一种提高鲥鱼成活率的养殖方法与流程

文档序号:14527800阅读:470来源:国知局

本发明属于养殖技术领域,具体涉及一种提高鲥鱼成活率的养殖方法。



背景技术:

浔江鱼是浔江水产资源丰富。浔江鱼与合浦珍珠、容县沙田柚齐名,并称为“广西三宝”。浔江鱼中最负盛名的要算是鲥(shí)鱼。鲥鱼(背黑绿色,腹银白色,鳞下多脂肪,肉味很美)原产于太平洋,每年春夏间成群结队经南中国海游入内河,沿珠江、西江而上,在浔江产卵繁衍后代。在浔江沿岸一带,人们多称之为“三鯠鱼”,取其每年农历三月必来之意。

渔汛期间,自桂平城区至大湟江口约百里河面上,千帆竞发,渔民们争相捕捞三鯠鱼,景象极为壮观。三鯠鱼形扁而长,色白为银,腹下有角鳞,多脂肪,味鲜美。三鯠鱼肉中多细刺,但高明的厨师善于操刀,切割得法,能烹调出独具特色的美妙佳肴来。由于人类的大量捕捞三鯠鱼的产量已大大减少。

可见鲥鱼的市场需求空间很大,因此,在现在的条件下,进行人工养殖迫在眉睫。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种提高鲥鱼成活率的养殖方法,方法简单易行,本发明的养殖方法能提高鲥鱼成活率,产量相比现有技术的养殖方法提高了至少53千克/亩。

为了实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:

一种提高鲥鱼成活率的养殖方法,包括以下具体步骤:

(1)选址:选址日照时间在12小时以上,光照强度在1100-1200lux,气温在20-25℃,昼夜温差在8℃内的平原上建设鱼塘,鱼塘设置有加水口与排水口,通过加水口加入水,排水口排水形成鱼塘中的水为流动活水,鱼塘设置为1000-1200平米,在鱼塘四周使用鹅卵石垒砌成壁,使用质量浓度为5-10%石灰水对鱼塘进行鱼塘内壁消毒然后暴晒1-3天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植玉米,然后鱼塘底部铺上一层5厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层5厘米的黑淤泥,种植水草,水草的覆盖率为50-60%,在鱼塘中繁殖浮游生物,间隔一个月往鱼塘撒一次豆腐渣,豆腐渣的泼洒量为50-100千克/亩3;

(2)选鱼苗:选种无病、活跃、规格在3-5厘米的鲥鱼鱼苗放入鱼塘中,鱼塘放养的密度为1000-1200尾/亩,在放养鱼苗前对鱼苗使用质量浓度为1-1.5%盐水浸泡3-5分钟;

(3)水质的调节:控制鱼塘内的水质ph为8.0-9.0,透明度为30-40cm,溶解度保持于5-8mg/l;

(4)喂养管理:当鲥鱼长至30-80g,每天投放5次饲料,投放量为100-300g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至90-150g,每天投放8次饲料,投放量为350-600g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至160-300g,每天投放10次饲料,投放量为850-1000g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至300-600g,每天投放12次饲料,投放量为1300-1600g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;

(5)预防病害管理:每间隔20-30天喷洒一次防病添加液,防病添加液每次的投放量减少1%,初次投放防病添加液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:发酵预混料20-30%、芝麻粉8-15%、海鲜粉6-12%、棉籽粕10-15%、燕麦粉10-15%、富硒黑米粉粉5-15%、富硒黑米粉5-10%、茶籽粉5-10%、复合氨基酸3-8%;

所述发酵预混料由以下原料制备得到:俄罗斯饲料菜20-30重量份、三楞草20-30重量份、丝克高粱20-30重量份、花生提取物20-30重量份、混合发酵菌5-8重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶1-3重量份、地衣芽孢杆菌2-5重量份、黑根霉菌3-8重量份、红球菌2-7重量份;

