本发明属于领域水产养殖领域，具体涉及一种半刺厚唇鱼全人工育苗方法。
背景技术：
目前我国在淡水土著特色鱼类品种的保护与开发等方面的研究工作进展缓慢，基础相对薄弱。近年来，许多具有一定研究开发价值的淡水土著品种由于原产地生态环境日益恶化，捕捞产量大幅度减少；加上其人工繁育技术、营养需求及养殖技术等方面的研究尚未突破，市场上的商品鱼供不应求，受经济利益驱使的滥捕等竭泽而渔的现象更是屡禁不止，导致这些土著品种的种群数量和质量严重衰竭，野生种质资源存在灭绝的风险。鉴于此，有必要对我国特有的淡水土著品种开展资源保护、苗种扩繁及养殖开发等研究工作，以实现其野生种质资源的恢复与延续，满足市场需求。
半刺厚唇鱼是《南浦溪半刺厚唇鱼国家级水产种质资源保护区》（2015年农业部批准建立）和《松溪厚唇鱼国家级水产种质资源保护区》（2016年农业部批准建立）的主要保护物种，为闽浙苏一带常见的食用鱼，深受老百姓喜爱，市场前景广阔，具有重要的生态价值和营养价值。
由于种种原因，有关半刺厚唇鱼的相关研究资料极少，其基础生物学、繁育生物学、养殖生物学、营养学及病害防控技术等方面的研究基本处于空白；人工育苗仅见有刘丽丽等（2010年）利用驯养的野生半刺厚唇鱼亲本，在2008～2009年开展了其人工繁育试验，获得了少量苗种。鉴于此，本发明采用了新的催产药物配伍，实现了良好的催产效果；在解决了生物饵料的稳定充足供应技术、苗种与亲鱼的培育技术后，形成了稳定的苗种培育技术，实现了半刺厚唇鱼的全人工育苗，为半刺厚唇鱼苗种规模化生产、及其种质资源的保护与养殖开发应用奠定了坚实基础。
技术实现要素：
本发明的目的在于，针对上述半刺厚唇鱼种苗培育技术缺乏的现状，提供一种半刺厚唇鱼全人工育苗方法。
为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：
一种半刺厚唇鱼全人工育苗方法，其具体步骤如下：
（1）亲本培育：
（a）日常培育：将半刺厚唇鱼野生亲本分别放养于土池中进行驯化培育，放养密度3～5尾/ m2，另套养鲢鳙鱼以调控水质；采用蛋白含量33%～36%的人工配合饲料进行培育，日投喂2次，日投喂量为鱼体重的0.5%～1%；
进一步的，所述土池为面积在2000 m2以内、水深1.0～1.5 m，确保微流水；
（b）产前强化培育：在开春季节，分批从亲鱼池挑选性腺发育良好的亲本，转入水泥池进行强化培育，每个水泥池投放亲鱼200～300尾，保持水池冲水3～5 h/d；在人工催产前10～15 d确保冲水时间8 h/d以上，以促进亲鱼性腺发育；采用蛋白含量36%～40%的人工配合饲料和青饲料进行培育，配合饲料日投喂2～3次、日投喂量为鱼体重的1%～2%，青饲料隔天投喂1次；
进一步的，所述水泥池为面积40 m2～60 m2，水深0.5～0.8 m的长方形水泥池，并配备1.5 kw水泵一台，保持微流水，进水用 80～100目筛绢布过滤；
（2）人工催产：
从强化培育的亲鱼中挑选健壮无伤、性腺发育成熟的个体进行人工催产试验：催产激素采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)+马来酸地欧酮(DOM)+绒毛膜促性腺激素(HCG)混合制剂，2针注射方式；第1针注射催产药物：3 mg LRH-A2+4 mg DOM+100 IU HCG)；第2针注射催产药物：5 mg LRH-A2+5 mg DOM+1000 IU HCG)；针距10～12 h，雄鱼不注射第1针，第2针剂量为雌鱼的1/2；在23℃～27℃水温条件下，效应时间为10～14 h；雌雄比例为3～5:1；
（3）人工授精：人工授精采用干法授精方式；
（4）人工孵化：
将吸水膨胀后的受精卵均匀布置于孵化布卵框上，在25℃～27℃孵化水温条件下，仔鱼约经58～60 h出膜；3 日龄前仔鱼不要人为惊动；孵化过程中确保孵化水体溶氧在5 mg/l以上；孵化方式采用微流水孵化或微流水充气孵化；
（5）苗种前期培育：
