本发明涉及植物扦插繁育技术领域，具体涉及一种红花龙胆的扦插繁育方法。
背景技术：
红花龙胆，又称红龙胆、龙胆草、土白莲、冷风吹和星秀花，为龙胆科多年生草本植物，是中国特有植物，分布于我国云南、四川、贵州、甘肃、陕西、河南等地区；生于高山灌丛、草地及林下，海拔570－1750米、以及1800－2400米处均可生长红花龙胆。红花龙胆，是《中华人民共和国药典》2015年版新收载品种，一般高20－50厘米，具短缩根茎；根细条形，黄色；茎直立。基生叶呈莲座状，椭圆形、倒卵形或卵形；茎生叶宽卵形或卵状三角形。花单生茎顶，无花梗；花萼膜质，有时微带紫色，花冠淡红或淡紫红色，筒状，上部具紫色纵纹，褶顶端具细长流苏。蒴果内藏或仅先端外露，淡褐色，长椭圆形，种子淡褐色，近圆形，具翅。花果期10月至翌年2月。
红花龙胆具有较高的观赏价值及药用价值，其全草入药，能清热、消炎、止咳，可治肝炎、支气管炎等症，一般常将红花龙胆用作清热利湿、凉血解毒之草药，用于治疗肺炎及肝胆疾病。
以贵州省的红花龙胆为例，贵州省的红花龙胆资源分布范围较广，但储藏量较小，随着近年来旅游业的发展及人为破坏的加剧等因素，使得红花龙胆资源日趋匮乏，野生资源已远不能满足药用市场的需求。因此有必要对其进行人工栽培技术的研究，解决种子种苗繁育的关键技术。然而，在现有技术中，关于红花龙胆的栽培技术方案资源缺乏，发明人通过大量的文献均未发现有专门针对红花龙胆的栽培技术。
有鉴于此，发明人在通过大量的实践和研究，提出了一种红花龙胆的扦插繁育方法。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种红花龙胆的扦插繁育方法，该方法经济适用，操作较为简单方便，育苗周期短，并且扦插苗的成活率高。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
本发明提供一种红花龙胆的扦插繁育方法，包括以下步骤：
(1)扦插繁育地的选择与处理：选择地势平坦的地段作为繁育地，除去杂物、杂草和石块；
(2)扦插苗床制作：在处理后的繁育地上铺设一层泥土作为扦插基质，将扦插基质制作成长为5～7米，宽为1～1.5米，高为5～20厘米的苗床，对扦插基质进行消毒处理；
(3)插穗选取及制作：选用健壮而无病虫害的植株，斜剪成插穗，每个插穗有2～4个茎节；
(4)插穗生根处理：将剪好的插穗用水浸泡1～5小时，再用植物生长调节剂浸泡0.5～2小时，其中，植物生长调节剂为浓度为40mg/L～160mg/L的萘乙酸；
(5)扦插：将插穗从植物生长调节剂中取出后立即进行扦插，采用直插法，扦插深度为1～3cm，扦插后立刻对苗床及插穗浇水，并在苗床上方搭建遮荫棚；
(6)插后管理：保持扦插基质湿度，并进行施肥、除草作业。
作为进一步优选技术方案，所述步骤(2)中，扦插前2～3天用高锰酸钾溶液对扦插基质进行消毒处理，高锰酸钾溶液的重量百分比浓度为0.02％～1.0％，优选0.05％～0.5％；扦插前2～3小时对苗床用水浇透一次。
作为进一步优选技术方案，所述步骤(3)中，将选用的植株用水均匀喷洒后，用消毒后的剪刀剪截成插穗，上切口平剪或斜剪，下切口斜剪成马蹄形。
作为进一步优选技术方案，所述步骤(5)中，扦插的株行距为(6～12cm)×(6～12cm)；优选，株行距为(8～10cm)×(8～10cm)；更优选，株行距为10cm×10cm。
作为进一步优选技术方案，所述步骤(6)中，根据扦插基质湿度、温度及外界天气情况进行浇水，晴天时每天浇水一次，阴天时2～3天浇水一次，雨天不浇水，定期进行除草，并在扦插后20～25天喷洒一次1/2MS培养液。
