水培三蕊香料藤和其用途的制作方法

文档序号:17127380发布日期:2019-03-16 00:39阅读:330来源:国知局
水培三蕊香料藤和其用途的制作方法
本发明总体上涉及香料藤属(tiliacora)的水培生长植物的提取物,以及此类提取物在护肤组合物中的用途和用于减少衰老的皮肤病学迹象并且/或者改善人皮肤健康的相关方法用于减少衰老的皮肤病学迹象并且/或者改善人皮肤健康的相关方法。
背景技术
:已经开发了许多护肤产品来改善人皮肤的外观。许多局部施用的护肤组合物含有植物提取物作为赋予各种功能属性的活性剂。其中一种用于护肤的植物是香料藤属家族的三蕊香料藤(tiliacoratriandradiels)(也称为yanang),其是原产于东南亚大陆的一个开花植物物种,并且特别用于泰国东北部和老挝的饮食中。它是一种攀缘植物,有大多数为单片、光滑、椭圆形、深绿色的叶子以及淡黄色的花朵。标题均为“三蕊香料藤(tiliacoratriandra)在化妆品及其组合物中的用途”的美国专利号8,751,758和9,084,744披露了三蕊香料藤的提取物,其增强成纤维细胞和角质形成细胞的存活,并防止胶原降解。美国专利号9,238,000披露了三蕊香料藤(tiliacoratriandra)的提取物,其在成纤维细胞中上调wipi-1,并且因此据说可用于治疗由自噬活性降低引起的皮肤衰老迹象。上述专利没有披露水培生长的香料藤属植物。本发明的一个目的是提供香料藤属包括三蕊香料藤的水培生长植物,以及包含此类提取物的护肤组合物,以及局部施用于人皮肤以改善健康和对抗皮肤衰老和损害的皮肤病学表现的相关方法。本发明的另一个目的是提供来自香料藤属植物包括三蕊香料藤的提取物,其有效提高皮肤中的透明质酸(ha)水平。本发明的又另一个目的是提供护肤组合物,其包含有效量的香料藤属包括三蕊香料藤的水培生长植物提取物,与有效量的乙醇酸和/或烟酰胺组合,以及局部施用至人皮肤来改善健康和对抗皮肤衰老和损害的皮肤病学表现的方法。介绍上述讨论仅仅是为了更好地理解本领域所面临的问题的性质,并且不应以任何方式解释为对现有技术的承认,也不应将在此引用的任何参考文献视为承认这样的参考文献构成了本申请的“现有技术”。发明概述根据前述目的和其他目的中的一个或多个,本发明提供了香料藤属包括三蕊香料藤的水培生长的植物,以及用于护肤的这些植物的提取物。不受任何特定理论的束缚,据信根据本发明的提取物的区别特征在于它们刺激或增强成纤维细胞中糖胺聚糖(gag)透明质酸(ha)的产生的能力。ha由真皮成纤维细胞和表皮角质形成细胞合成。ha具有独特的结合和保留水分子的能力,并且有助于皮肤的水合作用和弹性。皮肤的ha含量随着年龄而降低,这被认为是导致衰老皮肤的显著变化(例如皮肤水分和柔软度的丧失、以及皱纹和细纹的发生)的一个因素。相应地,在本发明的一些实施方式中,香料藤属植物包括三蕊香料藤的提取物的特征在于刺激人成纤维细胞和/或角质形成细胞中产生ha的能力。在本发明的一个方面,提供了水培生长的三蕊香料藤植物(例如,整株植物)或其部分(例如,藤、叶、花等)的提取物。在一些实施方式中,提取物从植物的气生部分(例如藤、叶和/或花)制备。该提取物可以使用任何已知的方法(包括蒸汽蒸馏或水提)获得,但通常通过用有机溶剂(例如极性溶剂(例如乙醇等)或非极性溶剂(例如己烷))和/或质子(例如,醇、酸等)或非质子溶剂(例如,二烷基醚、烷烃、酯等)提取来获得。在一些实施方式中,提取使用极性质子溶剂(例如,乙醇)单独或与水或其他有机溶剂组合进行。在特定的实施方式中,通过用水/乙醇提取溶剂(例如,包含5%-50%(v/v)水和50%-95%(v/v)乙醇的溶剂系统,或包含10%-30%(v/v)水和70%-90%(v/v)乙醇的溶剂系统(例如,20/80(v/v)水/乙醇溶剂系统)提取植物或其一部分来制备提取物。在一些实施方式中,三蕊香料藤植物或其部分的提取物的特征在于所述提取物的0.2%(w/w)溶液将成纤维细胞中透明质酸水平提高30%以上的能力。例如,预期将成纤维细胞中透明质酸水平提高40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、或90%以上、或100%以上的提取物将在本发明的实践中有用。在一些实施方式中,此类提取物将衍生自水培生长的三蕊香料藤植物(例如,整株植物)或其部分(例如,藤、叶、花等)。在一些实施方式中,通过用有机溶剂(例如极性溶剂(例如,乙醇等)或非极性溶剂(例如己烷)和/或质子(例如,醇、酸等)或非质子溶剂(例如,二烷基醚、烷烃、酯等))提取来获得ha刺激性提取物。在一些实施方式中,使用包含5%-50%(v/v)水和50%-95%(v/v)乙醇或包含10%-30%(v/v)水和70%-90%(v/v)乙醇的溶剂系统(例如,20/80(v/v)水/乙醇溶剂系统)进行提取。在本发明的另一方面,提供了一种护肤组合物,其包含根据本发明的三蕊香料藤的任何提取物。在一个实施方式中,三蕊香料藤植物或其部分的提取物衍生自水培生长的三蕊香料藤植物(例如,整株植物)或其部分(例如,藤、叶、花等),例如,使用了包含5%-50%(v/v)水和50%-95%(v/v)乙醇,或包含10%-30%(v/v)水和70%-90%(v/v)乙醇的溶剂系统(例如,20/80(v/v)水/乙醇溶剂系统)。在一些实施方式中,三蕊香料藤植物或其部分的提取物的特征在于所述提取物的0.2%(w/w)溶液将成纤维细胞中透明质酸水平提高30%以上(或40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、或90%以上、或100%以上)的能力。