一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养采收方法
【专利摘要】本发明公开了一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养采收方法，包括如下步骤：将处于指数期的轮虫培养液，根据浮游植物与轮虫的几何形态、沉降系数差异，以3000r/min的离心频率，离心3-5min，达到轮虫与藻液初步分离；将离心管架置于普通日光灯下方或自然光照条件下静置15min，利用轮虫趋光性原理对轮虫进行光诱导富集；借鉴人工培养细胞收集方法，采用孔径0.45μm的尼龙膜，用真空过滤泵抽滤浓缩，去除培养液，收集离心管上清液；本发明对以往的操作方法进行了改进，方便快捷，降低了采收过程中RNA和蛋白提取效率造成的影响，减少了收集过程中的机械刺激可能会对相关基因的表达水平的影响。
【专利说明】一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养采收方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物培养领域，具体涉及一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫 培养采收方法。
【背景技术】
[0002] 轮虫作为一种重要的水产饵料生物和性别进化研究模式生物具有极高的理论研 究和生产应用价值，但在由宏观种群水平研究向微观分子水平研究迈进的同时，如何方便 快捷的批量获取大量纯化的轮虫成了实验室研究的首要问题，以往的研究中绝大部分采用 人工显微镜检的方式进行手工操作，既费时又费力，国内仅杨家新等提出的一种轮虫总RNA 和总蛋白提取方法中不可避免的会带入培养基液体再加上轮虫本身的含水量，会给后续的 RNA和蛋白提取效率造成影响，此外收集过程中的机械刺激可能会对相关基因的表达水平 造成影响。
【发明内容】
[0003] 为解决上述问题，本发明提供了一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养 采收方法，对以往的操作方法进行了改进，既方便快捷又将上述弊端降到最低。
[0004] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
[0005] -种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养采收方法，包括如下步骤：
[0006] S1、将处于指数期的轮虫培养液，根据浮游植物与轮虫的几何形态、沉降系数差 异，以3000r/min的离心频率，离心3-5min，达到轮虫与藻液初步分离；
[0007] S2、将步骤S1所得的离心管架置于普通日光灯下方或自然光照条件下静置 15min，利用轮虫趋光性原理对轮虫进行光诱导富集；
[0008] S3、借鉴人工培养细胞收集方法，采用孔径0. 45 μ m的尼龙膜，将步骤S2所得的离 心管，用真空过滤泵抽滤浓缩，去除培养液，收集离心管上清液；
[0009] S4、取下滤膜，转移到冰上，采用细胞刮刀慢慢刮取转移至1. 5ml离心管中，冰冻 保存或直接提取RNA和蛋白。
[0010] 本发明对以往的操作方法进行了改进，，方便快捷，降低了采收过程中RNA和蛋白 提取效率造成的影响，减少了收集过程中的机械刺激可能会对相关基因的表达水平的影 响。
【具体实施方式】
[0011] 为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步 详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发 明。
[0012] 实施例1
[0013] 一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养采收方法，包括如下步骤：
【权利要求】
1. 一种适于分子生物学研究的室内高密度轮虫培养采收方法，其特征在于，包括如下 步骤： 51、 将处于指数期的轮虫培养液，根据浮游植物与轮虫的几何形态、沉降系数差异，以 3000r/min的离心频率，离心3-5min，达到轮虫与藻液初步分离； 52、 将步骤S1所得的离心管架置于普通日光灯下方或自然光照条件下静置15min，利 用轮虫趋光性原理对轮虫进行光诱导富集； 53、 借鉴人工培养细胞收集方法，采用孔径0. 45 μ m的尼龙膜，将步骤S2所得的离心 管，用真空过滤泵抽滤浓缩，去除培养液，收集离心管上清液； 54、 取下滤膜，转移到冰上，采用细胞刮刀慢慢刮取转移至1. 5ml离心管中，冰冻保存 或直接提取RNA和蛋白。
【文档编号】A01K67/033GK104094901SQ201410334047
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2014年7月11日 优先权日:2014年7月11日
【发明者】封琦, 王建国, 熊良伟, 袁圣, 朱云干, 陶桂庆, 王权, 仇海霞 申请人:江苏农牧科技职业学院