作为进一步优选技术方案，所述步骤(6)中，遮荫棚内温度保持在16℃～30℃；优选18℃～25℃。
作为进一步优选技术方案，所述遮荫棚的遮荫度为50％～80％；优选，60％～70％。
作为进一步优选技术方案，所述扦插时间为每年4月中旬至5月中旬；进一步的，扦插时间为每年4月15号至5月15号。
本发明还提供一种如上述发明内容任一项所述的红花龙胆的扦插繁育方法，其中，所述步骤(4)中，所述植物生长调节剂选用浓度为10mg/L～40mg/L的6－苄氨基腺嘌呤。
本发明还提供一种如上述发明内容任一项所述的红花龙胆的扦插繁育方法，其中，所述步骤(4)中，以生根剂代替植物生长调节剂，且生根剂选用重量百分比浓度为0.2％～5％的生根粉。
根据本发明提供的红花龙胆的扦插繁育方法，扦插效率高，成活率高，约30天可以生根，生根率可达90％，成活率可达到96％以上。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明是根据红花龙胆的生长特性，从扦插繁育地的选择与处理、扦插苗床制作、插穗选取及制作、插穗生根处理、扦插及插后管理等方面进行独创性的工艺组合，提供了一种行之有效的红花龙胆的扦插繁育方法，达到了方法操作简单，经济适用，成本低，扦插效率高以及种苗成活率高的效果，填补了红花龙胆种苗人工繁育的空白。
(2)本发明对插穗先用水浸泡一段时间，再用萘乙酸、6－苄氨基腺嘌呤或生根粉溶液浸泡一段时间，可有效提高扦插成活率及生根率。
(3)本发明提高了红花龙胆扦插苗的成活率，其成活率可达到96％以上，并且操作简单易行，经济实用，成本低，为红花龙胆大面积种植提供技术支持和可能；具有广阔的产业化前景，这项成果的推广应用，将极大提高红花龙胆的供应能力，满足药用市场对红花龙胆的需求，最大程度的实现生态、经济和社会三大效益。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
根据本发明的一个方面，本发明提供了一种红花龙胆的扦插繁育方法，包括以下步骤：
(1)扦插繁育地的选择与处理：选择土壤疏松、排灌性好、地势平坦的地段作为繁育地，并进行翻地，除去杂物、杂草和石块；
(2)扦插苗床制作：在处理后的土壤上铺设一层肥沃、较细且疏松的泥土，选用处理后的土壤和泥土作为扦插基质，将扦插基质制作成长为5～7米，宽为1～1.5米，高为5～20厘米的苗床，对扦插基质进行消毒处理；
(3)插穗选取及制作：选用健壮而无病虫害的植株，斜剪成插穗，每个插穗有2～4个茎节；
(4)插穗生根处理：将剪好的插穗用水浸泡1～5小时，再用浓度为40mg/L～160mg/L的萘乙酸浸泡0.5～2小时；
(5)扦插：将插穗从萘乙酸中取出立即进行扦插，采用直插法，扦插深度为1～3cm，扦插后立刻对苗床及插穗浇水，并在苗床上方搭建遮荫棚；
(6)插后管理：定期进行浇水，保持扦插基质湿度，并进行施肥、除草作业。
作为本发明的一种优选实施方式，本发明中，所述步骤(1)中，扦插土壤要选择土壤疏松、排灌性好、地势平坦、开阔通风的地段作为繁育地，并且土壤具有一定的通透性，又具有一定的保水能力，即透气性和保水性均要好，进行机械翻地，然后除去扦插地内的杂物、杂草和石块，并粉碎较大的石块，例如山地红壤土或棕壤土等。
作为本发明的一种优选实施方式，所述步骤(2)中，扦插前2～3天用高锰酸钾溶液对扦插基质进行消毒处理，高锰酸钾溶液的重量百分比浓度为0.02％～1.0％，优选0.05％～0.5％；扦插前2～3小时对苗床用水浇透一次。