（a）开口饵料培育：以面积2000 m2以内，水深0.6~0.8 m的土池为饵料培育池，在开始人工催产工作的前8～12 d做好饵料培育池的清整工作；清塘后7～9 d，待药物毒性消失，注入新水至水深0.5～0.6 m；每667 m2施用发酵过的有机肥80～100 kg，以培养浮游动植物；
（b）仔鱼培育：仔鱼10日龄前投喂上述饵料培育池中80目过筛的浮游动物，10～25日龄则投喂用60目过筛的浮游动物，20日龄开始驯食蛋白质含量40%～45%的人工配合饲料；仔鱼经39～51 d的培育，即可获得规格达3 cm以上的幼鱼，该幼鱼即为夏花苗种；
（6）子一代大规格苗种培育：
将规格3～5 cm的子一代幼鱼清水下塘转入土池进行大规格苗种培育及养成；日投喂配合饲料2～3次，日投喂量为鱼体重的3%～5%，该配合饲料为蛋白质含量38%～42%的沉性颗粒料；待大部分子一代苗种规格达10 cm时，将苗种起捕分级筛选，10 cm以下的苗种继续留在土池培育，10 cm以上的苗种转入另外的土池，进行后备亲本培育；
进一步的，所述土池面积在2000 m2以内，水深0.8～1.0 cm，微流水，进水用 60～80目筛绢布过滤；
（7）子一代亲本养成与培育：
（a）子一代后备亲本养成：日投喂配合饲料2～3次，日投喂量为鱼体重的2%～3%，该配合饲料为蛋白质含量36%～40%的沉性颗粒料；待大部分子一代后备亲本规格达15 cm时，将其起捕进行第二次分级筛选，筛选15 cm以上的后备亲本转入另外的土池，进行子一代亲本培育；
进一步的，亲本培育池塘为步骤（6）中所述的土池；
（b）子一代亲本培育：培育方法同步骤（1）；
（8）全人工育苗的实现: 利用步骤（1）操作方法获得性腺发育成熟的子一代亲本，重复步骤（2）至步骤（4），获得子二代苗种，实现全人工育苗。
步骤（3）所述的干法授精方式的具体操作步骤为：将到效应期的雌鱼腹部水分擦干，轻压其腹部将卵从生殖孔挤入干燥的容器中；同时用吸管从雄鱼生殖孔吸入挤出的精液，用1～2倍体积pH 7.0的0.7％生理盐水稀释后倒入刚挤出的卵中，再用羽毛轻轻搅拌混匀2～3 min后，加入清水将受精卵洗净去粘，然后进行孵化。
本发明的有益效果在于：
半刺厚唇鱼具有重要的生态价值和营养价值，近年来由于原产地生态环境日益恶化，其野生种质资源的种群数量和质量严重衰竭。本发明采用了新的催产药物配伍，实现了良好的催产效果；解决了生物饵料的稳定充足供应技术（一种新型浮游动物采集装置，专利号：ZL201520003941.0）、苗种与亲鱼的培育技术，形成了稳定的苗种培育技术，在国内外首次实现了半刺厚唇鱼的全人工育苗，突破了因半刺厚唇鱼野生种质资源匮乏而造成的亲鱼来源困难的瓶颈，为半刺厚唇鱼国家级水产种质资源保护区及其他有自然种群分布水域的野生资源修复提供了技术支持和苗种保障，并可实现半刺厚唇鱼的规模化育苗和人工养殖产业化。
具体实施方式
实施例1
2015年4～6月，在福建省顺昌县兆兴鱼种养殖有限公司，运用本发明方法，利用培育的半刺厚唇鱼野生亲本，成功开展了其人工繁育。共催产6个批次，合计催产雌鱼227尾，催产成功187尾，平均催产率达82.4 %；获得卵子16.55万粒、受精卵11.8万粒，平均受精率71.4 %；孵化水花苗79660尾，平均孵化率67.4 %。经过40～51 d的培育，共获得平均规格3.37 cm的半刺厚唇鱼夏花苗种62630尾，苗种培育平均存活率达到78.6 %。其具体繁育步骤为：
（1）亲本培育：
（a）日常培育：将半刺厚唇鱼野生亲本分别放养于土池中进行驯化培育，放养密度3尾/ m2，另套养鲢鳙鱼以调控水质；采用蛋白质含量33%的人工配合饲料进行培育，日投喂2次，日投喂量为鱼体重的0.5%；
进一步的，所述土池为面积为1000 m2、水深1.0 m、微流水；
