，启动如本文中描述的胸腺素肽方案以在移植手术和施用免疫抑制药物前加强患者的抗体形成。
[0059]在一些实施方案中，患者依靠血液透析(例如由于慢性肾病所致)，或者安排经历血液透析。由于血液透析需要通向循环系统，经历血液透析的患者可以使其循环系统暴露于微生物，其可以导致败血病、影响心瓣的感染(心内膜炎)或影响骨的感染(骨髓炎)。如此，在某些实施方案中，启动如本文中描述的TAl方案以为患者准备好进行血液透析。
[0060]在一些实施方案中，患者是癌症患者，并且正在经历或安排启动化学疗法和/或放射疗法，其经常负面影响患者的免疫系统。在患者正在经历或安排启动化学疗法的情况中，化学疗法一般是对免疫细胞具有不利影响的，并且可以包括一种或多种烷化剂(例如顺钼、卡钼、和异环磷酰胺(ifosfamide))、抗代谢物(5_氟尿喃唳或抗叶酸剂)、拓扑异构酶抑制剂(例如喜树碱(camptothecin)、依托泊苷(etoposide))、或紫杉烧(taxane)(例如帕利他塞(paclitaxel))，等等。在一些实施方案中，施用a胸腺素方案以在癌症疗法前引发患者的免疫系统。
[0061]在一个例示性的实施方案中，对白血病和/`或嗜中性白血球减少症患者提供如本文中描述的a胸腺素方案，由此预防导管相关感染和/或菌血症(诸如通常由药物抗性金黄色葡萄球菌(例如MRSA和VRSA)引起的)或者降低其严重性。在另一个例示性的实施方案中，对骨髓移植患者提供如本文中描述的a胸腺素肽方案，由此预防败血病或肺炎(诸如那些通常由曲霉、念珠菌或CMV引起的)或降低其严重性。在又一个实施方案中，对器官 (例如肾)移植接受者提供如本文中描述的a胸腺素肽方案，以由此预防器官排斥，其有时是由于CMV感染所致。
[0062]在另一个方面，本发明提供了用于治疗感染的方法。在此方面，患者怀疑患有感染或者已经诊断为患有感染，诸如急性呼吸系统感染、系统性感染、尿路感染、或皮肤或粘膜表面的局部感染。感染可以是细菌性、病毒性、真菌性、或混合的或病因学未知的。感染可以是医院获得性的，并且可以表现为败血病、肺炎、尿路感染、心内膜炎、骨髓炎、或其它状况。
[0063]在某些实施方案中，感染症状在启动TAl方案时是不存在的或者是微小的，但是通过培养物、ELISA、或其它诊断测试确定微生物或疾病的存在。在此类实施方案中，a胸腺素方案帮助引发免疫系统以更快速形成能够消退感染的抗体应答。在一些实施方案中， a胸腺素方案是与标准的抗细菌、抗病毒、或抗真菌疗法并行提供的有效方案。[0064]在某些实施方案中，患者显示感染的体征和症状。在适当的诊断工作后，感染可以是呼吸系统感染诸如呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒、或细菌性肺炎。在其它实施方案中，感染是系统性的，并且可以牵涉例如菌血症、败血病、或真菌性感染，诸如念珠菌血症 (candidemia)或曲霉病(aspergillis)感染。在一些实施方案中，感染是尿路感染,或者皮肤或粘膜表面的局部感染，并且可以牵涉金黄色葡萄球菌(例如药物抗性金黄色葡萄球菌) 或大肠杆菌(E.coli)。感染可以源自重度损伤、重度创伤、或烧伤，并且可以是术后感染。
[0065]在某些实施方案中，患者(或患者样品、感染的易感性部位、或紧邻的周围环境)在革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌存在方面已经测试呈阳性，所述细菌包括一种或多种感染性微生物，包括但不限于:单核细胞增生利斯特氏菌(Lysteria monocytogenes)、假单胞菌(例如铜绿假单胞菌)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、金黄色葡萄球菌、不动杆菌(Acinetobacter spp.)、肠球菌(Enterococcus sp.)