可选的，高锰酸钾溶液的重量百分比浓度为0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％和1.0％。
可选的，扦插前2天、2.5天或3天用高锰酸钾溶液对扦插基质进行消毒处理；扦插前2小时、2.5小时或3小时对苗床用水浇透一次。
本发明中，在扦插基质材料中，在其上层铺上一层细细的泥土，并且泥土越细越好，细土有利于提供养分，并且保水效果好。
苗床的制作规格可以为长为5～7米，宽为1～1.5米，高为5～20厘米；优选的，长为5～7米，宽为1.2～1.5米，高为8～10厘米。
可选的，苗床的制作规格为长为5米，宽为1.2米，高为8厘米；或者长为6米，宽为1米，高为10厘米；或者长为7米，宽为1.5米，高为15厘米；或者长为7米，宽为1.5米，高为20厘米。
进一步地，作为一种可选的实施方式，制作的苗床规格长为6米，宽为1米，高为10厘米，在扦插前3天用高锰酸钾溶液对扦插基质进行消毒处理，高锰酸钾溶液的重量百分比浓度为0.05％，扦插前3小时对苗床用水浇透一次。
作为本发明的一种优选实施方式，所述步骤(3)中，将选用的植株用水均匀喷洒后，用消毒后的剪刀剪截成插穗，上切口平剪或斜剪，下切口斜剪成马蹄形。
本发明中，选用健壮而无病虫害的植株枝条，即该植株有叶、有芽、长势良好、无枯萎脱落，用水均匀喷洒植株，将待使用的剪刀进行消毒，然后将植株剪截成插穗，每个插穗有2～4个茎节，优选3～4个茎节，剪截方式采用上切口平剪或斜剪，下切口斜剪成马蹄形。
可选的，每个插穗有2个、3个或4个茎节。
作为本发明的一种优选实施方式，本发明中，所述步骤(4)中，先将步骤(3)中剪好的插穗用水浸泡1～5小时，优选2～3小时，并配制不同浓度的植物生长调节剂，例如浓度为40mg/L～160mg/L的萘乙酸(以下简称NAA)，将剪好的插穗从水中取出，轻轻甩去插穗基部的水分，马蹄形的斜切口朝下，以40～50株为一捆，置于不同浓度的NAA溶液中，浸泡0.5～2小时，优选1～2小时；需要说明的是，植物生长调节剂溶液的高度以浸泡插穗下端2个茎节为宜。
可选的，用水浸泡时间为1小时、2小时、3小时、4小时或5小时；以40株或50株为一捆，置于不同浓度的NAA溶液中，浸泡0.5小时、1小时、1.5小时或2小时。
本发明中，所配制的NAA溶液典型但非限制性的浓度为：40mg/L、80mg/L、120mg/L和160mg/L。
作为本发明的一种优选实施方式，所述步骤(5)中，扦插的株行距为(6～12cm)×(6～12cm)；优选，株行距为(8～10cm)×(8～10cm)。
可选的，扦插的株行距为10cm×10cm、6cm×8cm、8cm×10cm、10cm×12cm或12cm×12cm。
本发明中，扦插深度为1～3cm，优选2～3cm。扦插时，将扦插苗床编号，扦插苗床内不同插穗处理采用木棍分隔开来，并分别贴好标签，标签内记录试验地的位置、处理方法、插穗数目及扦插日期等，扦插后立刻对苗床及插穗浇水，并在苗床上方搭建遮荫棚。
可选的，扦插深度为1cm、2cm或3cm。
作为本发明的一种优选实施方式，所述步骤(6)中，根据扦插基质湿度、温度及外界天气情况进行浇水，晴天时每天浇水一次，阴天时2～3天浇水一次，雨天不浇水，定期进行除草，并在扦插后20～25天喷洒一次1/2MS培养液。
可选的，在扦插后20天、21天、22天、23天、24天或25天喷洒一次1/2MS培养液。