所述防病添加液由以下原料制备得到:马钱子提取物25-38mg/l、麻黄提取物20-31mg/l、草木樨提取物41-52mg/l、秦皮壳提取物40-52mg/l、绿茶提取物38-43mg/l、石榴皮提取物57-68mg/l、马齿苋提取物61-75mg/l、生姜提取物40-50mg/l。

在本发明中进一步说明,所述复合氨基酸包括1-5重量份赖氨酸、2-8重量份色氨酸、3-8重量份苯丙氨酸、2-6重量份甲硫氨酸、3-6重量份苏氨酸、2-5重量份异亮氨酸、1-3重量份亮氨酸、1-3重量份缬氨酸。

在本发明中进一步说明,所述纤维素酶的活菌数为3-5亿cfu/g、地衣芽孢杆菌的活菌数为5-9亿cfu/g、黑根霉菌的活菌数为2-8亿cfu/g、红球菌的活菌数为3-8亿cfu/g。

在本发明中进一步说明,所述发酵预混料是由以下方法制备得到的:

s1,将花生去皮取花生仁加入2-5倍体积的水搅碎打浆5-10分钟装入锥形瓶中,接着加入0.1-0.2%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至5-6得到混合浆液,再加入浆液2-3%体积的混合分解酶于锥形瓶中57-62℃下进行摇床酶解20-35分钟,过100目筛后,采用离心机进行离心2-5分钟即可得到花生提取物;

s2,将新鲜的丝克高粱清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入700-800℃的蒸汽进行蒸煮5-10分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机50-60℃进行烘干至含水率15-20%即可;

s3,将三楞草、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1、s2处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5-8天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为60-70℃。

在本发明中进一步说明,所述混合分解酶是由3-8重量份纤维素分解酶、2-6重量份枯草杆菌蛋白酶、3-5重量份麦芽糖酶、1-5重量份木聚糖分解酶组成。

在本发明中进一步说明,所述摇床的速率为20-25r/min,所述离心机的离心转速为1500-2000r/min。

在本发明中进一步说明,所述马钱子提取物是由以下方法制备得到的:将马钱子洗净粉碎,加入50-65%(v/v)乙醇溶液于50-60℃下进行加热回流提取10-20分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入5-10倍体积的醋酸溶液调节ph至4.5-5.5,于55℃下,100-120赫兹高压脉冲电场脉冲处理0.5-1.2×10-6-3×10-6s,提取20-30分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到马钱子提取物,提取物中主含有马钱子碱45.36-89.46mg/g、士的宁42.36-56.24mg/g;

所述麻黄提取物是由以下方法制备得到的:将麻黄洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入50-65%(v/v)乙醇溶液于40-50℃下进行加热回流提取5-10分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至4.0-5.0后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于45-50℃下水浴酶解20-30分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到麻黄提取物,提取物中主含有总生物碱0.485-0.597g/g。

在本发明中进一步说明,所述草木樨提取物是由以下方法制备得到的:将草木樨在压力3-5mpa下进行超微粉碎后过10-20目筛,加入10-20倍水回流提取于50-60℃下提取20-30分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.2-1.5倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入80-85%(v/v)乙醇溶液进行醇提1-2小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为5-6bv,洗脱流速为3-4bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到草木樨提取物,提取物中主含有香豆素45.36-68.97mg/g;

所述秦皮提取物是由以下方法制备得到的:将秦皮洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入80-85%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为60-68℃、提取的时间为30-40分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置5-10分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到秦皮提取物主含有香豆素类物质32.25-47.15mg/g、黄酮类物质28.36-41.08mg/g;所述秦皮:白油:硅藻土的重量比为3-5:0.01:0.05-0.08。

在本发明中进一步说明,所述绿茶提取物是由以下方法制备得到的:将绿茶干燥在压力3-5mpa下进行超微粉碎后过50-100目筛,使用3-5倍体积、温度为100-120℃的水恒温浸泡绿茶茶粉5-10分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至2.0-3.0,使用65-75%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡20-30分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到绿茶提取物主含有茶多酚196.36-235.26mg/g;

