本发明涉及到种子的保存方法,具体地说是一种延长鳗草种子保存时间的方法。
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:海草场(Seagrassmeadows)生态系统和红树林、珊瑚礁生态系统一起被认为是近海三大典型的海洋生态系统。且国际研究结果表明,海草场生态服务价值明显高于红树林和珊瑚礁的生态服务价值。这里所述的“海草”系指唯一淹没在浅海水下的被子植物,分化出根、茎、叶、花和种子等器官,跟作为低等植物的“海藻”(如海带、浒苔等)截然不同。繁茂的海草场如同陆地上的森林,是健康海洋环境的重要标志,是珍贵的“海底草原”或“海底森林”。海草场是高生产力区,能为鱼虾蟹贝等海洋生物提供良好的栖息地、育苗场和庇护地,也有利于海鸟的栖息;同时为许多生物提供重要的食物来源。海草场也是地球上最有效的碳捕获和封存系统之一,联合国组织认为:应对气候变化最急迫的行动是维持和恢复"蓝碳"汇,海草和红树林、盐沼一道被优先重视。我国北方温带海域,尤其是山东沿海,是海草分布重要的区域。鳗草(ZosteramarinaL.)是我国北方沿海分布最广、数量最多的一种海草,且仅分布于我国北方温带海域,如山东、河北和辽宁等沿海水域。鳗草海草场是海参、贝类(包括章鱼)、虾蟹类和鱼类等海洋经济生物栖息、繁殖和藏身的良好场所。鳗草为多年生草本植物,主要沉生于地势平缓泥沙质浅水海底,从潮间带到潮下带的浅水区域皆有分布,最大水深可达30米,其叶子细长呈带状,俗称海韭菜,叶长可达3米以上。在我国北方温带海域,如山东沿海,鳗草海草场曾经非常繁茂,而今已经严重退化,海草稀疏呈块状分布,大都不连成片。在我国北方,沿海渔民常用鳗草海草作建造房屋顶的材料。海草房是胶东独有的标志性民俗符号,也被认为是世界上最具代表性的生态民居之一,主要分布在威海、烟台、青岛等沿海地区。这从另一侧面说明以往海草是多么的繁茂,而如今却所留无几。据估计,山东沿海鳗草海草场退化了80%以上。长期以来,海草在海洋中的重要作用未得到足够的重视,海草场面积已在全球范围内下降,不少海域濒于灭绝,并危及到其他海洋生物的生存,生物多样性也随之降低,沿岸生态系统也变得更加脆弱。近年来,人们开始认识到海草在海洋生态系统中的重要作用,开始重视对海草生态系统的保护和对退化的海草生态系统的生态恢复。利用人工收集的鳗草种子进行海草种子库建立是进行海草场重建和恢复的重要技术手段之一。目前,存在鳗草种子的长期保存问题,缺乏简便有效的鳗草种子长期保存方法。目前,鳗草种子保存方法有专利CN101816229A中已公开的保存条件,即4℃下高盐条件(45psu~70psu)保存。实际应用中,该保存方法的缺陷是但高盐保存条件下容易使种子进入深度休眠状态,来年春季播种后休眠中的种子很难短时间“苏醒”过来,一般至少需要一个月才能开始萌芽,造成野外播种的鳗草种子由于海洋生物摄食和易被风浪带走而会有很大损失,降低了野外种子萌芽率;虽然专利CN101816229A声明高盐保存的种子在低盐条件下萌芽率较高,但此方法保存的鳗草种子幼苗建成率较低,很难完成野外条件下鳗草幼苗的建成。因此,高盐保存条件不仅减缓播种后种子的萌芽,而且严重抑制和降低鳗草种苗建成,从而很难达到预想的恢复效果。另外,4℃保存种子,是公知常识,许许多多的种子都可以在这个温度保存。但是对于海洋植物鳗草种子而言,4℃保存,缺点很明显,种子在普通海水4℃保存,1-3个月后就会开始萌发,达不到种子较长期保存(至少保存到下一年的春季播种)的目的。另外,4℃条件下用普通海水保存种子,换水仍然比较频繁,而且种子因腐败而损失率仍然较高。总之,当前缺乏行之有效的鳗草种子长期保存方法。高盐度条件,超出了种子的自然耐受范畴,对种子的损害明显。普通冷藏箱4℃条件下保存种子,显然对鳗草而言,保存效果很差。技术实现要素:本发明的目的是提供一种延长鳗草种子保存时间的方法。为实现上述目的,本发明采用技术方案为:一种延长鳗草种子保存时间的方法,将普通天然海水过滤之后进行灭菌;将冲洗干净的鳗草种子直接放入装有上述灭菌海水的密封容器中;使浸泡有鳗草种子的海水温度保持在-0.2—0.2℃;并在种子保存过程中,定期换水。所述保存种子的普通海水其盐度范围32~35psu为宜。所述浸泡鳗草种子的海水温度为0℃。所述定期换水为每个月更换一次过滤后的灭菌海水。所述保存过程中定期换水并清理腐败的种子。所述清理腐败的种子时,在0℃的水浴中进行,避免水温的明显升高,刺激种子萌芽。