、大肠杆菌、克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)、链球菌(Streptococcus)(例如肺炎链球菌)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、和脑膜炎奈瑟氏球菌(Neisseria meningitides)。在一些实施方案中，感染牵涉药物抗性或多药物抗性微生物,或者隔离群鉴定为药物抗性或多药物抗性微生物，所述微生物诸如金黄色葡萄球菌、假单胞菌、克雷伯氏菌、大肠杆菌、和/或艰难梭菌。在某些实施方案中，传染原是药物抗性肺炎链球菌，包括青霉素抗性、甲氧西林抗性、和/或喹诺酮抗性(例如氟喹诺酮)。在某些实施方案中，药物抗性微生物是甲氧西林抗性或万古霉素抗性金黄色葡萄球菌(MRSA或VRSA)，包括中间抗性隔离群，或者是碳青霉烯抗性 大肠杆菌、克雷伯氏菌、或假单胞菌，包括中间抗性隔离群。 可以使用本领域中已知的诊断测试测定或确认，或者通过健康护理机构处此类感染发生中的采样(spike)确定此类生物体的存在。
[0066]在具体的例示性实施方案中，患者是受累于假单胞菌、不动杆菌、或大肠杆菌感染的嗜中性白血球减少症患者，并且感染可以是药物抗性的，或者患者受累于通气机关联肺炎，其可以牵涉受假单胞菌或沙雷氏菌(它们也可以显示药物抗性)感染。
[0067]可以与抗生素疗法并行施用a胸腺素方案，所述抗生素疗法包括用￠-内酰胺抗生素(例如甲氧西林、氨节青霉素、碳青霉烯、哌拉西林(piperacillin));头孢菌素；氟喹诺酮(例如环丙沙星(ciprofloxacin)、左氧氟沙星(Ievofloxacin)、莫西沙星(moxifloxacin))、和/或大环内酯(例如阿奇霉素(azithromycin)、克拉霉素 (clarithromycin)、地红霉素(dirithromycin)、和红霉素(erythromycin))。可以与别的治疗剂(诸如￠-内酰胺酶抑制剂(三唑巴坦(tazobactam))) —起施用抗生素疗法。在某些实施方案中，a胸腺素缩短感染的持续时间，并且缩短需要的抗生素治疗的持续时间。 在某些实施方案中，在启动a胸腺素治疗前确定感染对此类药剂有抗性。在某些实施方案中，在感染明显消退后启动、或继续、或重复a胸腺素方案，以在完成抗生素疗法后帮助预防复发。a胸腺素的有效方案(例如1、2、或3剂)可以跨越抗细菌疗法的整个过程，并且提供免疫应答的加强达整个时段。
[0068]在某些实施方案中，患者具有选自下组的病毒性感染:巨细胞病毒(CMV)、RSV、流感病毒、单纯疱疹病毒I型、和副流感病毒。本文中描述的a胸腺素方案可以降低病毒性感染或发作的严重性和/或持续时间，并且可以与合适的抗病毒疗法并行提供，所述抗病毒疗法可以是病毒中和性抗体或小分子抑制剂，诸如Tamiflu。在某些实施方案中，在病毒性感染明显消退后启动、或继续、或重复a胸腺素方案，以在完成其它疗法后帮助预防复发。
[0069]在还有其它实施方案中，患者具有曲霉(例如烟曲霉(A.fumigatus))或念珠菌(例如白念珠菌(Candida albicans))的真菌性感染，并且这些也可以显示对抗生素治疗的抗性。在某些实施方案中，与抗真菌治疗一起施用胸腺素肽方案。抗真菌疗法包括唑(azole) 药物诸如咪唑(例如酮康唑(ketoconazole))或三唑(例如氟康唑(fluconazole))。在某些实施方案中，在感染明显消退后启动、或继续、或重复a胸腺素方案，以在完成抗真菌疗法后帮助预防复发。
[0070]在本发明的某些方面，a胸腺素方案是科研项目的一部分以降低医院获得性感染的比率或发生率,其通过对有风险的患者启动TAl方案进行。有风险的患者可以包括上文对治疗和预防感染描述的患者，且包括免疫受损的患者和安排手术或侵入性医学装置的患者。在此类实施方案中，所述方案可以降低细菌性、病毒性、或真菌性感染的比率或发生率， 并且其可以表现为败血病、菌血症、肺炎(包括VAP)、RSV感染、心内膜炎、骨髓炎、由于感染所致的移植物排斥、或术后感染的发生率降低。