（b）产前强化培育：在开春季节，分批从亲鱼池挑选性腺发育良好的亲本，转入水泥池进行强化培育，每个水泥池投放亲鱼200尾，保持水池冲水3 h/d；在人工催产前10 d确保冲水时间8 h/d，以促进亲鱼性腺发育；采用蛋白含量36%的人工配合饲料和青饲料进行培育，配合饲料日投喂2次、日投喂量为鱼体重的1%，青饲料隔天投喂1次；
进一步的，所述水泥池为面积40 m2，水深0.5 m的长方形水泥池，并配备1.5 kw水泵一台，保持微流水，进水用 60目筛绢布过滤；
（2）人工催产：
从强化培育的亲鱼中挑选健壮无伤、性腺发育成熟的个体进行人工催产试验：催产激素采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)+马来酸地欧酮(DOM)+绒毛膜促性腺激素(HCG)混合制剂，2针注射方式；第1针注射催产药物：3 mg LRH-A2+4 mg DOM+100 IU HCG)；第2针注射催产药物：5 mg LRH-A2+5 mg DOM+1000 IU HCG)；针距12 h，雄鱼不注射第1针，第2针剂量为雌鱼的1/2；在23℃～25℃的水温条件下，激素效应时间为12～14 h；雌雄比例为3:1；
（3）人工授精：人工授精采用干法授精方式；
（4）人工孵化：
将吸水膨胀后的受精卵均匀布置于孵化布卵框上，在25℃孵化水温条件下，仔鱼约经60 h出膜；3日龄前仔鱼不要人为惊动；孵化过程中确保孵化水体溶氧在5 mg/l；孵化方式采用微流水孵化；
（5）苗种前期培育：
（a）开口饵料培育：以面积1000 m2，水深0.6 m的土池为饵料培育池，在开始人工催产工作的前8 d做好饵料培育池的清整工作；清塘后7 d，待药物毒性消失，注入新水至水深0.5 m；每667 m2施用发酵过的有机肥80 kg，以培养浮游动植物；
（b）仔鱼培育：仔鱼10日龄前投喂上述饵料培育池中80目过筛的浮游动物，10～25日龄则用60目过筛，20日龄开始驯食蛋白质含量40%的人工配合饲料，该饲料喂沉性颗粒料；仔鱼经40～51 d的培育，即可获得规格达3 cm以上的幼鱼，该幼鱼即为夏花苗种；
（6）子一代大规格苗种培育：
将规格3 cm的子一代幼鱼清水下塘转入土池进行大规格苗种培育及养成；日投喂配合饲料2次，日投喂量为鱼体重的3%，该配合饲料为蛋白质含量38%的沉性颗粒料；待大部分子一代苗种规格达10 cm时，将苗种起捕分级筛选，10 cm以下的苗种继续在土池培育，10 cm以上的苗种转入另外的土池，进行后备亲本培育；
进一步的，所述土池面积为1000 m2，水深0.8 m，保持微流水，进水用 60目筛绢布过滤；
（7）子一代亲本养成与培育：
（a）子一代后备亲本养成：日投喂配合饲料2次，日投喂量为鱼体重的2%，该配合饲料为蛋白质含量36%的沉性颗粒料；待大部分子一代后备亲本规格达15 cm时，将其起捕进行第二次分级筛选，筛选15 cm以上的后备亲本转入另外的土池，进行子一代亲本培育；
进一步的，亲本培育池塘为步骤（6）中所述的土池；
（b）子一代亲本培育：培育方法同步骤（1）；
步骤（3）所述的干法授精方式的具体操作步骤为：将到效应期的雌鱼腹部水分擦干，轻压其腹部将卵从生殖孔挤入干燥的容器中；同时用吸管从雄鱼生殖孔吸入挤出的精液，用1倍体积pH 7.0的0.7％生理盐水稀释后倒入刚挤出的卵中，再用羽毛轻轻搅拌混匀2 min后，加入清水将受精卵洗净去粘，然后进行孵化。
实施例2
2016年5～6月，在福建省顺昌县兆兴鱼种养殖有限公司，利用培育的半刺厚唇鱼野生亲本，运用本发明方法开展了其人工繁育工作。共催产了5个批次，催产雌鱼452尾，催产率77.2%；获得卵子19.33万粒、受精卵15万粒，受精率77.6%；获得水花苗11.8万尾，孵化率78.7%。经过39～48 d的培育，共获得平均规格3.16 cm的半刺厚唇鱼夏花苗种77500尾，苗种培育平均存活率达到65.7 %。
其具体步骤如下：
（1）亲本培育：
（a）日常培育：将半刺厚唇鱼野生亲本分别放养于土池中进行驯化培育，放养密度4尾/ m2，另套养鲢鳙鱼以调控水质；采用蛋白含量35%的人工配合饲料进行培育，日投喂3次，日投喂量为鱼体重的0.8%；