所述石榴皮提取物是由以下方法制备得到的:将石榴皮粉碎后,加入80-85%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于80-90℃下进行回流提取30-40分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到石榴皮提取物主含有鞣质类物质120.32-186.47mg/g。

在本发明中进一步说明,所述马齿苋提取物是由以下方法制备得到的:将马齿苋加入3-8倍的水煎煮45-55分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.01-1.02倍即可得到马齿苋活性成分的马齿苋提取物;

生姜提取物是由以下方法制备得到的:将生姜加入5-10倍的水煎煮60-70分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.12-1.15倍即可得到生姜活性成分的生姜提取物。

综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:

1.本申请的养殖方式中采用了仿照野生的条件,给足空间、水温、日照、水质浓度、浮游的生物等等,使得鲥鱼具有很好的适应性提高成活率,通过严格的配加饲料的提高采食量和利用率,促使鲥鱼体重增加,本申请中的饲料营养全面均衡,能够提供鲥鱼生长所需的营养元素,而不会因为缺少营养元素而生长缓慢,添加的发酵预混料中利用了有害的杂草变废为宝,是一种能资源利用杂草的一种新处理方式,丝克高粱在进行发酵中会酶解产生氢氰酸鲥鱼食用后会引起脑、心血管等系统的机能障碍,因此不能直接发酵后食用需要进一步的进行处理降解丝克高粱的氰化物,本申请人经过研究发现,通过本申请的技术处理方法,能迅速的将有毒物质进行脱毒降解了本身的毒性,减少在发酵释放的量,且在发酵过程中由于有温度有微生物作用产生的化学反应会引起一系列的性质变化,产生一些促进吸收的营养物质和促进动物生长的因子,至今还尚未有一个详细的报道其中的原理,因此在发酵前对原料进行脱毒是非常有必要的,经过研究发现经过脱毒后使得发酵过程中有毒物质释放量减少但并未彻底,通过复配的微生物进行降解大大降低有毒物质的含量,增加了饲料的安全性,且发现有毒物质降解后饲料的有机物含量有所提高;通过本申请的配方饲料硒元素含量达到89.31μg/g,在进行饲养中鲥鱼吸收硒元素营养物质,经过检测相比较使用本申请的饲料饲养的鲥鱼的相比市场上的鲥鱼硒元素含量提高了1.05-2.37μg/只。

2.本申请的防病药液中8种提取物各为不同的活性部位提取部,各司其职、相辅相成,协同作用起到防治鲥鱼指环虫的目的,通过本申请的原料提取物中的物质中含有生物碱、酚类、鞣质类、酚酸类、苷类,通过本申请人试验配比,各个原料的活性成分相辅相成后达到协同增效、且能解除碱性物质的毒性的解毒作用,复配后达到90%以上的防治鲥鱼指环虫的发病和毒杀的作用,减少了指环虫的病害,从而提高了鲥鱼上市率和产量,提高了至少53千克/亩。

【具体实施方式】

在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

实施例1:

一种提高鲥鱼成活率的养殖方法,包括以下具体步骤:

(1)选址:选址日照时间在12小时以上,光照强度在1100lux,气温在20℃,昼夜温差在8℃内的平原上建设鱼塘,鱼塘设置有加水口与排水口,通过加水口加入水,排水口排水形成鱼塘中的水为流动活水,鱼塘设置为1000平米,在鱼塘四周使用鹅卵石垒砌成壁,使用质量浓度为5%石灰水对鱼塘进行鱼塘内壁消毒然后暴晒1-后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植玉米,然后鱼塘底部铺上一层5厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层5厘米的黑淤泥,种植水草,水草的覆盖率为50%,在鱼塘中繁殖浮游生物,间隔一个月往鱼塘撒一次豆腐渣,豆腐渣的泼洒量为50千克/亩;

(2)选鱼苗:选种无病、活跃、规格在3厘米的鲥鱼鱼苗放入鱼塘中,鱼塘放养的密度为1000尾/亩,在放养鱼苗前对鱼苗使用质量浓度为1%盐水浸泡3分钟;

