一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法。包括无菌外植体的获得，愈伤组织的诱导、植株再生、炼苗培养。本发明可以在短期内获得大量的愈伤组织和再生植株，有助于解决柄果槲寄生种质资源的可持续生长，并且为柄果槲寄生药用成分的开发利用提供新的途径。
【专利说明】一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 柄果槲寄生，桑寄生科，灌木植物，K/scw? 又称寄 生茶，刀叶槲寄生，油香藤寄生，生于海拔200-1200 (-1600)米的山地常绿阔叶林中，寄生 于锥栗属、柯属或樟树等植物上。分布于云南南部和东南部、贵州西南部、广西、广东、江西 (寻乌)、福建、台湾。泰国北部、越南北部也有分布。从中分离得到β-香树脂醇，羽扇豆醇， 菜油甾醉，豆留醇，β-谷留醇，β-香树脂酸乙酸酯，羽扇豆醇乙酸酯，β-香树脂酮，羽扇 烯酮，白桦脂酸，齐墩果酸，菜油留醇葡萄糖甙，功效主治祛风湿；补肝肾；活血止痛；安胎； 下乳。主治风湿痹痛；腰腿痛；跌打损伤；高血压；胎动不安；乳汁不下。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供一种柄果槲寄生的快速繁殖方法，由该方法所 制备得到的柄果槲寄生成活率高，品质优良，次生代谢物含量高，可以为大田大规模种植提 供种苗。
[0004] 本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的： 选用柄果槲寄生幼嫩的叶片，用肥皂水中浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净 工作台上用1 %的碘化钾消毒9分钟，无菌水冲洗5次，接种入培养基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上进行愈伤组织的诱导，诱导的条件为温度25°C，湿度60%，光 照强度8001x，光期5h/d，45天后，转接入分化培养基MS+NAA0. 1?0· 3mg/L+KT0. 5-1. 5mg/ L+70-150mg/L氯化钠上诱导愈伤组织分化，分化的条件为温度27°C，湿度80%，光照强度 30001x，光期16h/d，待分化出来的幼苗长至2cm左右，在室内自然光下闭口炼苗一周，在移 栽前开盖炼苗2d，然后移栽到高压灭菌过的蛭石：珍珠岩=2:1的营养钵中，待长出新根后 进行第二步移栽，移栽基质为田园土 ：蛭石=2:1，湿度85%，光照强度50001x，光期16h/d。
[0005] 采用本发明制备的柄果槲寄生幼苗成活率高，周期短，次生代谢物含量高，能耗 少，利于大规模种植。
[0006] 下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。
【具体实施方式】 [0007] 实施例1 选用柄果槲寄生幼嫩的叶片，用肥皂水中浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净 工作台上用1 %的碘化钾消毒9分钟，无菌水冲洗5次，接种入培养基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上进行愈伤组织的诱导，诱导的条件为温度25°C，湿度60%，光 照强度8001x，光期5h/d，45天后，转接入分化培养基MS+NAAO. lmg/L+KTO. 5mg/L+70mg/L氯 化钠上诱导愈伤组织分化，分化的条件为温度27°C，湿度80%，光照强度30001x，光期16h/ d，待分化出来的幼苗长至2cm左右，在室内自然光下闭口炼苗一周，在移栽前开盖炼苗2d， 然后移栽到高压灭菌过的蛭石：珍珠岩=2:1的营养钵中，待长出新根后进行第二步移栽， 移栽基质为田园土 ：蛭石=2:1，湿度85%，光照强度50001x，光期16h/d，再生成活率86%。 [0008] 实施例2 选用柄果槲寄生幼嫩的叶片，用肥皂水中浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净 工作台上用1 %的碘化钾消毒9分钟，无菌水冲洗5次，接种入培养基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上进行愈伤组织的诱导，诱导的条件为温度25°C，湿度60%，光 照强度8001x，光期5h/d，45天后，转接入分化培养基MS+NAAO. 2mg/L+KTl. 0mg/L+100mg/ L氯化钠上诱导愈伤组织分化，分化的条件为温度27 °C，湿度80%，光照强度30001x，光期 16h/d，待分化出来的幼苗长至2cm左右，在室内自然光下闭口炼苗一周，在移栽前开盖炼 苗2d，然后移栽到高压灭菌过的蛭石：珍珠岩=2:1的营养钵中，待长出新根后进行第二步 移栽，移栽基质为田园土 ：蛭石=2: 1，湿度85%，光照强度50001x，光期16h/d，再生成活率 90%。
[0009] 实施例3 选用柄果槲寄生幼嫩的叶片，用肥皂水中浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟，在超净 工作台上用1 %的碘化钾消毒9分钟，无菌水冲洗5次，接种入培养基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上进行愈伤组织的诱导，诱导的条件为温度25°C，湿度60%，光 照强度8001x，光期5h/d，45天后，转接入分化培养基MS+NAAO. 3mg/L+KTl. 5mg/L+150mg/ L氯化钠上诱导愈伤组织分化，分化的条件为温度27°C，湿度80%，光照强度30001x，光期 16h/d，待分化出来的幼苗长至2cm左右，在室内自然光下闭口炼苗一周，在移栽前开盖炼 苗2d，然后移栽到高压灭菌过的蛭石：珍珠岩=2:1的营养钵中，待长出新根后进行第二步 移栽，移栽基质为田园土 ：蛭石=2: 1，湿度85%，光照强度50001x，光期16h/d，再生成活率 89%。
【权利要求】
1. 一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：柄果槲寄生的叶片经消毒处 理，接种入培养基MS+6-BA2. 5mg/L+NAA0. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上进行愈伤组织的诱导，45 天后，转接入分化培养基MS+NAAO. 1?0· 3mg/L+KT0. 5-1. 5mg/L+70-150mg/L氯化钠上诱导 愈伤组织分化，待分化出来的幼苗长至2cm左右，取出炼苗移栽，统计成活率。
2. 根据权利要求1所述的一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：所述 的消毒处理为：选用柄果槲寄生幼嫩的叶片，用肥皂水中浸泡三分钟，自来水冲洗25分钟， 在超净工作台上用1 %的碘化钾消毒9分钟，无菌水冲洗5次。
3. 根据权利要求1所述的一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：愈伤 组织诱导的条件为温度25°C，湿度60%，光照强度8001x，光期5h/d。
4. 根据权利要求1所述的一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：柄果 槲寄生分化培养的培养基中加入了高浓度的氯化钠，可以促进细胞的分化和次生代谢物质 的积累。
5. 根据权利要求1所述的一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：愈伤 组织分化的条件为温度27°C，湿度80%，光照强度30001x，光期16h/d。
6. 根据权利要求1所述的一种柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：柄果 槲寄生炼苗移栽的方法为在室内自然光下闭口炼苗一周，在移栽前开盖炼苗2d，然后移栽 到高压灭菌过的蛭石：珍珠岩=2:1的营养钵中，待长出新根后进行第二步移栽，移栽基质 为田园土 ：蛭石=2:1，湿度85%，光照强度50001x，光期16h/d。
【文档编号】A01H4/00GK104186329SQ201410462989
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司