一种莪术的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种莪术的快速繁殖方法，包括叶片的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养、炼苗移栽等步骤，本发明方法所制备的莪术成活率高，生产成本低，生长周期短，遗传稳定性好，利于大规模推广种植。
【专利说明】一种莪术的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及莪术组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 莪术，姜科，β/rc應a zet/oaria 」/Pose,又称蓬莪茂、山姜黄、臭屎姜， 莪术为姜科、姜黄属多年生宿根草本，株高约1米；根茎圆柱形，肉质，具樟脑般香味，淡黄 色或白色；根细长或末端膨大成块根。栽培或野生于林荫下，中国多地、印度至马来西亚有 分布。产中国台湾、福建、江西、广东、广西、四川、云南、安徽等省区；印度至马来西亚亦有 分布。莪术根茎含挥发油，油中主成分为莪术呋喃烯酮占44. 93%，龙脑占4. 28%，大栊牛儿 酮占6. 16%，还含α -和β -菔烯，樟烯，柠檬烯，1，8-按叶素，松油烯，异龙脑，丁香烯，姜黄 烯，丁香烯环氧化物，姜黄酮，芳姜黄酮，莪术二酮以及莪术烯醇，异莪术烯醇等。另含二呋 喃莪术烯酮，莪术二醇。又含抗氧化剂活性的姜黄素类化合物。破血行气，消积止痛。用于 血瘀腹痛、肝脾肿大、心腹胀痛，积聚，妇女血瘀经闭，跌打损伤作痛饮食积滞。栽培或野生 于林荫下，莪术对生态环境要求比较严格，适宜种植区域狭窄，主要采用根茎栽植，成活率 低，组培方法成活率高，生产成本低，生长周期短，利于大规模推广种植。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供一种莪术的快速繁殖方法，由该方法所制备得 到的莪术成活率高，生产成本低，生长周期短，遗传稳定性好，利于大规模推广种植。
[0004] 本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的： 取莪术带叶柄的叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗35min， 超净工作台上0. 1%升汞消毒处理7min，滴两滴吐温-80,无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过 的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPM+NAAO. lmg/L+TDZO. 05mg/L+玉米素2mg/ L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照1000-20001x， 温度25±5°C，诱导出来的芽放入培养基改良WPM+IBAO. 01mg/L+6-BAlmg/L+玉米素 lmg/ L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照25001x，温度25±5°C，增殖培 养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPM+NAA1. 0mg/L+200mg/L活性炭+蔗糖15g/L+琼 脂4. Omg/L，pH5. 85,光照35001x，温度25±5°C，试管苗长约5cm，从培养瓶中取出，栽植于 10 X 10cm的营养钵中，营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土，光照ΙΟΟΟΟΙχ， 温度25±5°C，湿度80%，定期浇水，施肥，30天后统计成活率。
[0005] 采用本发明制备的莪术成活率为89%，周期短，污染小，生产成本低，利于大规模种 植。
[0006] 下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007] 实施例1 取莪术带叶柄的叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗35min， 超净工作台上0. 1%升汞消毒处理7min，滴两滴吐温-80,无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的 莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPM+NAAO. lmg/L+TDZO. 05mg/L+玉米素0. 5mg/ L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照1000-20001x， 温度25±5°C，诱导出来的芽放入培养基改良WPM+IBA0. Olmg/L+6-BAO. 8mg/L+玉米素 lmg/ L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照25001x，温度25±5°C，增殖培 养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPM+NAA1. 0mg/L+200mg/L活性炭+蔗糖15g/L+琼 脂4. Omg/L，pH5. 85,光照35001x，温度25±5°C，试管苗长约5cm，从培养瓶中取出，栽植于 10 X 10cm的营养钵中，营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土，光照ΙΟΟΟΟΙχ， 温度25±5°C，湿度80%，定期浇水，施肥，30天后统计成活率达84%。