提取物通常分散在生理上相容的媒介物中,例如油包水或水包油乳液。载体通常构成按重量计组合物的约50%-99%或75%-98%或约80%-95%。乳液通常包含乳化剂(例如,以按重量计约0.01%-10%的量)和用于微生物稳定性的防腐剂(例如,以按重量计约0.0001%-5%的量)。提取物以有效量包含在配制品中,有效量意指足以赋予皮肤益处的量,但提取物通常以按组合物重量计约0.001%-20%或约0.01%-10%或约0.1%-1%的量存在。在一些实施方式中,该护肤组合物还包含以按重量计约0.01%-10%或约0.1%-5%的量的乙醇酸(或其盐,例如乙醇酸钠)。在一些实施方式中,提取物与乙醇酸的重量比范围为约10:1至约1:10或从约5:1至约1:5或从约3:1至约1:3或从约2:1至约1:2或从约3:2至约2:3或约1:1。在一些实施方式中,所述护肤组合物还包含烟酰胺,例如,以按重量计约0.01%-10%或约0.1%-5%的量的烟酰胺。在一些实施方式中,该提取物与烟酰胺的重量比范围为从约50:1至约1:50或从约30:1至约1:30或从约25:1至约1:25或从约10:1至约1:10或从约5:1至约1:5或从约3:1至约1:3或从约2:1至约1:2或从约3:2至约2:3或约1:1。本发明的护肤组合物可进一步包含一种或多种化妆品佐剂或赋形剂,包括但不限于溶剂、成膜剂、颗粒、增稠剂、流变改性剂、表面活性剂和乳化剂、稳定剂、ph调节剂、防腐剂、螯合剂、着色剂和香料,其中每一种可以单独地或集合地以按组合物重量计约0.0001%-50%或0.001%-20%或0.01%-10%或0.1%-5%存在。本发明的护肤组合物可进一步包含一种或多种赋予皮肤益处的皮肤活性成分,包括但不限于矿物质、维生素(例如,维生素e)、类视黄醇(例如视黄醇、视黄醛、视黄醇乙酸酯、棕榈酸视黄酯等)、抗氧化剂(例如,己基间苯二酚、植醇、硫代二丙酸或其二月桂酸酯)、α-羟基酸(例如,乙醇酸、乳酸、柠檬酸等)、β-羟基酸(例如,水杨酸及其酯)、肽和其棕榈酰衍生物(例如,五肽、六肽、ktfk、k-ava-k、小麦蛋白水解物等)、胶原蛋白增强剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白增强剂、弹性蛋白酶抑制剂、透明质酸增强剂、皮肤丰满剂(例如,透明质酸)、保湿剂、润肤剂(例如,二甲聚硅氧烷、植物油等)、湿润剂(例如,甘油)、晚期糖化终产物(age)抑制剂或切割剂、皮肤保护剂、防晒剂和uv阻滞剂、屏障修复和增强剂(例如,神经酰胺、甘油酯、胆固醇及其酯等)和植物成分,仅举几个例子,其中每个可以单独地或集合地以按组合物的重量计约0.0001%-50%或0.001%-20%或0.01%-10%或0.1%-5%存在。在仍然另一个方面,提供了一种方法,该方法用于改善人皮肤的健康或减少人皮肤中衰老的皮肤病学迹象(例如,面部、颈部、胸部、手部等的皮肤)的外观。该方法通常包括将有效量的根据本发明的护肤组合物局部施用于需要其的皮肤区域(例如直接施用于皱纹或细纹)。该护肤组合物包括有效量的三蕊香料藤植物或其部分的提取物。例如,提取物可以源自水培生长的三蕊香料藤植物或其部分(例如,藤、叶、花等)。该三蕊香料藤植物提取物的特征可在于该提取物的0.2%(w/w)溶液将成纤维细胞中透明质酸水平提高30%以上(或40%以上、50%以上、60%以上、70%以上、80%以上、或90%以上、或100%以上)的能力。在一个实施方式中,三蕊香料藤植物或其部分的提取物是使用包含5%-50%(v/v)水和50%-95%(v/v)乙醇,或包含10%-30%(v/v)水和70%-90%(v/v)乙醇的溶剂系统(例如,20/80(v/v)水/乙醇溶剂系统)衍生。该方法可有效减少衰老的皮肤病学迹象的外观,包括:(a)处理、减轻、和/或预防细纹或皱纹;(b)减小皮肤孔隙大小;(c)改善皮肤厚度、饱满度、和/或紧致度;(d)改善皮肤光滑度、柔软度和/或细嫩度;(e)改善肤色、光泽度和/或透明度;(f)改善前胶原蛋白、和/或胶原蛋白产生;(g)改善弹性蛋白的维持和重塑;(h)皮肤纹理的改善和/或促进再纹理化;(i)改善皮肤屏障修复和/或功能;(j)改善皮肤轮廓外观;(k)恢复皮肤光泽和/或亮度;(l)补充皮肤中必需营养素和/或成分;(m)改善由衰老和/或绝经降低的皮肤外观;(n)改善皮肤保湿;(o)增加皮肤弹性和/或回弹性;(p)处理、减少和/或预防皮肤下垂;(q)改善皮肤紧致度;及(r)减少色斑和/或斑驳皮肤;以及(s)改善通过光衍射或反射的皮肤的光学性质。在一种实施方式中,该方法用于减少皱纹和/或细纹的外观,这可能需要例如减少皱纹和细纹的数量,减少现有皱纹和细纹的深度,防止皱纹和细纹的发展或恶化。在一些实施方式中,将组合物直接施用于皱纹和/或细纹,例如,每天至少一次或两次,持续足以观察可见改善的时间段,例如至少一周、二周、四周、八周或十二周或更长时间。在一些实施例中,该组合物将以从约0.001至约100mg/cm2,更典型地从约0.01至约20mg/cm2,或从约0.1至约10mg/cm2的或从约0.5至约5mg/cm2的量施用于皮肤。参照下述详细说明和所附权利要求,将更好地理解本发明的这些及其他方面。附图简述图1示出了三蕊香料藤提取物的hplc迹线。