(3)水质的调节:控制鱼塘内的水质ph为8.0,透明度为30cm,溶解度保持于5mg/l;

(4)喂养管理:当鲥鱼长至30g,每天投放5次饲料,投放量为100g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至90g,每天投放8次饲料,投放量为350g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至160g,每天投放10次饲料,投放量为850g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至300g,每天投放12次饲料,投放量为1300g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;

(5)预防病害管理:每间隔20天喷洒一次防病添加液,防病添加液每次的投放量减少1%,初次投放防病添加液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:燕麦粉13%、芝麻粉10%、海鲜粉9%、发酵预混料26%、富硒黑米粉粉12%、茶籽粉7%、富硒黑米粉12%、棉籽粕12%、复合氨基酸3%(1重量份赖氨酸、2重量份色氨酸、3重量份苯丙氨酸、2重量份甲硫氨酸、3重量份苏氨酸、2重量份异亮氨酸、1重量份亮氨酸、1重量份缬氨酸);

所述发酵预混料由以下原料制备得到:俄罗斯饲料菜20重量份、三楞草20重量份、丝克高粱20重量份、花生提取物20重量份、混合发酵菌5重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:活菌数为3亿cfu/g的纤维素酶2重量份、活菌数为5亿cfu/g的地衣芽孢杆菌3重量份、活菌数为2亿cfu/g的黑根霉菌1重量份、活菌数为3亿cfu/g的红球菌1重量份;

所述防病添加液由以下原料制备得到:马钱子提取物25mg/l、麻黄提取物20mg/l、草木樨提取物41mg/l、秦皮壳提取物40mg/l、绿茶提取物38mg/l、石榴皮提取物57mg/l、马齿苋提取物61mg/l、生姜提取物40mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

相比市场上的鲥鱼硒元素含量提高了1.05μg/只;相比普通养殖方式产量增加53千克/亩。

上述的发酵预混料是由以下方法制备得到的:

s1,将花生去皮取花生仁加入2倍体积的水搅碎打浆5分钟装入锥形瓶中,接着加入0.1%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至5得到混合浆液,再加入浆液2%体积的由3重量份纤维素分解酶、2重量份枯草杆菌蛋白酶、3重量份麦芽糖酶、1重量份木聚糖分解酶组成组成混合分解酶于锥形瓶中57℃下进行以速率为30r/min摇床酶解20分钟,过100目筛后,采用离心机进行转速为2000r/min的离心2分钟即可得到花生提取物;

s2,将新鲜的丝克高粱清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入700℃的蒸汽进行蒸煮5分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机50℃进行烘干至含水率15%即可;

s3,将三楞草、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1、s2处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为60℃。

所述防病添加液中,马钱子提取物是由以下方法制备得到的:将马钱子洗净粉碎,加入50%(v/v)乙醇溶液于50℃下进行加热回流提取10分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入5倍体积的醋酸溶液调节ph至4.5,于55℃下,100赫兹高压脉冲电场脉冲处理0.5×10-6s,提取20分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到马钱子提取物,提取物中主含有马钱子碱45.36mg/g、士的宁42.36mg/g;

所述麻黄提取物是由以下方法制备得到的:将麻黄洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入50%(v/v)乙醇溶液于40℃下进行加热回流提取5分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至4.0后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于45℃下水浴酶解20分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到麻黄提取物,提取物中主含有总生物碱0.485g/g。

所述草木樨提取物是由以下方法制备得到的:将草木樨在压力3mpa下进行超微粉碎后过10目筛,加入10倍水回流提取于50℃下提取20分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.2倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入80%(v/v)乙醇溶液进行醇提1小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为5bv,洗脱流速为3bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到草木樨提取物,提取物中主含有香豆素45.36mg/g;

所述秦皮提取物是由以下方法制备得到的:将秦皮洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入80%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为60℃、提取的时间为30分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置5分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到秦皮提取物主含有香豆素类物质32.25mg/g;所述秦皮:白油:硅藻土的重量比为5:0.01:0.08。