本发明的有益效果是:采用本发明延长鳗草种子保存时间的方法,使用自然海水0℃条件下保存,能够促进种子保持同步休眠状态,而不萌芽,从而提高种子保存期间的保留率,并能延长鳗草种子的保存时间;同时能够保持鳗草种子较高的活力和品质,并且提高了鳗草幼苗的建成率。利用本发明方法能为人工播种提供高质量的鳗草种子及健康幼苗,有利于鳗草海草场的恢复与构建,快速恢复良好的海洋生态环境。种子的保存中,公知常识是4℃常用普通冷藏箱保存。但对鳗草种子而言,4℃保存的缺点,种子在普通海水4℃保存,1-3个月后就会开始萌发,达不到种子较长期保存(至少保存到下一年的春季播种)的目的。另外,4℃条件下用普通海水保存种子,换水仍然比较频繁,而且种子因腐败而损失率仍然较高。本发明在-0.2-0.2℃条件下(优选0℃)保存鳗草种子,其优势表现在以下几方面:首先,保证种子较高活性的条件下,大大地延长了鳗草种子的保存时间,达到了长期保存的目的;其次,-0.2-0.2℃(优选0℃)保存条件下,鳗草种子腐败率远远低于4℃条件下的腐败率,因此大大提高了鳗草种子保存期间的种子保留率;最后,由于-0.2-0.2℃(优选0℃)条件下腐败率远远低于4℃条件下,因此降低了鳗草种子保存期间的换水频率,极大地降低了人力成本,减少了对保存种子的扰动,避免种子发芽。另外,本发明在种子保存过程中,换水时更换的新水水温为-0.2-0.2℃(优选0℃),而不用室温海水,目的是避免水温的升高而刺激种子发芽;同样在清理腐败的种子时,在0℃的水浴中进行,也是为了避免水温的明显升高而刺激种子萌芽。总之,当前缺乏行之有效的鳗草种子长期保存方法。高盐度条件,超出了种子的自然耐受范畴,对种子的损害明显。普通冷藏箱4℃条件下保存种子,显然对鳗草而言,保存效果很差。附图说明图1为本发明一种延长鳗草种子保存时间的方法步骤流程图。具体实施方式下面结合附图对本发明进一步详细的描述。本发明方法不但在种子保存期间种子的保留率高,同时能够保持鳗草种子的良好品质和活力,以及大大延长了鳗草种子的保存时间,并且提高了鳗草幼苗的建成率。如图1所示,其步骤是:将普通海水(32-35psu)经滤孔直径为47毫米的玻璃纤维膜过滤,取5000毫升过滤后的海水放入全自动高压灭菌锅中灭菌5h。将1000粒鳗草种子放入盛有灭菌海水的广口瓶中密封保存,置于0℃条件下保存。实施例将5000毫升普通海水(34psu)进行过滤灭菌。随机选取1000粒鳗草种子,放入盛有盐度为34psu灭菌海水的广口瓶中,密封好后置于温度0℃条件下。每周进行一次等盐度灭菌海水更换,每2个月检查种子状况,对萌发的种子进行统计,并随机选取未萌芽的鳗草种子进行种子活性检验(萌芽实验),持续时间为13个月。盐度值34psu、温度0℃条件下保存鳗草种子保留率和幼苗建成率记录如表1所示。表1时间保留率(%)幼苗建成率(%)2015年8月100932015年9月92902015年11月86912016年1月82632016年3月80562016年5月79502016年7月65652016年9月5964鳗草种子在实施例条件下保存7个月后其保留率高达80%;11个月后,大部分鳗草种子(65%)仍然保留未发生腐烂,未发生腐烂的种子中大约65%仍然保持活性且能完成幼苗建成;运用本发明保存的鳗草种子13个月后,其保留率为59%,保留下的鳗草种子的幼苗建成率高达64%。因此,保存在0℃过滤灭菌普通海水中,鳗草种子的保存时间明显延长,可由原先有效保存时间的几个月延长至至少13个月,保存13个月的鳗草种子仍具有较高的种子保留率和幼苗建成率。本发明的应用将会在保持鳗草种子较高活性和幼苗建成率的前提下,使种子保存时间大大延长,从而实现鳗草种子库的建立,并且降低人力成本。本发明涉及到的幼苗建成率具体数据是通过实验获得,即取保存后未萌发的鳗草种子50粒(3个重复)浸泡在盛有自然海水(34psu)的容器中,在温度15℃、光周期12L:12D条件下静置培养2个月,对幼苗建成数进行记录,并对幼苗建成率进行计算。本实施例采用的高压灭菌锅为致微(厦门)仪器有限公司生产的型号为gi54dw的全自动高压灭菌锅,本实施例灭菌海水的来源水为青岛市第二海水浴场海水。本实施例所用纯水为纯水机处理生产的纯水,本实施例所用的纯水器为成都超纯科技有限公司生产的型号为UPT-H-10的纯水器,本实施例纯水器的来源水为市政自来水。本实施例中0℃采用低温培养箱保持恒定温度,产品型号:KRC-150CA,生产厂家:上海齐欣科学仪器有限公司;其他温度及光照需求采用智能光照培养箱保持恒定温度及光照,产品型号:MGC-250,生产厂家:上海一恒科技有限公司。当前第1页1 2 3