图1a示出了通过使用20/80(v/v)水/乙醇提取溶剂提取水培生长的植物材料制备的三蕊香料藤提取物的代表性hplc迹线,并且图1b示出了田间生长的三蕊香料藤提取物(其通过使用20/80(v/v)水/乙醇提取溶剂从田间(即土壤)生长的植物中提取而制备)的代表性hplc迹线。发明详细描述本文披露了本发明的详细实施例;然而,应当理解,所披露的实施例仅仅是能以各种形式实施的本发明的说明。此外,所给出的与本发明各种实施例相关的每个实例旨在是说明性的,而不是限制性的。因此,本文披露的特定结构和功能细节不应被解释为限制性的,而是仅作为教导本领域技术人员以不同方式应用本发明的代表性基础。本文给出的所有百分数均是指特定组分相对于整个组合物(包括媒介物)的重量百分数,除非另有说明。应当理解,组合物中各组分的所有重量%的总和不超过100%。除非另有规定,本文中使用的所有术语旨在具有其普通含义。短语“化妆品上可接受的”、“局部可接受的”和“皮肤病学可接受的”可互换使用,并且旨在意指特定组分以所使用的水平施用于人体被(例如皮肤)时通常被认为是安全和无毒的。如在此所使用的术语“预防”包括延缓或减缓特定皮肤衰老迹象的发生或进展。短语“对其有需要的个体”是指可以从改善的皮肤外观或健康中获益的人(包括男性或女性)。在一些实施例中,对其有需要的个体是女性。术语“皮肤”包括但不限于嘴唇、脸部、手、手臂、颈部、头皮和胸部的皮肤。如在此所使用的,如从本说明书的阅读可以理解的,术语“基本上由...组成”旨在将本发明限制在指定的材料或步骤以及不会实质上影响要求保护的发明的基本和新特征的那些。除非另外说明,如本文所用,术语“植物”包括整株植物或其任何部分。植物的部分包括但不限于根、藤、叶、花、根茎、球果、果实、种子等。“气生”部分或植物包括通常在相应的田间生长品种中在地上生长的任何部分。术语“香料藤属”是指包括以下物种:tiliacoradinklagei、tiliacorafunifera、加彭香料藤(tiliacoragabonensis)、肯尼亚香料藤(tiliacorakenyensis)、总状香料藤(tiliacoraracemosa)、和三蕊香料藤。在一些实施例中,预期任何香料藤属物种都是有用的,其条件是其提取物能够上调人成纤维细胞中的ha产生(例如,上调至少30%)。根据实例4中提供的方案确定特定提取物上调ha产生与否以及上调的程度。在一些实施例中,预期任何香料藤属物种都是有用的,其条件是其提取物是从水培生长的植物或其部分获得的,并且表现出皮肤益处,例如,ha、前胶原蛋白和/或胶原蛋白的上调。本发明基于以下发现:水培生长的三蕊香料藤植物的提取物是ha的有效刺激物并且因此可用于护肤应用例如用于减少面部皮肤皱纹和细纹的外观的方法。“水培”是指植物的生长基本上保持根部和土壤之间无接触。通常,水培生长需要在受控环境中生长,例如室内或温室环境中。与田间生长的作物相比,温度、湿度和ph保持基本恒定或保持在狭窄的范围内。通常,植物的根部连续浸没在受控的温度和ph的水中。在一些实施方式中,根可嵌入基质中,例如粘土聚集体、生长石、椰壳泥炭、稻壳、珍珠岩、蛭石、浮石、沙子、砾石、木纤维、岩棉、绵羊毛、砖碎片、聚苯乙烯或其他惰性介质,这些基质浸没在水中或与水接触。植物连续或周期性地与受控量的营养素接触,所述营养素包括但不限于ca2+(钙)、mg2+(镁)、k+(钾);no3-(硝酸盐)、so4-2(硫酸盐)和h2po4-(磷酸二氢盐)。这些营养素可以添加到水中或者可以直接在根部附近递送。通常监测水的ph并根据需要调节至4-8或5-7或5.5-6.5。可以用来自金属卤化物灯或高压钠灯的光补充自然日光,以延长照射时间或补充自然光。可以将二氧化碳注入密封的温室环境中以进一步促进生长。除非另有说明,否则除了基本上无土壤的条件,术语“水培”不旨在限于特定的生长技术。可以使用香料藤属植物的任何部分(例如,三蕊香料藤),包括整株植物、藤、叶、花等。在一些实施方式中,提取物从植物的气生部分(例如藤、叶和/或花)制备。在一个实施例中,提取物由藤制备。在一个实施例中,提取物由叶制备。在提取之前,通常将植物材料粉碎以促进提取。可以使用任何已知的方法获得提取物。在一个实施例中,提取物通过蒸汽蒸馏获得。在一个实施例中,通过含水提取(用酸性、中性或碱性ph)获得提取物。在一个实施例中,通过用有机溶剂提取获得提取物。有机溶剂可包括极性溶剂(例如乙醇等)或非极性溶剂(例如己烷)和/或质子溶剂(例如醇、酸等)或非质子溶剂(例如二烷基醚、烷烃、酯等)、或其混合物,或与水的混合物。在一些实施方式中,提取使用极性质子溶剂(例如,乙醇)单独或与水或其他有机溶剂组合进行。植物材料可以与溶剂一起回流或在环境温度(例如室温)、高于环境温度或低于环境温度下与溶剂接触。在一个实施例中,通过用乙醇、水或水/乙醇提取溶剂提取植物或其一部分来制备提取物。在一个实施例中,用包含1%-99%(v/v)水和1%-99%(v/v)乙醇、或5%-95%(v/v)水和5%-95%(v/v)乙醇、或5%-50%(v/v)水和50%-95%(v/v)乙醇、或7.5%-40%(v/v)水和60%-92.5%(v/v)乙醇、或10%-30%(v/v)水和70%-90%(v/v)乙醇的溶剂系统,或用约20/80(v/v)水/乙醇溶剂系统提取植物材料。提取物(包括水培三蕊香料藤提取物)(例如,用水、乙醇或水/乙醇或约20/80(v/v)水/乙醇提取)可以直接施用于皮肤,但通常与媒介物或载体一起包括在护肤配制品中。媒介物可构成按重量计组合物的约20%-99.99%,但更通常地构成按重量计组合物的约50%-99.9%或60%-99%或约70%-99%或约80%-99%或约90%-99%。