本发明涉及吡虫啉与多杀菌素组成的混配剂在韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治中的应用，属于复配农药技术领域。
背景技术：
杀虫剂的合理混配不仅能够提高杀虫剂的防效，扩大杀虫谱和使用范围，同时也可以减少杀虫剂的用药量及降低防治成本。此外，由于害虫对于混配剂中不同作用机制的每一种药剂的抗性机制难以同时存在，而难以同时对多种不同作用方式的杀虫剂的产生抗性，因此，杀虫剂混配使用还有利于有效地延缓害虫抗药性的发展。韭菜迟眼蕈蚊(BradysiaodoriphagaYangetZhang)，幼虫俗称韭蛆，属双翅目，眼蕈蚊科，迟眼蕈蚊属，是我国特有的对韭菜等蔬菜生产造成严重危害的地下害虫。韭菜迟眼蕈蚊幼虫以取食韭菜根部并钻蛀韭菜假茎为害，严重时，可造成韭菜枯萎倒伏、死亡，对韭菜生产造成严重损失。化学防治因具有作用快、防效好的特点，在韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治中应用广泛。由于韭蛆以幼虫钻蛀韭菜地下根茎危害，目前，主要是通过使用毒死蜱、辛硫磷等高毒有机磷农药对韭菜灌根的方法进行韭蛆的化学防治。这种用高毒农药对韭菜灌根施药防治韭蛆的方法，具有田间用药量大，使韭菜和土壤中的农药残留量超标，对人等非靶标生物的毒害作用强等缺点。因此，筛选可用于韭蛆防治的高效、环境友好的杀虫药剂及药剂组合，减少高毒农药的使用及使用量，是韭蛆化学防治及韭菜安全生产中亟待解决的问题。目前，用于防治韭蛆的杀虫剂混配剂报道较少，仅见50％毒死蜱·氯氰菊酯乳油，20％辛硫磷·毒死蜱乳油用于韭蛆防治的报道。有研究报道了200mg/L噻虫胺与18mg/L高效氯氰菊酯、200mg/L噻虫胺与25mg/L氟铃脲组成的两种混剂对韭蛆的毒力。此外，还有研究测定了吡虫啉与三种有机磷杀虫剂混配对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力，其中吡虫啉与辛硫磷以1:5浓度比组成的混配剂对韭蛆的增效系数达338.5。目前，有研究公开了吡虫啉与多杀菌素组成的混配剂在蚜虫以及蓟马中的应用(中国发明专利公开号：CN102578132A和CN101305723A)。蚜虫、飞虱是同翅目昆虫并具有刺吸式口器，蓟马是缨翅目昆虫，而韭菜迟眼蕈蚊是双翅目昆虫。化学防治双翅目昆虫与防治同翅目的刺吸式口器害虫，以及与防治缨翅目害虫等所用的杀虫药剂不同，如多杀菌素可以很好地防治鳞翅目和双翅目昆虫，而对蚜虫和蓟马无效。目前，还未见将吡虫啉与多杀菌素组成混配剂用于防治双翅目的地下害虫——韭菜迟眼蕈蚊幼虫的研究报道。
技术实现要素：
本发明的目的是提供吡虫啉与多杀菌素混配剂在韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治中的用途。吡虫啉作为一种新烟碱类杀虫剂，是昆虫神经系统中烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinicacetylcholinereceptors，nAChRs)的激动剂。吡虫啉对害虫的作用方式主要以胃毒作用为主，是害虫防治的有效药剂。同时，吡虫啉对人等哺乳动物低毒。因此，吡虫啉杀虫剂具有高效低毒的特点。吡虫啉对同翅目昆虫蚜虫、缨翅目昆虫蓟马等均有很好的防效。多杀菌素属于大环内酯类的生物杀虫剂，作用于昆虫的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)，使之被持续激活而引起乙酰胆碱(ACh)延长释放反应，多杀菌素同时也作用于γ-氨基丁酸(GAGB)受体，改变了GABA门控氯通道的功能，进一步促进了其杀虫活性的提高。多杀菌素在烟碱型乙酰胆碱受体上的结合位点不同于烟碱和吡虫啉。多杀菌素对昆虫具有快速触杀和摄食毒性。多杀菌素能有效控制鳞翅目、双翅目和缨翅目害虫，对有益生物没有大的影响，具有良好的生物与环境兼容性，适用于蔬菜、果树、园艺、农作物上使用。但是对刺吸式口器害虫蚜虫等效果差。因此，为筛选和开发可用于韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治的高效、环境友好的杀虫剂混配剂，在研究了环境兼容性好的吡虫啉与多杀菌素组成的混配剂对韭蛆的室内毒力的基础上，本发明公开了吡虫啉与多杀菌素组成的混配剂，可用于韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治的用途。本发明中，将吡虫啉与多杀菌素按照重量比为1:5—1:40制成混配剂，优选重量比1:20的混配剂，对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的杀虫活性不是两种组分杀虫活性的简单的加合，而是具有显著的增效作用。其中，以1:20重量比组成的吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的LC50为5.389mg/L，对韭蛆显示了很高的杀虫活性，而且重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂的共毒系数达到了1287.58，增效作用极为显著，超过了已报道的吡虫啉与辛硫磷以1:5浓度比组成的混配剂对韭蛆的毒力及增效系数(王志超,王思一,史雪岩,宋敦伦,高希武,吡虫啉与三种有机磷杀虫剂混配对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定,植物保护学报,2014,41(4):511-512)。