[0071]a胸腺素肽方案牵涉以针对病原体暴露足以增强抗体滴度，和/或足以加速抗体滴度发展的剂量对受试者或患者施用药剂。例如，在多个实施方案中，以如下的剂量对人患者施用胸腺素肽，所述剂量对应于至少约0.5mg(例如至少约1.6mg)、至少约3mg(例如至少约3.2mg)、或至少约5mg (例如至少约6.4mg) TA1。一般地，可以在与约0.1至20mg TA1> 或约I至IOmg TA1、或约2至IOmg TA1、或约2至8mg TA1、或约2至7mg TAl对应的范围内施用胸腺素肽。在某些实施方案中，在期望有效方案的情况中，剂量单位在3至6.5mg的范围内，诸如约3.2或6.4mg TAl。在某些实施方案中，针对患者体型调节TAl剂量，并且其可以以10至IOOii g/kg (例如约20、40、60、或80ii g/kg)提供。可以针对受试者或患者的物种调节剂量，但是在每种情况中，其大致对应于人当量的TAl (mg/kg)。
[0072]可以通过任何有效的路径施用胸腺素肽(例如TA1)，包括通过皮下注射、肌肉内注射、静脉内注射或输注、以及口服。在某些实施方案中，通过皮下注射或者通过静脉内输注施用胸腺素肽。一般地，胸腺素的安排剂量可以以单剂(例如注射)施用，或者可以在24小时或更少的过程里隔开，其例如通过连续输注或亚剂量的重复注射等等进行。胸腺素肽的安排剂量可以以单次注射施用。
[0073]在一些实施方案中， 诸如对于固定的或住院的患者，可以通过连续输注施用TA1。 TAl的连续输注详细记载于US2005/0049191，在此通过提及将其全部公开内容收录。简言之，胸腺素肽的连续输注将免疫刺激有效量的胸腺素肽在患者的循环系统中维持较长的时段。皮下注射的TAl的血浆半衰期是约2小时，并且如此，依照某些实施方案，可以对患者施用胸腺素肽，持续至少约6、10、12小时或更长的治疗期，这在一些实施方案中可以改善有效性。可以通过任何合适的手段(诸如通过微型泵)实施输注。
[0074]或者，可以在治疗日通过多次注射(亚剂量的胸腺素肽)施用胸腺素肽，从而将免疫刺激有效量的胸腺素肽在患者的循环系统中实质上连续维持较长的时间段。合适的注射方案可以包括在施用日每2、3、4、6小时等注射(例如2至5次注射)，从而在胸腺素治疗日在患者的循环系统中实质上连续维持免疫刺激有效量的胸腺素肽。
[0075]可以通过以约0.0001-0.lmg/hr/kg患者体重范围内的速率对患者施用TAl肽在患者的循环系统中实质上连续维持免疫刺激有效量的胸腺素肽(例如TA1)。例示性的施用速率在约0.0003-0.03mg/hr/kg患者体重的范围内。对于连续输注，TAl肽存在于药学可接受液体载体(诸如注射用水、或生理学浓度的盐水)中。
[0076]无论用于治疗还是预防感染，胸腺素肽方案可以是有效方案，并且牵涉I至4次， 或I至3次施用a胸腺素(例如TAl)，且在某些实施方案中，仅两次施用TAl (例如在两个治疗日)。例如，在预测导致病原体暴露或引入机会性环境的事件之前、一起和/或之后施用a胸腺素肽，如上文描述的。例如，事件可以是医院或健康护理机构收治一段时间(例如至少3天、至少一周、或至少10天、或至少一个月)。在其它实施方案中，事件是安排的手术或侵入性医学规程，如描述的。在其它实施方案中，事件是侵入性医学装置的放置，如描述的。在还有其它实施方案中，事件是肾透析或启动化学疗法或放射疗法进行癌症治疗(如描述的)。
[0077]可以选择胸腺素施用的时机以增强免疫应答，包括抗体滴度(例如抗体滴度的发展或水平)，从而覆盖感染风险升高的时段。例如，在某些实施方案中，相隔约5天至约9天给予胸腺素肽施用，且在多个实施方案中，相隔约6、7、或8天施用。可以相隔约7天给予胸腺素施用(例如大致每周一次施用)。在其它实施方案中，相隔1、2、3、或4天给予胸腺素肽施用。