媒介物可以是例如处于血清(例如,乙醇溶液或水溶液)、凝胶或乳液的形式。合适的乳液包括油包水和水包油。出于本披露的目的,硅油和蜡被认为是“油”。其他乳液,包括但不限于油包甘油或甘油包油乳液,以及多重乳液,也被认为是有用的。乳液通常包括一定量的适于稳定乳液的乳化剂,例如,按重量计约0.001%-20%或按重量计0.01%-10%或按重量计0.1%-5%。乳化剂可以是非离子、阴离子或两性表面活性剂。该生理上相容的媒介物可包括水;植物油;矿物油;酯油如棕榈酸辛酯,肉豆蔻酸异丙酯和棕榈酸异丙酯;醚如二辛醚和二甲基异山梨醇;醇如乙醇和异丙醇;脂肪醇如鲸蜡醇、鲸蜡硬脂醇、硬脂醇和山嵛醇;异链烷烃如异辛烷、异十二烷(idd)和异十六烷;硅油如环甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷交联聚合物、聚硅氧烷及其衍生物,优选有机改性衍生物,包括pdms、二甲聚硅氧烷聚多元醇、二甲聚硅氧烷醇和氨基二甲基聚硅氧烷醇;烃油如矿物油、凡士林、异二十烷和聚烯烃,例如(氢化)聚异丁烯;多元醇如丙二醇,甘油,丁二醇,戊二醇,己二醇,辛乙二醇;蜡如蜂蜡、棕榈蜡、地蜡、微晶蜡、聚乙烯蜡和植物蜡;或上述的任何组合或混合物。包括精华液的水性媒介物可以包括与水混溶的一种或多种溶剂,包括低级醇,如乙醇、异丙醇等。该护肤组合物可包含一种或多种另外的活性剂,其可以按重量计约0.001%-50%的量,更通常地以按重量计约0.01%-20%的量单独或集合存在。如本文所用,术语“活性剂”包括旨在赋予皮肤益处的任何试剂。其他活性剂包括但不限于矿物质、维生素、类视黄醇、抗氧化剂、α-羟基酸、β-羟基酸、肽、氨基酸、胶原蛋白增强剂、胶原酶抑制剂、弹性蛋白增强剂、弹性蛋白酶抑制剂、透明质酸增强剂、皮肤丰满剂、保湿剂、润肤剂、湿润剂、晚期糖化终产物(age)抑制剂或切割剂、角质层分离剂、脱屑剂、角质形成细胞增殖增强剂、5-α还原酶抑制剂、脱色剂、抗炎剂、类固醇、抗痤疮剂、皮肤保护剂、防晒剂和uv阻滞剂、植物成分等。在一个实施例中,该护肤组合物还包含乙醇酸(或其盐,例如乙醇酸钠),例如,以基于整个组合物的重量按重量计约0.01%-10%或约0.1%-5%或按重量计约0.5%-2.5%的量。在一些实施例中,香料藤属提取物(例如,水培三蕊香料藤提取物)与乙醇酸的重量比范围为约10:1至约1:10或从约5:1至约1:5或从约3:1至约1:3或从约2:1至约1:2或从约3:2至约2:3或约1:1。在一些实施例中,三蕊香料藤提取物和乙醇酸的组合能够实现成纤维细胞内ha产生的协同增强,这意味着改善大于加和。在一个实施例中,所述护肤组合物还包含烟酰胺,例如,以按重量计约0.01%-10%或约0.1%-5%或按重量计0.1%-1%的烟酰胺。在一些实施例中,该香料藤属提取物(例如,水培三蕊香料藤提取物)与烟酰胺的重量比范围为从约50:1至约1:50或从约30:1至约1:30或从约25:1至约1:25或从约10:1至约1:10或从约5:1至约1:5或从约3:1至约1:3或从约2:1至约1:2或从约3:2至约2:3或约1:1。在一些实施例中,三蕊香料藤提取物和烟酰胺的组合能够实现成纤维细胞内ha产生的协同增强,这意味着改善大于加和。在一个实施例中,该护肤组合物还包括类视黄醇。示例性类视黄醇包括但不限于:视黄酸(例如,全反式、或9-顺式、或13-顺式),及其衍生物(视黄醛、视黄醇(维生素a)及其酯(如棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、和丙酸视黄酯)、及其盐)。可具体提及的是视黄醇。当存在时,典型地以如下量包括类视黄醇:按重量计从约0.0001%至约5%、更典型地按重量计从约0.01%至约2.5%、或按重量计从约0.05%至约1%。根据该实施例的组合物通常将包括抗氧化剂,如抗坏血酸和/或bht和/或螯合剂如edta或其盐(例如,edta二钠)。在一些实施例中,本发明的组合物将包括植醇,例如基于组合物的总重量,其量为按重量计约0.001(wt%)至约10wt%。通常,基于组合物的总重量,植醇能以约0.01wt%至约5wt%,并且最通常约0.1wt%至约1wt%的量存在。该组合物可包括用于治疗人皮肤的任何活性成分,包括例如选自以下的活性成分:乙醇酸、硫代二丙酸(tdpa)或其酯(例如,单月桂醇酯和二月桂醇酯)、己基间苯二酚、烟酰胺或来自鳢肠属(例如,鳢肠)、马齿苋属(例如,大花马齿苋)、或蜜茱萸属(例如,melicopehayesii和/或melicopeellyarana)、紫铆属(例如,甄叔迦树(buteafrondosa))的植物的植物提取物;羟基酸(包括α-羟基酸和β-羟基酸),水杨酸和水杨酸烷基酯;去角质剂(例如,乙醇酸、3,6,9-三噁十一烷二酸等),雌激素合成酶刺激化合物(例如,咖啡因和衍生物);能够抑制5α-还原酶活性的化合物(例如,亚麻酸、亚油酸、非那雄胺、及其混合物);和阻隔功能增强剂(α-羟基和ω-羟基脂肪酸及其酯等),仅举几例。另外,在2015年3月5日提交的题为“methodsfortreatingskin(治疗皮肤的方法)”的美国临时专利申请62/128,647(其披露通过引用结合到本文中)中鉴定的活性成分(包括植物成分)预期是有用的。