为制备吡虫啉与多杀菌素组成的混配剂，以及获得其对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力及共毒系数，本发明的技术方案是这样解决的：首先将吡虫啉与多杀菌素分别按照重量比1:5、1:10、1:20、1:40(1:5—1:40)制成混配剂，优选重量比1:20制成混配剂。再进行不同重量比的吡虫啉与多杀菌素的混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内生物测定。采用分别对韭菜和3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫进行杀虫药剂处理后，再饲喂3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的方法，进行不同重量比的吡虫啉与多杀菌素的混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内生物测定。根据室内生物测定结果，通过计算，最后获得吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力以及混配剂的共毒系数。结果表明，吡虫啉与多杀菌素按照重量比1:5—1:40组成的混配剂，优选1:20重量比的混配剂，对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的杀虫活性不是两种组分杀虫活性的简单的加合，而是具有显著的增效作用(表1)。其中，重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的LC50为5.389mg/L，对韭蛆显示了很高的杀虫活性，而且重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂的共毒系数达到了1287.58，超过了已报道的吡虫啉与辛硫磷以1:5浓度比组成的混配剂对韭蛆的毒力及增效系数(王志超,王思一,史雪岩,宋敦伦,高希武,吡虫啉与三种有机磷杀虫剂混配对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定,植物保护学报,2014,41(4):511-512)。重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫具有很好的防治效果，可用于韭菜生产中的有效防治韭蛆。由于吡虫啉及多杀菌素均为选择性的环境友好杀虫剂，因此，在韭菜生产中，可以使用吡虫啉与多杀菌素按照重量比1:5—1:40组成的混配剂，优选重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂，进行韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治，这可以减少农药使用量以及解决不使用高毒有机磷农药防治韭蛆的问题。为进行韭菜的无公害生产，提供了高效、环境兼容性好的杀虫剂混配剂进行韭菜迟眼蕈蚊幼虫防治的应用。具体实施方式下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。实施例1：杀虫药剂对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定韭菜迟眼蕈蚊是在培养皿中用韭菜假茎作饲料，在中国农业大学昆虫毒理室已连续饲养1年的室内种群。饲养条件：在培养皿中倒入2.5％的琼脂保湿，并铺圆形滤纸，用细毛笔轻轻挑取韭菜迟眼蕈蚊幼虫于滤纸上，饲喂1～2cm韭菜假茎小段。将培养皿置于温度23±1℃，相对湿度RH60％条件下饲养，饲养期间不接触任何杀虫药剂。由于3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的体型较大，取食量较大，危害严重，因此，杀虫药剂对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定以3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫作为供试昆虫。供试杀虫药剂：95.3％吡虫啉(imidacloprid)原药，江苏常隆化工有限公司；99.1％多杀菌素(spinosad)原药，美国陶氏益农公司。重量比为1:5—1:40的吡虫啉与多杀菌素混配剂的配制及其对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定(以1:20重量比的吡虫啉与多杀菌素混配剂为例)：首先将吡虫啉与多杀菌素以1:20的重量比组成混配剂，再用0.1％TritonX-100水溶液将1:20重量比的混配剂依次稀释为5个不同的浓度梯度(33.6mg/L、16.8mg/L、8.4mg/L、4.2mg/L、2.1mg/L)，用于测定重量比为1:20的混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力。重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定，采用分别对韭菜和3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫进行杀虫药剂处理后，再饲喂3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的方法进行，此法的测定结果同时体现了胃毒和触杀的共同毒杀作用。