一种台湾长果桑组培体系的建立方法与流程

文档序号:12510775阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种台湾长果桑组培体系的建立方法,其特征在于包括以下步骤:

步骤1、外植体采集及消毒:采取当年生萌动状态的饱满嫩枝作为外植体,在流水下冲洗 6h,浸泡于7%洗衣粉溶液12分钟,软毛刷7%洗衣粉溶液轻轻刷洗材料,自来水以滴水的形式冲洗 97min,蒸馏水冲洗 7次,于超净工作台中以78%乙醇溶液浸泡70s,无菌水冲洗7次,含有0.09%吐温-20的0.8%升汞溶液消毒17min,无菌水冲洗7次后用无菌滤纸吸干表面的水分备用;

步骤2,诱导培养:将经步骤(1)处理后的嫩枝剪成约1.8cm的茎段并接种到诱导培养基进行丛生芽诱导培养,接种后每天光照16小时,光照强度为3000lx,培养温度为26℃,空气相对湿度为78%的条件下培养37天后统计诱导情况;

步骤3,丛生芽增殖:将步骤(2)诱导培养得到丛生芽接种到增殖培养基进行不定芽增殖培养,接种后置于每天光照16小时,光照强度为3000lx,置于培养温度为26℃,空气相对湿度为83%的条件下培养45天后统计发芽数;

步骤4,生根培养:将步骤(3)增殖中获得的植株从基部切下并接种至生根培养基中进行诱导生根,接种后每天光照16小时,光照强度为3400lx,培养温度为26℃,空气相对湿度为86%的条件下培养37天后统计生根情况;

步骤5 ,炼苗移栽:将生根培养基上获得的具备移栽条件的瓶苗进行炼苗,瓶苗移至常温下 7天后,打开瓶盖 5天,然后洗去附着于苗根系上的培养基,在 1000 倍的生物菌剂中浸泡 17min,然后移栽至盛有所设计的移栽培养基质的容器袋中进行培养,每个容器袋移栽1株生根苗,置于带有遮阴网的自动喷雾的塑料大棚内保温保湿温度控制在 37℃,湿度应保持在 89%左右,避免阳光直射,移栽35天后统计成活率。

2.根据权利要求1所述的一种台湾长果桑组培体系的建立方法,其特征在于步骤(2)所述的诱导培养基为:MS+1.3mg/L NAA+8.4mg/L 6-BA+3.6mg/L KT+1.65g/L AC+36g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH为5.9。

3.根据权利要求1所述的一种台湾长果桑组培体系的建立方法,其特征在于步骤(3)所述的增殖培养基为:MS+0.7mg/L 2,4-D+6.5mg/L 6-BA+1.4mg/L NAA+1.8g/L AC+ 35g/L蔗糖+6.5g/L琼脂,pH为5.4~5.9。

4.根据权利要求1所述的一种台湾长果桑组培体系的建立方法,其特征在于步骤(4)所述的生根培养基为:White+1.3mg/L NAA+3.3mg/L IBA+35g/L蔗糖+8g/L琼脂,pH为5.9。

5.根据权利要求1所述的一种台湾长果桑组培体系的建立方法,其特征在于步骤(5)所述的移栽培养基质为由泥炭土:蛭石:珍珠炭:椰糠=1:3:2:2混合而成基质。

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