在另一个实施例中,本发明的局部用组合物还可以包括以下各项中的一种或多种:皮肤渗透增强剂;柔润剂,如肉豆蔻酸异丙酯、凡士林、挥发性或非挥发性硅油(例如,甲基聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷)、酯油、矿物油和脂肪酸酯;保湿剂,如甘油、己二醇或辛乙二醇;皮肤丰满剂,如棕榈酰寡肽、胶原、胶原和/或糖胺聚糖(gag)增强剂;防晒剂,如阿伏苯宗或甲氧肉桂酸辛酯;去角质剂;和抗氧化剂。合适的去角质剂包括例如α-羟基酸,β-羟基酸,氧杂酸,氧杂二酸及其衍生物,如其酯、酸酐及盐。合适的羟基酸包括例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、2-羟基链烷酸、扁桃酸、水杨酸及其衍生物。一种示例性的去角质剂是乙醇酸。当存在时,可以包含组合物的按重量计从约0.001%至约20%的去角质剂。可用于本发明组合物中的抗氧化剂的实例包括具有酚羟基官能团的化合物,如抗坏血酸及其衍生物/酯;β-胡萝卜素;儿茶素;姜黄素;阿魏酸衍生物(例如,阿魏酸乙酯,阿魏酸钠);没食子酸衍生物(例如,没食子酸丙酯);番茄红素;还原酸;迷迭香酸;丹宁酸;四氢姜黄素;生育酚及其衍生物,包括生育酚乙酸酯;尿酸;或其任何混合物。其他合适的抗氧化剂是具有还原或非还原形式的一种或多种硫醇官能团(-sh)的那些,如谷胱甘肽、硫辛酸、巯基乙酸和其他巯基化合物。抗氧化剂可以是无机的,如亚硫酸氢盐、偏亚硫酸氢盐、亚硫酸盐或其他包含硫的无机盐和酸。抗氧化剂可以单独地或总体地占组合物的总重量的从约0.001%至约10%(w/w),或从约0.01%至约5%(w/w)。可以包括防晒剂以保护皮肤免受紫外线的损害。在本披露的说明性实施例中,防晒剂通过使用单一防晒剂或防晒剂的组合来提供uva和uvb两者的保护。在本发明组合物中可以使用的防晒剂中有阿伏苯宗、肉桂酸衍生物(如肉桂酸辛基甲氧基酯)、水杨酸辛酯、羟苯甲酮、氰双苯丙烯酸辛酯、二氧化钛、氧化锌、或其任何混合物。防晒剂可以按组合物总重量以从约1wt%至约30wt%单独或集合存在。在一个实施例中,该局部用组合物将具有从1至13的ph范围,其中在从2至12范围内的ph是典型的。在一些实施例中,该组合物具有范围从3.5至7或从7-10.5的ph。在一些实施例中,ph将在3-4、或4-5、或5-6、或6-7、或7-8、或8-9、或9-10、或10-11、或11-12的范围内。可以添加适合的ph调节剂(如氢氧化钠、柠檬酸和三乙醇胺)以使ph在所期望的范围内。此类的ph调节剂通常以按组合物的总重量计约0.001wt%至约10wt%单独或集合存在。此外,本披露所考虑的组合物可包括一种或多种相容的化妆品可接受的佐剂,例如着色剂、珍珠、颜料、光学扩散剂、染料、香料、防腐剂、颗粒、填充剂、螯合剂、增稠剂、抗真菌剂、抗微生物剂、抗氧化剂、成膜剂、驱虫剂、光稳定剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、黏度调节剂、胶凝剂和ph调节剂。关于这些和其他合适的化妆品成分的细节可以在以下文献中找到:“internationalcosmeticingredientdictionaryandhandbook[国际化妆品成分词典和手册]”,第十版(2004),由cosmetic,toiletry,andfragranceassociation(ctfa)[化妆品、化妆用具和香料协会]出版,在第2177-2299页,将其以其全文通过引用结合在此。这些不同底物的量是常规用于化妆品或医药领域的那些量,例如,它们可以单独地或集合地构成组合物的总重量的从约0.01%至约20%。可以将组合物配制成各种产品形式,例如像洗剂、面霜、精华液、喷雾剂、气雾剂、饼状产品、软膏、精华、凝胶、膏状产品、贴片、笔状产品、小湿纸巾、面膜、棒状产品、泡沫、全效精华(elixir),浓缩精华(concentrate)等,特别用于局部给予。组合物通常被配制成洗剂、面霜、软膏、或凝胶。包含香料藤属提取物(例如,水培生长的三蕊香料藤提取物,包括通过用包含5%-50%水和50%-95%乙醇(v/v)的溶剂系统提取获得的此类的提取物)的护肤组合物旨在用于局部施用至人体被,包括角质表面,如皮肤、嘴唇、指甲和头发。出于本披露的目的,术语“皮肤”包括嘴唇。通常,将组合物局部施用于皮肤。该组合物可以每天,每隔一天,每周等施用,但是当它们每天施用至少一次时(例如,每天施用一次或两次,包括每天早上或晚上一次),预期可获得最大益处。继续该处理足以改善皮肤的健康和/或实现减少皮肤衰老迹象的所期望的益处(例如,减少皱纹和/或细纹的数量或严重程度,增厚变薄的皮肤,或改善弹性,和/或减少下垂等)的一段时间。这可能需要至少每天一次局部施用,持续至少一周、或至少两周、或至少四周、或至少八周或更长时间。在一些实施例中,将组合物直接施用于皮肤的特定部位(即,直接到皱纹和/或细纹,眼睛下,疤上等)。在一些实施例中,该组合物将以从约0.001至约100mg/cm2,更典型地从约0.01至约20mg/cm2,或从约0.1至约10mg/cm2的量施用于皮肤。可以处理身体的许多区域,包括但不限于:脸部、额头、唇部、头皮、颈部、手臂、手、腿、膝盖、脚、胸部、背部、腹股沟、臀部、大腿等。在一些实施例中,将组合物施用于脸部、唇部、胸部、手臂和/或手,特别是脸部。在本发明的某些实施例中,将组合物局部施用以改善人皮肤的外观和/或健康。