进一步的，所述土池面积为2000 m2，水深1.2 m，保持微流水；
（b）产前强化培育：在开春季节，分批从亲鱼池挑选性腺发育良好的亲本，转入水泥池进行强化培育，每个水泥池投放亲鱼250尾，保持水池冲水4 h/d；在人工催产前12 d确保冲水时间10 h/d，以促进亲鱼性腺发育；采用蛋白含量38%的人工配合饲料和青饲料进行培育，配合饲料日投喂3次、日投喂量为鱼体重的1.5%，青饲料隔天投喂1次；
进一步的，所述水泥池为面积50 m2，水深0.6 m的长方形水泥池，并配备1.5 kw水泵一台，保持微流水，进水用 80目筛绢布过滤；
（2）人工催产：
从强化培育的亲鱼中挑选健壮无伤、性腺发育成熟的个体进行人工催产试验：催产激素采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)+马来酸地欧酮(DOM)+绒毛膜促性腺激素(HCG)混合制剂，2针注射方式；第1针注射催产药物：3 mg LRH-A2+4 mg DOM+100 IU HCG)；第2针注射催产药物：5 mg LRH-A2+5 mg DOM+1000 IU HCG)；针距11 h，雄鱼不注射第1针，第2针剂量为雌鱼的1/2；在25℃～27℃的水温条件下，激素效应时间为10～12 h。雌雄比例为4:1；
（3）人工授精：人工授精采用干法授精方式；
（4）人工孵化：
将吸水膨胀后的受精卵均匀布置于孵化布卵框上，在26℃孵化水温条件下，仔鱼约经59 h出膜；3 日龄前仔鱼不要人为惊动；孵化过程中确保孵化水体溶氧在5 mg/l以上；孵化方式采用微流水孵化或微流水充气孵化；
（5）苗种前期培育：
（a）开口饵料培育：以面积2000 m2，水深0.7 m的土池为饵料培育池，在开始人工催产工作的前10 d做好饵料培育池的清整工作；清塘后8 d，待药物毒性消失，注入新水至水深0.6 m；每667 m2施用发酵过的有机肥90 kg，以培养浮游动植物；
（b）仔鱼培育：仔鱼10日龄前投喂上述饵料培育池中80目过筛的浮游动物，10～25日龄则用60目过筛，20日龄开始驯食蛋白质含量43%的人工配合饲料，该饲料喂沉性颗粒料；仔鱼经39～50 d的培育，即可获得规格达3 cm以上的幼鱼，该幼鱼即为夏花苗种；
（6）子一代大规格苗种培育：
将规格4cm的子一代幼鱼清水下塘转入土池进行大规格苗种培育及养成；日投喂配合饲料2次，日投喂量为鱼体重的4%，该配合饲料为蛋白质含量40%的沉性颗粒料；待大部分子一代苗种规格达10 cm时，将苗种起捕分级筛选，10 cm以下的苗种继续在土池培育，10 cm以上的苗种转入另外的土池，进行后备亲本培育；
进一步的，所述土池面积为2000 m2，水深0.9 m，保持微流水，进水用80目筛绢布过滤；
（7）子一代亲本养成与培育：
（a）子一代后备亲本养成：日投喂配合饲料3次，日投喂量为鱼体重的2.5%，该配合饲料为蛋白质含量38%的沉性颗粒料；待大部分子一代后备亲本规格达15 cm时，将其起捕进行第二次分级筛选，筛选15 cm以上的后备亲本转入另外的土池，进行子一代亲本培育；
进一步的，亲本培育池塘为步骤（6）中所述的土池；
（b）子一代亲本培育：培育方法同步骤（1）；
步骤（3）所述的干法授精方式的具体操作步骤为：将到效应期的雌鱼腹部水分擦干，轻压其腹部将卵从生殖孔挤入干燥的容器中；同时用吸管从雄鱼生殖孔吸入挤出的精液，用2倍体积pH 7.0的0.7％生理盐水稀释后倒入刚挤出的卵中，再用羽毛轻轻搅拌混匀2.5 min后，加入清水将受精卵洗净去粘，然后进行孵化。
实施例3
2016年6月21日，利用2014年的自繁子一代苗种培育而成的亲本，通过人工催产、挤卵授精，获得子一代亲本产卵子31000粒，受精卵7600粒，受精率24.5%；获得水花苗2300尾，孵化率30.3%，实现了半刺厚唇鱼的全人工育苗。其具体繁育步骤为：
（1）亲本培育：