所述绿茶提取物是由以下方法制备得到的:将绿茶干燥在压力3mpa下进行超微粉碎后过50目筛,使用3倍体积、温度为100℃的水恒温浸泡绿茶茶粉5分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至2.0,使用65%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡20分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到绿茶提取物主含有茶多酚196.36mg/g;

所述石榴皮提取物是由以下方法制备得到的:将石榴皮粉碎后,加入80%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于80℃下进行回流提取30分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到石榴皮提取物主含有鞣质类物质120.32mg/g。

所述马齿苋提取物是由以下方法制备得到的:将马齿苋加入3倍的水煎煮45分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.01倍即可得到马齿苋活性成分的马齿苋提取物;

生姜提取物是由以下方法制备得到的:将生姜加入5倍的水煎煮60分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.12倍即可得到生姜活性成分的生姜提取物。

实施例2:

(1)选址:选址日照时间在12小时以上,光照强度在1200lux,气温在25℃,昼夜温差在8℃内的平原上建设鱼塘,鱼塘设置有加水口与排水口,通过加水口加入水,排水口排水形成鱼塘中的水为流动活水,鱼塘设置为1100平米,在鱼塘四周使用鹅卵石垒砌成壁,使用质量浓度为10%石灰水对鱼塘进行鱼塘内壁消毒然后暴晒1-3天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植玉米,然后鱼塘底部铺上一层5厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层5厘米的黑淤泥,种植水草,水草的覆盖率为60%,在鱼塘中繁殖浮游生物,间隔一个月往鱼塘撒一次豆腐渣,豆腐渣的泼洒量为85千克/亩;

(2)选鱼苗:选种无病、活跃、规格在5厘米的鲥鱼鱼苗放入鱼塘中,鱼塘放养的密度为1200尾/亩,在放养鱼苗前对鱼苗使用质量浓度为1.5%盐水浸泡5分钟;

(3)水质的调节:控制鱼塘内的水质ph为8.5,透明度为40cm,溶解度保持于8mg/l;

(4)喂养管理:当鲥鱼长至90g,每天投放5次饲料,投放量为300g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至160g,每天投放8次饲料,投放量为600g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至300g,每天投放10次饲料,投放量为1000g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至600g,每天投放12次饲料,投放量为1600g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;

(5)预防病害管理:每间隔30天喷洒一次防病添加液,防病添加液每次的投放量减少1%,初次投放防病添加液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:燕麦粉15%、芝麻粉8%、海鲜粉6%、发酵预混料30%、富硒黑米粉粉5%、茶籽粉10%、富硒黑米粉5%、棉籽粕15%、复合氨基酸6%(4重量份赖氨酸、5重量份色氨酸、6重量份苯丙氨酸、4重量份甲硫氨酸、5重量份苏氨酸、3重量份异亮氨酸、2重量份亮氨酸、2重量份缬氨酸);

所述发酵预混料由以下原料制备得到:俄罗斯饲料菜30重量份、三楞草30重量份、丝克高粱30重量份、花生提取物30重量份、混合发酵菌8重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:活菌数为5亿cfu/g的纤维素酶5重量份、活菌数为9亿cfu/g的地衣芽孢杆菌8重量份、活菌数为8亿cfu/g的黑根霉菌3重量份、活菌数为8亿cfu/g的红球菌5重量份;

所述防病添加液由以下原料制备得到:马钱子提取物32mg/l、麻黄提取物27mg/l、草木樨提取物48mg/l、秦皮壳提取物46mg/l、绿茶提取物40mg/l、石榴皮提取物62mg/l、马齿苋提取物71mg/l、生姜提取物48mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

相比市场上的鲥鱼硒元素含量提高了2.37μg/只;相比普通养殖方式产量增加89千克/亩。

上述的发酵预混料是由以下方法制备得到的:

s1,将花生去皮取花生仁加入4倍体积的水搅碎打浆8分钟装入锥形瓶中,接着加入0.15%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至5.5得到混合浆液,再加入浆液2.5%体积的由5重量份纤维素分解酶、4重量份枯草杆菌蛋白酶、4重量份麦芽糖酶、3重量份木聚糖分解酶组成组成混合分解酶于锥形瓶中60℃下进行以速率为22r/min摇床酶解25分钟,过100目筛后,采用离心机进行转速为1650r/min的离心5分钟即可得到花生提取物;

s2,将新鲜的丝克高粱清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入755℃的蒸汽进行蒸煮6分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机56℃进行烘干至含水率18%即可;

s3,将三楞草、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1、s2处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵7天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为65℃。