人皮肤外观和/或健康的改善可以是皮肤任意特质或特征的改善,包括但不限于:(a)处理、减轻、和/或预防细纹或皱纹;(b)减小皮肤孔隙大小;(c)改善皮肤厚度、饱满度、和/或紧致度;(d)改善皮肤光滑度、柔软度和/或细嫩度;(e)改善肤色、光泽度和/或透明度;(f)改善前胶原蛋白、和/或胶原蛋白产生;(g)改善弹性蛋白的维持和重塑;(h)皮肤纹理的改善和/或促进再纹理化;(i)改善皮肤屏障修复和/或功能;(j)改善皮肤轮廓外观;(k)恢复皮肤光泽和/或亮度;(l)补充皮肤中必需营养素和/或成分;(m)改善由衰老和/或绝经降低的皮肤外观;(n)改善皮肤保湿;(o)增加皮肤弹性和/或回弹性;(p)处理、减少和/或预防皮肤下垂;(q)改善皮肤紧致度;及(r)减少色斑和/或斑驳皮肤;以及(s)改善通过光衍射或反射的皮肤的光学性质。在一些实施例中,组合物旨在处理皮肤中皱纹和/或细纹,包括抬头纹,“鱼尾纹”和眼睛或嘴部边缘的皱纹。在一些实施例中,将组合物直接施用于皱纹和/或细纹。处理可以降低给定皮肤区域中皱纹和细纹的严重程度(例如,深度)和/或可以减少给定皮肤区域中皱纹和/或细纹数量。在一些实施例中,组合物旨在处理可能由真皮弹性丧失造成的下垂皮肤。在该实施例中,组合物可以施用于颊部、下颊等的皮肤。还考虑了本发明的方法是通过将组合物局部施用于对其有需要的个体的薄皮肤,用于处理薄皮肤。“薄皮肤”旨在包括由于自然衰老、绝经或光损伤而变薄的皮肤以及过早变薄的皮肤。在一些实施例中,处理用于男性中的薄皮肤,而其他实施例处理绝经前或绝经后女性中的薄皮肤,因为据信皮肤在男性和女性(并且特别是在不同生活阶段的女性)中随着年龄不同程度地变薄。本发明的方法可以预防性地用于阻止衰老,包括在未显现出皮肤衰老迹象的个体中,最常见在25岁以下的个体中。一旦显现出,如在25岁以上的个体中常见的,该方法还可以逆转或处理衰老迹象,或用于减缓这些个体的皮肤病衰老进展。在某些实施例中,在此所述的化妆品组合物可用于处理和/或预防不想要的色素沉着或皮肤和/或头发的色素沉着过度,例如使皮肤或毛发增亮。在一些实施例中,将组合物局部施用于皮肤或毛发,例如施用于色素沉着过度的皮肤或毛发的区域。色素沉着过度包括个体的皮肤或毛发的任何着色,其比个体所希望的更暗,并且由黑素细胞引起。这种不想要的色素沉着也可以称为变色。皮肤色素沉着过度区域包括分散或斑驳的色素沉着过度区域。离散的色素沉着过度区域可以是不同的、颜色较深的均匀区域,并且可能在皮肤上显示为褐斑或雀斑,包括通常称为色斑或“老年斑”的痕迹。皮肤斑驳的色素沉着过度区域可以是深色斑点,其在大小上大于分散色素沉着区域并且在形状上比分散色素沉着区域更不规则。色素沉着过度区域还包括晒黑的皮肤区域,例如因暴露于uv而晒黑的皮肤。色素沉着过度毛发包括颜色比期望的深的任意毛发色度。处理色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤/毛发是指根除、减轻、改善或逆转与色素沉着过度相关的不想要的一个或多个特性,如在受影响区域产生可感觉到的皮肤或毛发增亮。在一个实施例中,在如下方面,增亮皮肤的色素沉着过度区域可能是所希望的:减轻老年斑;增亮晒黑;使肤色均匀或优化肤色,例如在斑驳的色素沉着过度区域中;处理黑斑和黄褐斑斑块、雀斑、烧伤后瘢痕和损伤后色素沉着过度。预防色素沉着过度或色素沉着过度的皮肤是指向尚未受色素沉着过度影响的皮肤提供使其避免、延迟、预先阻止或最小化与皮肤色素沉着过度相关的一个或多个不想要的特性的益处,如减少最终形成的色素沉着过度的区域的暗色或大小。在一个实施例中,将本发明的组合物施用于人皮肤以减少皮脂产生或改善受脂肪团影响的皮肤的外观和/或减少不希望的脂肪生成或增加脂肪分解。在本实施例中,该组合物可以在面部组合物的情况下或在脂肪团处理的情况下包括一种或多种另外的试剂,如抗痤疮成分(例如,水杨酸、过氧化苯甲酰和其他过氧化物、硫、类视黄醇等),配置品可以包括适用于处理脂肪团的任何成分,包括但不限于紫苏油以及其他不饱和脂肪油和ω-3脂肪酸,如α-亚麻酸;咖啡因;茶碱;黄嘌呤;类视黄醇(例如,视黄醇);等。根据本发明的脂肪团处理通常将局部施用于患有脂肪团的皮肤(包括臀部和大腿皮肤)持续足以改善其外观的时间段,包括,例如每日处理,持续至少4周、至少8周、至少12周或更长时间。在一个实施例中,局部施用组合物以处理痤疮。在本发明的又另一个方面,根据治疗方案施用包含根据本发明的任何香料藤属(例如,水培生长的三蕊香料藤提取物)提取物的护肤组合物,所述治疗方案包括以任何顺序的以下步骤:(1)将包含(例如,水培)三蕊香料藤提取物的护肤组合物局部地至少每天一次施用于皮肤持续第一段时间(例如,1-31天或2-15天或5-10天或7天),(2)局部施用不含三蕊香料藤提取物的第二护肤组合物持续第二段时间(例如,1-31天或2-15天或5-10天或7天),和(3)任选地重复步骤(1)和(2)一次或多次(例如,至少四次、五次、六次、七次或八次)或至少直到注意到或观察到健康或外观或皮肤病学迹象或皮肤衰老的可见改善。在一些实施方式中,第一段时间和第二段时间是相等的,例如,均可以是一周时间。在一些实施方式中,第二护肤组合物将包含有效量(例如,按重量计,约0.001%-10%或0.01%-5%或0.1%-5%)的类视黄醇(例如视黄醇)、植醇、硫代二丙酸(或其二月桂基酯)、烟酰胺和/或乙醇酸。第一和第二组合物可以一起包装或分开包装。当包装在一起时,它们可以包括在单个容器内的单独储器中,该单个容器具有两个泵,用于分别分配每种组合物。