（a）日常培育：将半刺厚唇鱼野生亲本分别放养于土池中进行驯化培育，放养密度5尾/ m2，另套养鲢鳙鱼以调控水质；采用蛋白含量36%的人工配合饲料进行培育，日投喂3次，日投喂量为鱼体重的1%；
进一步的，所述土池面积为1000 m2，水深1.5 m，保持微流水；
（b）产前强化培育：在开春季节，分批从亲鱼池挑选性腺发育良好的亲本，转入水泥池进行强化培育，每个水泥池投放亲鱼300尾，保持水池冲水5 h/d；在人工催产前15 d确保冲水时间10 h/d，以促进亲鱼性腺发育；采用蛋白含量40%的人工配合饲料和青饲料进行培育，配合饲料日投喂3次、日投喂量为鱼体重的2%，青饲料隔天投喂1次；
进一步的，所述水泥池为面积60 m2，水深0.8 m的长方形水泥池，并配备1.5 kw水泵一台，保持微流水，进水用100目筛绢布过滤；
（2）人工催产：
从强化培育的亲鱼中挑选健壮无伤、性腺发育成熟的个体进行人工催产试验：催产激素采用促黄体素释放激素类似物(LRH-A2)+马来酸地欧酮(DOM)+绒毛膜促性腺激素(HCG)混合制剂，2针注射方式；第1针注射催产药物：3 mg LRH-A2+4 mg DOM+100 IU HCG)；第2针注射催产药物：5 mg LRH-A2+5 mg DOM+1000 IU HCG)；针距10 h，雄鱼不注射第1针，第2针剂量为雌鱼的1/2；在25℃～27℃的水温条件下，激素效应时间为10～12 h；雌雄比例为5:1；
（3）人工授精：人工授精采用干法授精方式；
（4）人工孵化：
将吸水膨胀后的受精卵均匀布置于孵化布卵框上，在27℃孵化水温条件下，仔鱼约经58 h出膜；3日龄前仔鱼不要人为惊动；孵化过程中确保孵化水体溶氧在5 mg/l以上；孵化方式采用微流水孵化；
（5）苗种前期培育：
（a）开口饵料培育：以面积2000 m2，水深0.8 m的水池最为饵料培育池，在开始人工催产工作的前12 d做好饵料培育池的清整工作；清塘后9 d，待药物毒性消失，注入新水至水深0.6 m；每667 m2施用发酵过的有机肥100 kg，以培养浮游动植物；
（b）仔鱼培育：仔鱼10日龄前投喂上述饵料培育池中80目过筛的浮游动物，10～25日龄则用60目过筛，20日龄开始驯食蛋白质含量45%的人工配合饲料，该饲料喂沉性颗粒料；仔鱼经39～48 d的培育，即可获得规格达3 cm以上的幼鱼，该幼鱼即为夏花苗种；
（6）子一代大规格苗种培育：
将规格3 cm的子一代幼鱼清水下塘转入土池进行大规格苗种培育及养成；日投喂配合饲料3次，日投喂量为鱼体重的5%，该配合饲料为蛋白质含量42%的沉性颗粒料；待大部分子一代苗种规格达10 cm时，将苗种起捕分级筛选，10 cm以下的苗种继续在土池培育，10 cm以上的苗种转入另外的土池，进行后备亲本培育；
进一步的，所述土池面积为2000 m2，水深1.0 m，保持微流水，进水用 80目筛绢布过滤；
（7）子一代亲本养成与培育：
（a）子一代后备亲本养成：日投喂配合饲料3次，日投喂量为鱼体重的3%，该配合饲料为蛋白质含量40%的沉性颗粒料；待大部分子一代后备亲本规格达15 cm时，将其起捕进行第二次分级筛选，筛选15 cm以上的后备亲本转入另外的土池，进行子一代亲本培育；
进一步的，亲本培育池塘为步骤（6）中所述的土池；
（b）子一代亲本培育：培育方法同步骤（1）；
（8）全人工育苗的实现：利用步骤（1）操作方法获得性腺发育成熟的子一代亲本，重复步骤（2）至步骤（4），获得子二代苗种，实现全人工育苗。
步骤（3）所述的干法授精方式的具体操作步骤为：将到效应期的雌鱼腹部水分擦干，轻压其腹部将卵从生殖孔挤入干燥的容器中；同时用吸管从雄鱼生殖孔吸入挤出的精液，用2倍体积pH 7.0的0.7％生理盐水稀释后倒入刚挤出的卵中，再用羽毛轻轻搅拌混匀3 min后，加入清水将受精卵洗净去粘，然后进行孵化。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。