[0078]在一些实施方案中，首先在事件(如描述的)(诸如健康护理机构收治、安排的手术、或侵入性医学装置放置)前，并且在事件当天再次，以及任选地在事件后施用a胸腺素肽。例如，可以在事件前I至10天(诸如事件前约5至约9天)，并且在事件当天再次施用胸腺素肽。可以在事件前约7天，并且在事件当天再次，以及任选地在事件后2至10天(例如事件后4至8天)内施用胸腺素肽。例如，依照本发明的某些实施方案接受两剂TAl的患者有可能实现更快速的和/或更大的对病原体暴露的响应，并且其可以提供保护达至少21 天、至少42天、或更长。
[0079]在某些实施方案中，诸如在患者(包括免疫缺陷患者)显示医院获得性感染或怀疑为药物抗性的感染(包括牵涉本文中描述的传染原和药物抗性生物体)的体征或症状的情况中，患者每日一次或两次、或者每隔一天接受2至Smg剂量(例如以每剂1.6,3.2或 6.4mg)的TAl达3至14天(例如3、5、7、10、或14天)。可以相对于将患者置于感染或并发性疾病恶化的进一步风险的事件，诸如本文中描述的那些事件(例如，手术、血液透析、癌症治疗的启动、医学装置的放置)对此类方案确定时间。例如，可以在方案的第2天和第10天之间的某个时间(包括第3天、第5天、第7天、或第10天)安排事件。所述方案可以与抗细菌、抗病毒、或抗真菌疗法(包括与本文中描述的活性剂)是并行的。
[0080]在一个实施方案中，患者是住院的或者健康护理机构收治的，并且以2和8mg之间 (例如约3.2或6.4mg)的剂量接受TAl的大致每周一次施用，以预防医源性疾病或源自医学规程或医学装置的疾病或降低其严重性。在一些实施方案中，所述方案可以持续2至4 周。在患者是健康护理机构TAl项目的一部分的情况中，本发明导致医源性感染发生率降低、ICU天数减少、和/或抗微生物疗法减少。
实施例
[0081]实施例1:小鼠中HlNl疫苗接种的增强
[0082]汇总[0083]进行研究以测定TAl (胸腺法新(thymalfasin))在季节性流感疫苗Fluvirin? 2008-2009的不同疫苗接种日程表后在CD-1小鼠中增强抗流感抗体形成的潜力。小鼠在研究日(SD) I和10或SD8和17时接受对照物品或疫苗。小鼠在相对于疫苗施用的不同时间时还接受不同剂量的TAl。经由肌肉内注射对右和左后肢两者施用对照物品和疫苗两者； 通过腹膜内路径施用TA1。不管体重如何，对所有小鼠都给予固定剂量的对照/疫苗。每天两次对小鼠观察死亡率、濒死率、一般健康、和毒性体征；在给药前记录体重。在SD20或 27 (最终疫苗施用后10天)时收集血液样品，并对这些样品分析HAI抗体生成。在血液收集后，将所有动物实施安乐死，并在不尸体检查的情况中弃去。
[0084]结果指示相对于仅接受FLUVIRIN的小鼠，HAI滴度在接受TAl和FLUVIRIN两者的小鼠中更大。另外，在与其它剂量相比时，此研究中使用的TAl的最高剂量的(1.2mg/kg) 更一致地提高滴度。此外，最佳的给药日程表是在SD8的FLUVIRIN疫苗接种前7天及当天施用TA1，因为所有动物在所有测试者株中实现期望的抗流感抗体。
[0085]实骀研究
[0086]胸腺素aI (TAl ;商品名称ZADAXIN?:)得到批准并且可购得。TAl在循环中
天然找到，并且在身体的胸腺中生成。ZADAXIN? (胸腺素a I的一种合成型式)至少部分通过影响T细胞和NK细胞来刺激免疫系统。
[0087]TAl具有卓越的安全性记录。在至今的临床研究中，已经在实际上没有药物相关副作用的情况中用TAl治疗超过3，000名患有病毒性乙肝和丙肝、原发性免疫缺陷疾病、和多种癌症的患者，包括成人、老年人、和儿童。当TAl与其它药剂(诸如干扰素和化学疗法)组合时，也没有副作用的任何恶化。在动物研究中，已经以高到推荐人剂量800倍的剂量施用 TAl，而没有不利临床体征的证据。