该包装的组合物可进一步包括书面说明,用于以任何顺序的以下步骤:(1)将包含(例如,水培)三蕊香料藤提取物的护肤组合物局部地至少每天一次施用于皮肤持续第一段时间(例如,1-31天或2-15天或5-10天或7天),(2)局部施用不含三蕊香料藤提取物的第二护肤组合物持续第二段时间(例如,1-31天或2-15天或5-10天或7天),和(3)任选地重复步骤(1)和(2)一次或多次(例如,至少四次、五次、六次、七次或八次)或至少直到注意到或观察到健康或外观或皮肤病学迹象或皮肤衰老的可见改善。在一个实施例中,组合物旨在用作非治疗性处理。在另一个实施例中,根据联邦食品、药品和化妆品法案(usfd&cact),§201(i),该组合物是旨在擦、倒、喷洒或喷雾、引入或以其他方式施用于人体的物品,用于清洁、美化、提高吸引力或改变外观。实例以下实例说明了本说明书的特定方面。该实例不应被视为起限定作用,因为该实例仅提供对实施例及其不同方面的特定理解和实施。实例1水培三蕊香料藤植物生长。水培三蕊香料藤植物可以如下培养。将无病虫害的三蕊香料藤植物的茎切成约4英寸长的片段。每个单独的扦插包括叶和芽眼。在72个隔室托盘的每个隔室中放置两个扦插,其中每个隔室包含排水良好的泥炭混合物。扦插在水雾中以70%阴蔽保持。由于雾循环之间的干燥,一些叶子被切成一半以减少蒸腾损失。扦插在7-10天内开始形成愈伤组织,并且在不使用生根激素的情况下在40天内完全生根。将生根的两个扦插放在椰壳纤维板中(可从挪威的jiffy公司(jiffy)获得)。每个椰壳纤维板应包括底部的两个排水狭缝和顶部的两个移植孔。椰壳纤维板用全强度营养液(新泽西州的arc温室公司(arcgreenhouses))在5.9的ph下膨胀。将两个滴灌灌水器(以色列的耐特菲姆公司(netafim))放置在每棵植物的位置,并且用于将营养液直接递送到椰壳纤维板的根部。基于作物接收的光合有效辐射(par)的量来调节营养液的递送量,以维持恒定的代谢率。在一年中阳光最强的时候中,30%的aluminet遮阳布可以放置在作物上。白天温度保持在约74°f至约84°f,伴随在作物上方的良好的空气流动。可使用网格来支撑生长。例如,两个椰壳纤维板可以端对端放置,并且在两排植物之间建立网格。可替代地,可以将板悬在地面上,植物叶子向下生长而不用使用网格。在所有情况下,如果需要,为了控制昆虫种群如蓟马,每四天向植物上喷洒1.5盎司m-pede杀虫皂(可从亚利桑那州的gowan公司(gowan)获得)/加仑水的混合物以减少蓟马侵染。实例2水培三蕊香料藤的提取。通过使用乙醇提取方案提取水培生长的三蕊香料藤植物的藤来获得提取物。简言之,将干燥植物的藤研磨成小颗粒,得到粉末。用包含80%乙醇/20%水(v/v)的溶剂提取研磨粉末。将溶液通过木炭以除去单宁并过滤。通过真空蒸发除去溶剂,得到浓缩的提取物。可以将浓缩的提取物冻干。提取物呈油的形式,其具有“活性”或固体含量为约50%(w/w)。实例3三蕊香料藤提取物的hplc。三蕊香料藤提取物的hplc表征如下进行。在具有agilentzorbaxsb-c18柱(7.5cm×4.6mm×3.5μm)的thermotsphplc系统(p2000泵,as3000自动进样器,sn4000控制器,uv6000检测器)在40℃收集样品,并在260nm、300nm和360nm处检测。注射体积为20μl,流速为1.5ml/min,梯度(v/v)如下表1所示。表1.时间(min)甲醇1%乙酸015%85%1095%5%1195%5%11.0115%85%1515%85%(a)三蕊香料藤提取物(通过使用20/80(v/v)水/乙醇提取溶剂从水培生长的植物提取制备),和(b)田间生长的三蕊香料藤提取物(通过使用20/80(v/v)水/乙醇提取溶剂从田间(即,土壤)生长植物提取制备)的hplc迹线分别示出在图1(a)和1(b)中。实例4刺激人3d皮肤组织中的ha产生。方法:按照制造商的说明书培养人3d皮肤eft400ft(mattek公司(mattek),美国马萨诸塞州)组织。将三蕊香料藤提取物(使用20/80(v/v)水/乙醇从水培生长植物中提取)从10%(w/w)水提取物的储备溶液中直接添加到培养基中,其量足以实现培养基中的终浓度为0.2%(w/w)。在给药后24小时收集具有和不具有三蕊香料藤提取物的培养基(eft-400-mm)并且添加具有和不具有三蕊香料藤提取物的新鲜培养基。汇集来自3天收集的条件培养基并测定ha水平。使用透明质酸测试试剂盒(corgenix公司(corgenix,inc.),美国科罗拉多州)测量ha产生。简言之,将100μl稀释的条件培养基添加至合适的微孔中,并在室温孵育60分钟。孵育完成后,除去条件培养基并向每个孔中添加100μl的hrp缀合的habp的溶液,并在室温孵育30分钟。孵育完成后,用pbs洗涤每个孔4次。向每孔添加100μl单组分底物溶液,在室温孵育30分钟。添加100μl终止溶液以终止酶反应并读取每个孔在450nm处的o.d.。从该标准曲线计算条件培养基中ha的量。透明质酸产生的刺激报告为透明质酸水平相对于对照的百分比变化,如下表2中所示。表2.处理:%变化p值0.2%(w/w)三蕊香料藤(水培)97.920.020.2%(w/w)三蕊香料藤(田间生长)19.200.27如上所示,当局部施用于人皮肤的3d组织模型时,0.2%(w/w)的水培生长的三蕊香料藤的提取物产生了在成纤维细胞中ha水平的统计学显著性(p<0.05)增长,而在其他方面相同的田间生长的三蕊香料藤的提取物则没有。实例5协同刺激人3d皮肤组织中的ha产生。