[0008] 实施例2 取莪术带叶柄的叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗35min， 超净工作台上0. 1%升汞消毒处理7min，滴两滴吐温-80,无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的 莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPM+NAAO. lmg/L+TDZ0. 05mg/L+玉米素2. 5mg/ L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照1000-20001x， 温度25±5°C，诱导出来的芽放入培养基改良WPM+IBA0. 01mg/L+6-BAL 2mg/L+玉米素 lmg/ L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照25001x，温度25±5°C，增殖培 养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPM+NAA1. 0mg/L+200mg/L活性炭+蔗糖15g/L+琼 脂4. 0mg/L，pH5. 85,光照35001x，温度25±5°C，试管苗长约5cm，从培养瓶中取出，栽植于 10 X 10cm的营养钵中，营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土，光照ΙΟΟΟΟΙχ， 温度25±5°C，湿度80%，定期浇水，施肥，30天后统计成活率达85%。
[0009] 实施例3 取莪术带叶柄的叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍，流水冲洗35min， 超净工作台上0. 1%升汞消毒处理7min，滴两滴吐温-80,无菌水冲洗5-7遍，灭菌处理过的 莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPM+NAAO. lmg/L+TDZ0. 05mg/L+玉米素2. 5mg/ L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照1000-20001x， 温度25±5°C，诱导出来的芽放入培养基改良WPM+IBA0. 01mg/L+6-BAL 0mg/L+玉米素 lmg/ L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照25001x，温度25±5°C，增殖培 养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPM+NAA1. 0mg/L+200mg/L活性炭+蔗糖15g/L+琼 脂4. 0mg/L，pH5. 85,光照35001x，温度25±5°C，试管苗长约5cm，从培养瓶中取出，栽植于 10 X 10cm的营养钵中，营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土，光照ΙΟΟΟΟΙχ， 温度25±5°C，湿度80%，定期浇水，施肥，30天后统计成活率达85%。
【权利要求】
1. 一种莪术的快速繁殖方法，包括叶片的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培 养、炼苗移栽，其主要步骤如下： (1) 取莪术带叶柄的叶片，对其进行消毒处理； (2) 取步骤（1)灭菌处理过的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良 WPM+NAAO. lmg/L+TDZO. 05mg/L+玉米素0. 5-2. 5mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加 蔗糖 30g/L，琼脂 7g/L，pH5. 85,光照 1000-20001x，温度 25±5°C ; (3) 取步骤（2)诱导出来的芽放入培养基改良WPM+IBA0. Olmg/L+6-BAO. 8-1. 2mg/L+玉 米素 lmg/L进行增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5. 85,光照25001x，温度25±5°C; (4) 取步骤（3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPM+NAA1. 0mg/L+200mg/L 活性炭 + 蔗糖 15g/L+ 琼脂 4. Omg/L，ρΗ5· 85,光照 35001x，温度 25±5°C ; (5) 生根后的莪术试管苗进行野外炼苗移栽。
2. 按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1)中所述莪 术无菌叶片的获得为，取莪术带叶柄的叶片，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污渍， 流水冲洗35min，超净工作台上0. 1%升汞消毒处理7min，滴两滴吐温-80,无菌水冲洗5-7 遍。
3. 按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2) (3) (4) 改良WPM为硝酸氨减少到原来的3/4,含钙物质增加原来的1/4。
4. 按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2)和（3)中 加入了一定含量的玉米素对莪术丛生芽的诱导和增殖都具有促进作用。
5. 按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5)中的炼苗 移栽方法为试管苗长约5cm，从培养瓶中取出，栽植于10 X 10cm的营养钵中，营养钵基质为 经过高温消毒并加有有机肥料的粪土，光照ΙΟΟΟΟΙχ，温度25±5°C，湿度80%，定期浇水，施 月巴，30天后统计成活率。
【文档编号】A01H4/00GK104206277SQ201410463184
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司