[0088]临床试验已经表明TAl提高年老人和血液透析患者中对流感和乙肝疫苗的响应； 然而，治疗方案牵涉疫苗接种后TAl的8次注射。进行本研究以测定TAl的不同剂量和给药方案(主要通过更少的注射)在用季节性流感疫苗Fluvirin? 2008-2009的两种不同疫苗接种日程表后在CD-1小鼠中增强抗流感抗体形成的潜力。
[0089]适当数目的雄性⑶-1小鼠购自Charles River Laboratories。动物在第一剂时重量为25至40克，并且为7至9周龄。
[0090]对照物品是0.9%注射用氯化钠，USP，并且于室温贮存。
[0091]用磷酸盐缓冲盐水将TAl稀释至合适的浓度，并于2至8°C贮存，直至使用。
[0092]用0.9%注射用氯化钠，USP将Fluvirin? 2008-2009稀释至合适的浓度，并在配制当天使用。
[0093]根据疫苗给药日程表将研究分成2个分组；将5只小鼠/组随机归入每组。第一分组的小鼠(20组)在研究日(SD)S (疫苗)和17 (加强)时接受对照物品或疫苗，而第二分组的小鼠(23组)在SDl (疫苗)和10 (加强)时接受对照物品或疫苗。如表3和4中指示的那样发生TAl施用。
[0094]经由肌肉内注射对右和左后肢两者以固定剂量0.05mL对照物品/疫苗(不管体重如何)施用对照物品(0.9%注射用氯化钠，USP)和疫苗(9 ii g/剂Fluvirin? 2008-2009)两者。[0095]通过腹膜内路径以剂量体积lmL/kg施用TAl (0.3,0.6或1.2mg/kg/剂)。
[0096]表1:小鼠/白鼬/人给药日程表
[0097]
【权利要求】
1.一种用于保护患者免于感染或者降低感染的严重性的方法，其包括在预测导致微生物暴露或机会(opportunism)的事件前启动a胸腺素肽的有效方案，使得预防感染或降低所致感染的严重性。
2.权利要求1的方法，其中所述患者是人。
3.权利要求1或2的方法，其中所述患者是免疫缺陷的。
4.权利要求3的方法，其中所述患者是由于年龄、白血病或嗜中性白血球减少症、慢性肾疾病、AIDS、针对癌症的化学疗法或放射疗法、免疫抑制剂疗法、遗传缺陷、营养不良、药物滥用或酒精中毒而免疫缺陷的。
5.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述患者住院3天至约I个月的时段。
6.权利要求5的方法，其中所述事件是侵入性手术规程。
7.权利要求6的方法，其中所述规程是关节置换、器官或组织移植或移植物、假体的引入、包括肿瘤或癌性组织的组织除去、扁桃体切除术、阑尾切除术、脾切除术、胸腺切除术、 肾除去、截肢术或骨髓的除去。
8.权利要求5 的方法，其中所述事件是侵入性医学装置的放置。
9.权利要求8的方法，其中所述装置是通气机、尿导管、动脉导管、饲管、1.v.、支架、肾透析或人工器官。
10.权利要求5的方法，其中所述事件是血液透析。
11.权利要求1的方法，其中所述事件是启动针对癌症的化学疗法和/或放射疗法。
12.权利要求1的方法，其中所述事件是准许进入健康护理机构。
13.权利要求1至12中任一项的方法，其中以至少约0.5mg的剂量施用所述胸腺素肽。
14.权利要求13的方法，其中以至少约3mg的剂量施用所述胸腺素肽。
15.权利要求13的方法，其中以至少约5mg的剂量施用所述胸腺素肽。
16.权利要求13的方法，其中以约3.2或约6.4mg施用所述a胸腺素肽。
17.权利要求13至16中任一项的方法，其中通过皮下注射施用所述a胸腺素肽。
18.权利要求1至12中任一项的方法，其中通过连续输注施用所述a胸腺素肽。
19.权利要求1至18中任一项的方法，其中所述方案牵涉I至4次施用a胸腺素。
20.权利要求19的方法，其中所述方案牵涉一次或两次施用a胸腺素。
21.权利要求19的方法，其中所述方案牵涉在所述事件前、在所述事件当天及任选地在所述事件后施用a胸腺素肽。
