使用至少两种抗微生物化合物的组合可以拓宽潜在市场，降低使用浓度和成本并减少浪费。在一些情况下，商用抗微生物化合物即使在高使用浓度下也无法提供对微生物的有效控制，这归因于对某些类型的微生物的弱活性，或相对较慢的抗微生物作用，或在某些条件，如高温和高ph下的不稳定性。有时会使用不同抗微生物化合物的组合来提供微生物的总体控制或在特定的最终使用环境中以较低的使用率提供相同水平的微生物控制。此外，已发现协同作用是一种不可预测的现象。通常，当与具体活性组合时，类似的化合物会显示不同的协同概况。可能发生的情况是不显示协同作用或在不同协同范围内发生协同作用。因为这一观察结果，难以(如果不是不可能)基于一类化合物的协同概况总结出关于一种化合物的协同概况的结论。因此，必须发现更多的协同组合和其协同范围。
关于此类协同作用的实例可见于美国专利申请公开第2007/0078118号。这一参考文献公开了n-甲基-1，2-苯并异噻唑啉-3-酮(mbit)与其它杀生物剂的协同组合。仍需要具有增强的活性的抗微生物化合物的其它组合以提供对微生物的有效控制。本发明解决的问题是提供这类抗微生物化合物组合。
在本发明中，提供一种协同抗微生物组合物，其包含3-碘-2-丙炔基-氨基甲酸丁酯(也称为碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯和ipbc)(cas登记号为55406-53-6)和n-(3-氨基丙基)-n-十二烷基丙烷-1，3-二胺(又称二胺)(cas注册号是2372-82-9)。
本发明进一步提供一种抑制水性介质中微生物生长或控制其生长的方法，所述方法包含添加包含ipbc和二胺的协同抗微生物组合物的步骤。此外，提供一种涂层和含有3-碘-2-丙炔基-丁基氨基甲酸酯和二胺的干膜。
以下为本发明的具体实施方式。
除非上下文另外明确指示，否则如本文所用的以下术语都具有指定定义。
术语“抗微生物化合物”是指能够抑制微生物生长或控制其生长的化合物；取决于所施加的剂量水平、系统条件以及所希望的微生物控制水平，抗微生物化合物包括杀细菌剂、抑细菌剂、杀真菌剂、抑真菌剂、除藻剂、抑藻剂以及除草剂。如本文所用的此类术语“抗微生物化合物”与术语“杀生物剂”同义。
术语“微生物”包括例如真菌(如酵母和霉菌)、细菌以及藻类。
在整个说明书中使用以下缩写：ppm＝每百万份的重量份数(重量/重量)，ml＝毫升，atcc＝美国典型培养物保藏中心(americantypeculturecollection)，sag＝哥廷根大学藻类培养物收集保藏中心(culturecollectionofalgaeatgoettingenuniversity)，ccap＝藻类和原生动物培养物保藏中心(culturecollectionofalgaeandprotozoa)，dsmz＝德意志微生物和细胞培养物保藏中心(deutschesammlungvonmikroorganismenundzellkulturen)，mic＝最小抑制浓度。
除非另外指明，否则温度以摄氏度(℃)为单位，并且对百分比的提及是指重量百分比(wt％)。本发明组合物中抗微生物化合物的百分比是基于组合物中活性成分的总重量，即抗微生物化合物本身，不包括任何量的溶剂、载剂、分散剂、稳定剂或可能存在的其它物质。
如本文所用，“ipbc”是3-碘-2-丙炔基-丁基氨基甲酸酯(cas登记号55406-53-6)。
如本文中所用，“二胺”是n-(3-氨基丙基)-n-十二烷基丙烷-1，3-二胺(cas登记号2372-82-9)
当比率在本文中是“x∶1或更高”时，意味着所述比率是y∶1，其中y是x或大于x，并且当比率在本文中是“x∶1或更低”时，意味着所述比率是z∶1，其中z是x或小于x。“1∶x或更高”和“1∶x或更低”的比率遵循相同逻辑。
本发明是含有ipbc和二胺的组合物。已出人意料地发现，包含ipbc和二胺的组合物作为杀生物剂协同有效。在本发明中，ipbc与二胺的重量比为1∶10至10∶1，替代地为1∶1至1∶10，并且进一步替代地为10∶1至1∶1。
在本发明的一些实施例中，本发明的抗微生物组合适用于抑制水性介质中微生物的生长或控制其生长。此类水性介质包括(但不限于)工业用水和含水/污染介质，如冷却水、空气清洗器、热交换器、锅炉水、纸浆和造纸厂水，其它工业过程水介质，如：压载水、废水、金属加工液、油气、乳胶、油漆、涂料、粘合剂、油墨、胶带接合化合物、颜料、水基浆料，个人护理和家用产品，如洗涤剂、过滤系统(包括反渗透和超滤系统)、厕所马桶、纺织品、皮革和皮革生产系统或与其一起使用的系统。在一个实施例中，抗微生物组合物用作罐内防腐剂。