作为本发明的一种优选实施方式，所述步骤(6)中，遮荫棚内温度保持在16℃～30℃；优选18℃～25℃。
可选的，遮荫棚内温度为16℃、17℃、18℃、19℃、20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃或30℃。
本发明中，扦插后要避免扦插苗被太阳直射，扦插苗不能晒根部且不能积水，保持一定的湿度，并根据扦插基质湿度、温度及外界天气情况进行浇水，遮荫棚内可以建设排水的沟渠；定期除草，预防外界的破坏，每天观察插穗的生长情况，优选25天后喷洒一次1/2MS培养液。
所述1/2MS培养液是将MS培养液中的微量元素减少到原来的1/2。
作为本发明的一种优选实施方式，所述遮荫棚的遮荫度为50％～80％；优选，60％～70％。
可选的，遮荫棚的遮荫度为50％、55％、60％、65％、70％、75％或80％。
作为本发明的一种优选实施方式，所述扦插时间为每年4月中旬至5月中旬。
可选的，扦插时间为每年4月15号至5月15号。
根据本发明的另外一个方面，本发明提供的红花龙胆的扦插繁育方法，在插穗生根处理步骤中，植物生长调节剂选用10mg/L～40mg/L的6－苄氨基腺嘌呤(以下简称6－BA)。
本发明中，所配制的6－BA溶液典型但非限制性的浓度为：10mg/L、20mg/L、30mg/L和40mg/L。
根据本发明的另外一个方面，本发明提供的红花龙胆的扦插繁育方法，在插穗生根处理步骤中，生根剂选用重量百分比浓度为0.2％～5％的生根粉(以下简称ABT)。
本发明中，所配制的ABT溶液典型但非限制性的重量百分比浓度为：0.2％、0.5％、1％和5％。
下面将结合实施例和对比例对本发明做进一步详细的说明。
实施例1
本实施例一种红花龙胆的扦插繁育方法，包括以下步骤：
(1)扦插繁育地的选择与处理：选择土壤疏松、排灌性好、地势平坦的地段作为繁育地，并且土壤具有一定的通透性，又具有一定的保水能力，进行翻地，除去杂物、杂草和石块，并粉碎较大的石块。
(2)扦插苗床制作：在处理后的土壤上铺设一层肥沃的、疏松的、细细的泥土，将处理后的土壤和泥土作为扦插基质，将扦插基质制作成长为6米，宽为1.0米，高为10厘米的苗床，在扦插前3天用重量百分比浓度为0.05％高锰酸钾溶液对扦插基质进行消毒处理，扦插前3小时对苗床用水浇透一次。
(3)插穗选取及制作：选用健壮而无病虫害的植株，用水均匀喷洒植株，用消毒后的剪刀剪截成插穗，每个插穗有2～4个茎节；剪截方式采用上切口平剪或斜剪，下切口斜剪成马蹄形。
(4)插穗生根处理：将剪好的插穗用水浸泡2小时，并分别配制浓度为40mg/L、80mg/L、120mg/L和160mg/L的NAA溶液，将剪好的插穗从水中取出，轻轻甩去插穗基部的水分，马蹄形的斜切口朝下，以50株为一捆，置于不同浓度的NAA溶液中，浸泡1小时。
(5)扦插：将插穗从NAA溶液中取出立即进行扦插，采用直插法，扦插深度为2～3cm，扦插时，将扦插苗床编号，扦插苗床内不同插穗处理采用木棍分隔开来，并分别贴好标签，标签内记录试验地的位置、处理方法、插穗数目及扦插日期等，扦插后立刻对苗床及插穗浇水，并在苗床上方搭建遮荫棚。
(6)插后管理：扦插后要避免扦插苗被太阳直射，扦插苗不能晒根部且不能积水，保持一定的湿度，并根据扦插基质湿度、温度及外界天气情况进行浇水，晴天时每天浇水一次，阴天时2～3天浇水一次，雨天不浇水，定期除草，预防外界的破坏，每天观察插穗的生长情况，25天后喷洒一次1/2MS培养液。
本实施例中，遮荫棚的遮荫度为70％。