22.权利要求19至21中任一项的方法，其中相隔约5天至约9天给予至少两次a胸腺素肽施用。
23.权利要求22的方法，其中大致每周一次给予所述a胸腺素施用。
24.一种用于治疗感染的方法，其包括施用a胸腺素肽的有效方案，使得治疗感染或降低感染的严重性。
25.权利要求24的方法，其中所述患者显示感染的体征或症状。
26.权利要求24的方法，其中通过诊断测试确认所述感染和/或关联的微生物。
27.权利要求24至26中任一项的方法，其中所述感染是急性呼吸系统感染、系统性感染、尿路感染或皮肤或粘膜表面的局部感染。
28.权利要求27的方法，其中所述感染是医院获得性的。
29.权利要求28的方法，其中所述感染表现为败血病、肺炎、心内膜炎或骨髓炎。
30.权利要求23、24或25的方法，其中与抗细菌、抗病毒或抗真菌疗法并行施用所述 a胸腺素方案。
31.权利要求26至30中任一项的方法，其中以至少约0.5mg的剂量施用所述胸腺素肽。
32.权利要求31的方法，其中以至少约3mg的剂量施用所述胸腺素肽。
33.权利要求31的方法，其中以至少约5mg的剂量施用所述胸腺素肽。
34.权利要求31的方法，其中以约3.2或6.4mg施用所述a胸腺素。
35.权利要求31至34中任一项的方法，其中通过皮下注射施用所述a胸腺素肽。
36.权利要求24至35中任一项的方法，其中通过连续输注施用所述a胸腺素肽。
37.权利要求24至36中任一项的方法，其中所述方案牵涉I至4次施用a胸腺素肽。
38.权利要求37的方法，其中一次或两次施用a胸腺素。
39.权利要求37或38的方法，其中相隔约5天至约9天给予至少两次胸腺素肽施用。
40.权利要求39的方法，其中大致每周一次给予所述胸腺素肽。
41.一种用于降低医院获得性感染的比率或发生率的方法，其包括在准许进入医院后对有风险的患者启动a胸腺素方案，所述方案包括以住院每5至10天一次的频率施用a 胸腺素肽。`
42.权利要求41的方法，其中大致每周一次施用所述a胸腺素肽。
43.权利要求41的方法，其中所述有风险的患者是免疫受损的。
44.权利要求41至43中任一项的方法，其中所述有风险的患者在启动所述a胸腺素方案时需要侵入性医学规程或侵入性医学装置。
45.权利要求44的方法，其中所述患者具有感染的体征或症状。
46.一种用于治疗医院获得性感染或怀疑有药物抗性的感染的方法，其包括每天一次或两次，或每隔一天以2至Smg的剂量施用a胸腺素肽3至14天。
47.权利要求46的方法，其中所述患者是免疫缺陷的。
48.权利要求46或47的方法，其中所述感染牵涉选自下组的感染性微生物:单核细胞增生利斯特氏菌(Lysteria monocytogenes)、假单胞菌(Pseudomonas sp.)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)、不动杆菌(Acinetobacter sp.)、大肠杆菌(E.coli)、克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)、链球菌(Streptococcus)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae) 和脑膜炎奈瑟氏球菌(Neisseria meningitides)。
49.权利要求48的方法，其中所述感染牵涉药物抗性或多药物抗性金黄色葡萄球菌、 假单胞菌、克雷伯氏菌、大肠杆菌和/或艰难梭菌。
50.权利要求49的方法，其中所述感染牵涉甲氧西林抗性或万古霉素抗性金黄色葡萄球菌，包括中间抗性隔离群，和/或碳青霉烯抗性大肠杆菌、克雷伯氏菌属或假单胞菌属， 包括中间抗性隔离群。
【文档编号】A01N25/00GK103458681SQ201280017577
【公开日】2013年12月18日 申请日期:2012年2月3日 优先权日:2011年2月9日
【发明者】C.塔特希尔 申请人:赛生制药有限公司