通常，用于抑制微生物生长或控制其生长的本发明杀生物剂组合物的量呈10ppm至5,000ppm活性成分。在本发明的一些实施例中，组合物的活性成分以至少20ppm、或者至少50ppm、或者至少100ppm、或者至少150ppm、或者至少200ppm的量存在。在一些实施例中，组合物的活性成分的存在量不超过2,000ppm、或者不超过1,000ppm、或者不超过500ppm、或者不超过400ppm、或者不超过300ppm、或者不超过250ppm、或者不超过200ppm、或者不超过100ppm、或者不超过50ppm。含有杀生物剂组合的液体组合物呈上述浓度。
本发明还涵盖一种通过将所要求保护的杀生物剂组合掺入到材料中来抑制上述使用区域中，特别是在罐内防腐剂应用中的微生物生长或控制其生长的方法。
本发明组合物含有ipbc和二胺。预期一些实施例可含有一种或多种另外的抗微生物化合物。
以下是本发明的实例。
使用kull，f.c.等人《应用微生物学(appliedmicrobiology)》9：538-541(1961)描述的方法测定本发明的杀生物剂组合的协同作用。
计算协同指数(si)的公式是
qa/qa+qb/qb＝si
其中
qa＝化合物a的浓度(ppm)，单独作用产生终点(生长/无生长)
qa＝化合物a的浓度(ppm)，呈混合物形式，其产生终点(生长/无生长)
qb＝化合物b的浓度(ppm)，单独作用产生终点(生长/无生长)
qb＝化合物b的浓度(ppm)，呈混合物形式，其产生终点(生长/无生长)
当si的值小于1时，证明两种杀生物剂内的协同作用。如果si等于1，那么混合物显示出附加效应，如果si大于1，则显示出拮抗作用。
最低抑制测试(mic)旨在评估杀生物剂、杀生物剂混合物或杀生物剂组合防止微生物在限定的肉汤中生长的最低浓度。
mic和协同测试如下进行：
1.使用hamiltonmlstarplus机器人使用bioteksynergyh4读板器进行自动浊度读数测试。
2.通过将来自储备液的杀生物剂转移并稀释到第一排板中，在2.2ml深孔板中制备杀生物剂板。将储备液瓶中的杀生物剂浓度调节至比最高所需浓度高20倍。
3.然后进行15次稀释因子为1.3的连续稀释，得到每种系统16种不同的浓度。
4.在接下来的步骤中，将连续稀释的杀生物剂系统转移到每个孔中含有850μl胰蛋白酶大豆肉汤的介质块(mediablock)，所述肉汤包含酪蛋白(胰消化)17g/l、大豆蛋白胨(木瓜酶消化)3g/l、氯化钠5g/l、磷酸氢二钾2.5g/l、葡萄糖2.5g/l(“tsb”)，含有不同浓度的mowiol18-88部分水解聚乙酸乙烯酯表面活性剂，可从可乐丽欧洲公司(kurarayeuropegmbh)购得。在单一杀生物剂系统的情况下，转移100μl，并且在杀生物剂组合的情况下，将50μl每种杀生物剂稀释液转移至培养基，由杀生物剂板产生950μl最终体积的培养基+杀生物剂和9.5倍杀生物剂稀释液。此时，介质中的所有杀生物剂的浓度为1.053×最终浓度。
5.在制备和混合所述系统后，在96孔微量滴定板中制备3个190μl等分试样。
6.微生物悬浮液的制备：
细菌培养物：
铜绿假单胞菌(pseudomonasaeruginosa)dsm#939atcc#15442
金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)dsm#799atcc#6538
将培养物在-80℃下在冷冻瓶中保持呈甘油储备液形式。解冻冷冻管，然后在tsb琼脂板上涂铺100μl。在30℃下培育1天后，用ph7.3的缓冲液收集细菌。对tsb板进行总活菌计数，并将细菌悬浮液在缓冲液中稀释，以递送～2×107cfu/ml。
酵母培养物：
白色念珠菌(candidaalbicans)dsm#1386atcc#10231
将培养物在-80℃下在冷冻瓶中保持呈甘油储备液形式，解冻，然后在麦芽提取物琼脂(mea)培养皿上涂铺100μl。
将酵母菌株板在28℃下培育1-2天，然后用ph5.0的缓冲液收集。
基于总活菌计数结果，制备接种物。
7.用10μl微生物悬浮液接种每个测试样品(190μl)以提供～1×106cfu/ml水平的酵母物种。
8.将测试样品混合并在30℃下分别在针对细菌测试时培育2天(48小时)，并在针对酵母测试时培育3天(72小时)。
9.微生物的生长在培育后导致浑浊，澄清表明无生长。通过在测试开始时(t0)和培育后(t终点)测量每个样品在600nm处的吸光度来进行结果的读取。针对细菌在48小时时并且针对酵母在72小时时选择t终点。t终点和t0之间的吸光度差异用于指定得分(“1”，如果δ＞0.2，确认生长，并且“0”，如果δ≤0.2，确认无生长)，从中得出mic值。将培养后肉汤中未显示生长(得分“0”)的最低浓度作为mic值。
针对细菌和酵母测试的单一杀生物剂和两种杀生物剂组合的结果展示于表1和2中。
表1：单一杀生物剂和两种杀生物剂的组合的mic结果(ppm)：
表2：表1中组合的计算协同指数