使用护肤活性乙醇酸单独或与水培三蕊香料藤提取物组合重复实例4的相同步骤,以研究水培三蕊香料藤提取物和乙醇酸之间可能的协同作用。以与实例4相同的方式将三蕊香料藤提取物(使用20/80(v/v)水/乙醇从水培生长的植物中提取)施用于培养基中。将乙醇酸配制到下表3中提供的基础配方中,其量计算为在乳液中提供0.5%(w/w)浓度的乙醇酸。将30μl的0.5%(w/w)乙醇酸乳液分四份施用于组织的顶端表面。用乙醇酸配制品将组织每天处理8小时,连续3天。在每天处理结束时,用磷酸盐缓冲盐水冲洗测试品。表3.基础配方结果报告为ha水平相对于对照的百分比变化,如下表4所示。表4.如上所示,当局部应用于人皮肤的3d组织模型时,与单独的乙醇酸或单独的提取物相比,0.5%(w/w)乙醇酸和0.2%(w/w)水培生长的三蕊香料藤提取物的组合产生了成纤维细胞中ha水平的大幅增加。据信,水培生长的三蕊香料藤提取物和乙醇酸的组合在皮肤细胞如真皮成纤维细胞中产生了大于加和的或协同的ha水平增加。在一些实施例中,水培生长的三蕊香料藤提取物和乙醇酸将在护肤组合物中以约10:1至约1:10或从约5:1至约1:5或从约3:1至约1:3或从约5:2至约2:5或从约2:1至约1:2或从约3:2至约2:3或约1:1的重量比存在。在一些实施例中,乙醇酸和水培生长的三蕊香料藤提取物的集合量范围将为按整个组合物的重量计约0.1%-10%或约0.1%-7.5%或约0.2%-5%或约0.5%-2.5%。实例6协同刺激人3d皮肤组织中的ha产生。使用护肤活性烟酰胺单独或与水培三蕊香料藤提取物组合重复实例5的相同步骤,以研究水培三蕊香料藤提取物和烟酰胺之间可能的协同作用。以与实例4相同的方式将三蕊香料藤提取物(使用20/80(v/v)水/乙醇从水培生长的植物中提取)施用于培养基中。将烟酰胺配制到表3中的基础配方中,其量计算为在乳液中提供5%(w/w)浓度的烟酰胺。将30μl的5%(w/w)烟酰胺乳液分四份施用于组织的顶端表面。将组织用烟酰胺配制品每天处理8小时,连续3天。在每天处理结束时,用磷酸盐缓冲盐水冲洗测试品。结果报告为ha水平相对于对照的百分比变化,如下表5所示。表5.如上所示,当局部应用于人皮肤的3d组织模型时,与单独的烟酰胺或单独的提取物相比,5%(w/w)烟酰胺和0.2%(w/w)水培生长的三蕊香料藤植物提取物的组合产生了成纤维细胞中ha水平的大幅增加。据信,水培生长的三蕊香料藤提取物和乙醇酸的组合在皮肤细胞如真皮成纤维细胞中产生了大于加和的或协同的ha水平增加。在一些实施例中,水培生长的三蕊香料藤提取物和烟酰胺将在护肤组合物中以约100:1至约1:100或从约75:1至约1:75或从约50:1至约1:50或从约25:1至约1:25或从约10:1至约1:10或从约5:1至约1:5或从约2:1至约1:2或从约3:2至约2:3或约1:1的重量比存在。在一些实施例中,烟酰胺和水培生长的三蕊香料藤提取物的集合量范围将为按整个组合物的重量计约0.1%-10%或约0.1%-7.5%或约0.2%-5%或约0.5%-2.5%。实例7刺激透明质酸合酶(has)基因表达。使用trizol试剂(赛默飞世尔科技公司(thermofisherscientific),马萨诸塞州)从每个处理的3d皮肤eft400ft组织中分离总rna。使用supercriptiii第一链合成试剂盒(赛默飞世尔科技公司(thermofisherscientific),马萨诸塞州)将1μg总rna用于产生cdna。根据制造商的方案将逆转录酶、缓冲液、dntp、随机引物和rnase抑制剂与rna进行稀释。25ngcdna用于20μlq-pcr反应。简而言之,将10μl的taqman高级主要混合物(赛默飞世尔科技公司(thermofisherscientific),马萨诸塞州)、4μl的h2o、5μl的cdna、和1μl的has引物(has2hs00193435_m1和has3hs00193436_ml,美国应用生物系统公司(appliedbiosystems))或作为管家基因的18s(hs99999901_s1,美国应用生物系统公司(appliedbiosystems))在96孔板中混合。qpcr的条件是95℃持续20秒的孵育步骤,然后是95℃持续3秒和60℃持续30秒的40个循环。ct值和rq值从appliedbiosystems7500快速实时pcr系统的软件获得。结果示出在下表6中,作为透明质酸合酶基因表达相对于对照的百分比变化。表6.has2基因has3基因处理:%变化%变化乙醇酸没有效果101烟酰胺没有效果106三蕊香料藤提取物(水培)496112如表6所示,水培三蕊香料藤提取物,和乙醇酸和烟酰胺一样,上调透明质酸合酶的has3基因的表达。然而,与乙醇酸和烟酰胺不同,水培三蕊香料藤提取物也上调透明质酸合酶的has2基因。事实上,水培三蕊香料藤提取物是has2基因表达的一个很有效的上调因子,观察到了接近5倍的增加。基于该数据,据信水培三蕊香料藤提取物的作用方式与乙醇酸、烟酰胺或has2和/或has3基因的其他上调因子是互补的和不同的。由于在不脱离本发明的范围和精神的情况下,可以对上述主题进行各种改变,所以旨在将以上述描述中包含的或所附权利要求中限定的所有主题解释为本发明的描述和说明。根据以上传授内容,本发明的很多修改和变化都是可能的。因此,本说明书旨在包含落在所附权利要求的范围内的所有这样的替代方案、修改和变化。当前第1页12
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