本实施例中，生根过程中遮荫棚内温度在18℃～25℃之间。
本实施例中，扦插时间为每年4月15号至5月15号。
实施例2
本实施例中，步骤(4)插穗生根处理：
将剪好的插穗用水浸泡2小时，并分别配制浓度为10mg/L、20mg/L、30mg/L和40mg/L的6－BA溶液，将剪好的插穗从水中取出，轻轻甩去插穗基部的水分，马蹄形的斜切口朝下，以50株为一捆，置于不同浓度的6－BA溶液中，浸泡1小时。
其他同实施例1。
实施例3
本实施例中，步骤(4)插穗生根处理：
将剪好的插穗用水浸泡2小时，并分别配制重量百分比浓度为0.5％和1％的ABT溶液，将剪好的插穗从水中取出，轻轻甩去插穗基部的水分，马蹄形的斜切口朝下，以50株为一捆，置于不同浓度的ABT溶液中，浸泡1小时。
其他同实施例1。
实施例4
本实施例中，步骤(4)插穗生根处理：
将剪好的插穗用水浸泡2小时，并配制浓度为40mg/L的NAA溶液，将剪好的插穗从水中取出，轻轻甩去插穗基部的水分，马蹄形的斜切口朝下，以50株为一捆，置于40mg/L浓度的NAA溶液中，分别浸泡0.5小时、1小时、1.5小时和2小时。
其他同实施例1。
对比例
本发明中，在插穗的生根处理中，以蒸馏水为对照，具体的讲，将剪好的插穗先用水浸泡2小时，再分别用蒸馏水浸泡0.5小时、1小时、1.5小时和2小时，而后取出立即进行扦插。
对各实验结果进行统计分析，记录不同插穗生根处理条件下插穗的根数、根长及株高，分析插穗的成活率，并计算其生长势，实施例1－3考察了试剂浸泡1小时条件下，不同试剂及试剂浓度对插穗生根的影响，试验结果见表1。其中，实施例1中的40mg/L、80mg/L、120mg/L和160mg/L的NAA溶液分别用NAA－1、NAA－2、NAA－3和NAA－4表示，实施例2中的10mg/L、20mg/L、30mg/L和40mg/L的6－BA溶液分别用6－BA－1、6－BA－2、6－BA－3和6－BA－4表示，实施例3中的0.5％和1％的ABT溶液分别用ABT－1和ABT－2表示，对比例中蒸馏水用CK表示。
表1不同试剂及试剂浓度浸泡1小时对插穗生根的影响
其中，生长势＝平均根数×平均根长×平均株高×成活率，SD代表标准偏差。
从以上实验可知，本发明实施例1－3中采用不同浓度的植物生长调节剂或生根剂对扦插苗的成活率及生长势具有一定的影响，采用40mg/L的NAA溶液，30mg/L的6－BA溶液以及1％的ABT溶液，均具有较高的成活率。
本发明实施例4考察了不同浸泡时间对插穗生根的影响，试验结果见表2。其中，NAA－0.5、NAA－1、NAA－1.5和NAA－2分别表示采用40mg/L的NAA溶液浸泡0.5小时、1小时、1.5小时和2小时；CK－0.5、CK－1、CK－1.5和CK－2分别表示用蒸馏水浸泡0.5小时、1小时、1.5小时和2小时。
表2不同浸泡时间对插穗生根的影响
从以上实验可知，同一试剂同一浓度条件下，不同浸泡时间对插穗生根也有一定的影响，以40mg/L的NAA溶液为例，浸泡1小时成活率最高，浸泡0.5小时生长势最好。因此，在一定的植物生长调节剂或生根剂条件下，选择适宜的浸泡时间也有利于提高扦插苗的成活率以及生长势。
综上，在红花龙胆的扦插繁育过程中，选择合适的植物生长调节剂或生根剂及适宜的植物生长调节剂或生根剂浓度，以及适宜的浸泡时间，可以有效提高红花龙胆扦插苗的成活率，极大提高红花龙胆的供应能力，满足市场的需求。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。