具体为：在六孔生测板中倒入熔融的2.5％琼脂至2mm厚，待冷却凝固后，在琼脂上铺上略小于生测孔直径的圆形滤纸。将洗净晾干的粗细一致的韭菜假茎剪成1.5cm长的小段，分别浸于从低浓度到高浓度的杀虫剂溶液中15s，取出晾干后，置于生测孔中的圆形滤纸上。用湿润的细毛笔挑取3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫于浸虫网中，将浸虫网完全浸没于药液中15s后取出，放在吸水纸上去除多余水分后，将网中幼虫用毛笔轻轻挑入放有经药液浸渍处理的韭菜假茎的六孔生测板中。用宣纸粘贴生测板的生测孔口。将生测板置于温度23±1℃，相对湿度60％条件下阴暗处培养。每一浓度药剂处理均进行3次重复，每一重复采用20头试虫进行。用0.1％的TritonX-100的蒸馏水处理的3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫作为对照，死亡率小于10％为有效测定。24h后观察并记录3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的死亡数，以毛笔轻触虫体，虫体不动为死亡，计算死亡率。为了计算混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的联合毒力作用的共毒系数，使用同样的方法，测定了吡虫啉单剂、多杀菌素单剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力。实施例2：计算吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力以及共毒系数。吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力用LC50、95％置信区间(95％CL)衡量。针对5个不同浓度的混配剂处理3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫后的死亡率，将混配剂的浓度与韭蛆的死亡率带入POLO1.0软件，计算LC50及95％置信区间等，获得混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力。用同样的方法计算获得了吡虫啉单剂、多杀菌素单剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力。混配剂中，两种杀虫药剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的联合毒力作用，以共毒系数(co-toxicitycoefficient,CTC)值衡量。使用Excel2003计算混配剂中两种杀虫药剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的CTC。CTC的计算参照孙云沛法(SunYP,JohnsonER.Analysisofjointactionofinsecticidesagainsthouseflies[J].Econ.Entomol.,1960,10(53):887-891)进行。计算公式为：毒力指数(TI)＝(标准药剂的LC50/供试药剂的LC50)×100混剂实际毒力指数(ATI)＝(标准药剂单用的LC50/混剂的LC50)×100混剂理论毒力指数(TTI)＝ATI(A)×A在混剂中所占百分比+ATI(B)×B在混剂中所占百分比共毒系数(CTC)＝[混剂实际毒力指数(ATI)/混剂理论毒力指数(TTI)]×100若CTC<80,表明2种药剂混用为拮抗作用；若80<CTC<120,则为相加作用；若CTC>120,则为增效作用。重量比为1:5—1:40的吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的毒力及共毒系数结果，见表1。表1：吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的毒力及共毒系数吡虫啉与多杀菌素以重量比1:5—1:40组成混配剂，优选重量比1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂，对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的杀虫活性不是两种组分杀虫活性的简单的加合，而是具有显著的增效作用。其中，重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的LC50为5.389mg/L，对韭蛆显示了很高的杀虫活性，而且重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混剂的共毒系数达到了1287.58。吡虫啉与多杀菌素以重量比1:5—1:40组成的混配剂，优选重量比为1:20的吡虫啉与多杀菌素混配剂，对3龄韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力及共毒系数均较高，可用于韭菜生产中有效防治韭蛆。本发明的吡虫啉与多杀菌素混配剂具有环境兼容性好、对哺乳动物低毒的特点。本发明获得的吡虫啉与多杀菌素组成的混配剂可以替代韭蛆防治的高毒农药，有效进行韭菜生长中的韭蛆防治，解决了韭蛆化学防治及韭菜安全生产中减少高毒农药使用的问题，为进行韭菜的无公害生产，提供了高效、环境兼容性好的杀虫剂混配剂。