一种人体宫颈脱落细胞保存液的制作方法

文档序号:16042076发布日期:2018-11-24 10:33阅读:874来源:国知局

本发明涉及生物制剂技术领域;具体涉及一种人体宫颈脱落细胞保存液。



背景技术:

目前,正常人体活细胞在脱落前是具有生理学功能、生物学活性及完整的细胞形态,在生物学研究和医学检验中具有重要的价值。若是离开人体,脱落的细胞其生理学功能、生物学活性及细胞形态结构也将发生改变。因此,如何有效保存脱落细胞形态和结构是细胞学检测中需要考虑的问题。主要从传统和常规上有以下几种检查方法:

在传统的细胞学检查方法巴氏涂片法(即宫颈刮片)制成的涂片,存在大量细胞重叠现象,并且存在一些无检验价值的杂细胞,这给病理结果带来了一定的误差。

而在常规的宫颈癌筛查中,有液基薄层细胞学、pcr、bdna等技术方法。液基薄层细胞学检查(英文简称tct)是常用的技术手段之一,目前在欧美和我国的大中城市,越来越广泛的应用于宫颈细胞学筛查中。tct是一种现代化的宫颈细胞学涂片技术,通过采集人体宫颈表面的脱落细胞,经染色后用显微镜观察这些细胞的形态和结构,并做出诊断。pcr和bdna技术是采用宫颈上皮细胞分别进行dna和rna的检测。但是从上述几种方法中可以看出都是采用人体宫颈脱落细胞样品进行检测,因而细胞保存液是检测前细胞保存的关键。目前,美国新柏氏(thinprepcytologictest)细胞保存液是与其仪器(thinpreper-2000)配套使用的专用试剂,但是价格昂贵,加重患者的治疗成本。

因此,本发明是在主要解决目前现有技术存在以上不足的基础上研发出来的。



技术实现要素:

本发明的目的是解决以上技术问题,特别提出一种降低成本、兼容性强、有效的对人体宫颈脱落细胞样品进行固定保存的细胞保存液。

基于上述目的,本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现:

一种人体宫颈脱落细胞保存液,其特征在于,它由氯化钠、氯化钾、proclin300、乙醇、乙二醇、柠檬酸钠、磷酸盐缓冲液、谷胱甘肽组成,其中氯化钠0.1-0.9%,氯化钾0.01-0.09%,proclin3000.01-0.1%,10-50mm磷酸盐缓冲液(ph7.0-7.4),乙醇10-30%,乙二醇5-10%,柠檬酸钠5-10mm,谷胱甘肽1-10g/l。

最优的,其中,氯化钠0.41%,氯化钾0.04%,proclin3000.04%、20mm磷酸盐缓冲液(ph7.0),乙醇26%,乙二醇6%,柠檬酸钠6mm,谷胱甘肽3g/l。

本发明组分的技术原理:

氯化钠、氯化钾:是一种渗透压维持剂。

柠檬酸钠:是一种抗聚集试剂,能避免细胞堆积。

谷胱甘肽:是一种粘液处理剂,能分解细胞样本液中的组织粘液以防止粘液团影响宫颈脱落细胞的沉降制片。

proclin300:是一种防腐剂,能有效地杀灭样品中的细菌、真菌、酵母菌等病原体,延长保存液的保存时间,同时能保护工作环境及工作人员健康。

乙醇、乙二醇:固定剂,能快速对样品中的白细胞、上皮细胞等有检验价值的细胞进行固定保存,有效保存细胞形态完好,同时也可以维持细胞内核酸的完整性。

磷酸盐缓冲液:缓冲液ph7.0-7.4,可有效维持细胞形态特征。

本发明的有益效果是:

1、该细胞保存液中包括ph缓冲剂、渗透压维持剂,能有效保存细胞形态结构完整,无细胞溶解和细胞肿胀现象,该细胞保存液含有细胞固定剂成分,可有效快速对样品中的上皮人体宫颈脱落细胞、白细胞等人体宫颈脱落细胞进行固定保存,防止细胞发生自溶。

2、该细胞保存液能有效降低核酸降解,易于后续核酸的检测研究。

3、兼容性强:保存的细胞可同时进行免疫细胞化学、tct、hpv-pcr、bdna等分子生物技

术检测,无需多次采样。

4、成分简单、价格低廉、易于推广。

5、使用简单,操作方便,大大节省了制备样品的时间。

具体实施方式

以下通过具体的实施方式,进一步阐述本发明。

一种人体宫颈脱落细胞保存液,其特征在于,它由氯化钠、氯化钾、proclin300、乙醇、乙二醇、柠檬酸钠、磷酸盐缓冲液、谷胱甘肽组成,其中氯化钠0.1-0.9%,氯化钾0.01-0.09%,proclin3000.01-0.1%,10-50mm磷酸盐缓冲液(ph7.0-7.4),乙醇10-30%,乙二醇5-10%,柠檬酸钠5-10mm,谷胱甘肽1-10g/l。

实施例1,本发明的细胞保存液配制方法为,氯化钠0.41%,氯化钾0.04%,proclin3000.04%、20mm磷酸盐缓冲液(ph7.0),乙醇26%,乙二醇6%,柠檬酸钠6mm,谷胱甘肽3g/l,让上述各组分均匀搅拌溶解即可。

通过以上实施例配制出的细胞保存液,使用过程中,降低了使用成本,真正有效的保护了细胞的完整性和固定性,避免细胞溶解和膨胀,易推广,兼容性强,节省了制备样品的时间。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不限制本发明应用领域。凡在本发明精神和原则之内所做的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。



技术特征:

技术总结
本发明提供了一种人体宫颈脱落细胞保存液,它由氯化钠、氯化钾、proclin300、乙醇、乙二醇、柠檬酸钠、磷酸盐缓冲液、谷胱甘肽组成,本发明降低了使用成本,真正有效的保护了细胞的完整性和固定性,避免细胞溶解和膨胀,易推广,兼容性强,节省了制备样品的时间。

技术研发人员:赵彬;王晨
受保护的技术使用者:武汉宏强医疗器械有限公司
技术研发日:2017.05.11
技术公布日:2018.11.23
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