所述防病添加液中,马钱子提取物是由以下方法制备得到的:将马钱子洗净粉碎,加入55%(v/v)乙醇溶液于55℃下进行加热回流提取15分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入7倍体积的醋酸溶液调节ph至5,于55℃下,110赫兹高压脉冲电场脉冲处理1.0×10-6s,提取25分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到马钱子提取物,提取物中主含有马钱子碱89.46mg/g、士的宁56.24mg/g;

所述麻黄提取物是由以下方法制备得到的:将麻黄洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入60%(v/v)乙醇溶液于45℃下进行加热回流提取7分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至4.5后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于48℃下水浴酶解25分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到麻黄提取物,提取物中主含有总生物碱0.597g/g。

所述草木樨提取物是由以下方法制备得到的:将草木樨在压力4mpa下进行超微粉碎后过15目筛,加入15倍水回流提取于55℃下提取25分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.3倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入82%(v/v)乙醇溶液进行醇提1.5小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为5.5bv,洗脱流速为3.5bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到草木樨提取物,提取物中主含有香豆素68.97mg/g;

所述秦皮提取物是由以下方法制备得到的:将秦皮洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入82%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为65℃、提取的时间为35分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置7分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到秦皮提取物主含有香豆素类物质47.15mg/g;所述秦皮:白油:硅藻土的重量比为4:0.01:0.07。

所述绿茶提取物是由以下方法制备得到的:将绿茶干燥在压力4mpa下进行超微粉碎后过80目筛,使用4倍体积、温度为110℃的水恒温浸泡绿茶茶粉8分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至2.5,使用70%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡25分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到绿茶提取物主含有茶多酚235.26mg/g;

所述石榴皮提取物是由以下方法制备得到的:将石榴皮粉碎后,加入82%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于85℃下进行回流提取35分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到石榴皮提取物主含有鞣质类物质186.47mg/g。

所述马齿苋提取物是由以下方法制备得到的:将马齿苋加入7倍的水煎煮51分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.01倍即可得到马齿苋活性成分的马齿苋提取物;

生姜提取物是由以下方法制备得到的:将生姜加入8倍的水煎煮64分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.14倍即可得到生姜活性成分的生姜提取物。

实施例3:

(1)选址:选址日照时间在12小时以上,光照强度在1150lux,气温在22℃,昼夜温差在8℃内的平原上建设鱼塘,鱼塘设置有加水口与排水口,通过加水口加入水,排水口排水形成鱼塘中的水为流动活水,鱼塘设置为1200平米,在鱼塘四周使用鹅卵石垒砌成壁,使用质量浓度为8%石灰水对鱼塘进行鱼塘内壁消毒然后暴晒2天后,在鱼塘的周缘围绕以黑淤泥为基肥种植玉米,然后鱼塘底部铺上一层5厘米厚的坚硬泥沙,然后加入一层5厘米的黑淤泥,种植水草,水草的覆盖率为55%,在鱼塘中繁殖浮游生物,间隔一个月往鱼塘撒一次豆腐渣,豆腐渣的泼洒量为100千克/亩;

(2)选鱼苗:选种无病、活跃、规格在4厘米的鲥鱼鱼苗放入鱼塘中,鱼塘放养的密度为1100尾/亩,在放养鱼苗前对鱼苗使用质量浓度为1.2%盐水浸泡4分钟;

(3)水质的调节:控制鱼塘内的水质ph为9.0,透明度为35cm,溶解度保持于7mg/l;

(4)喂养管理:当鲥鱼长至60g,每天投放5次饲料,投放量为250g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至120g,每天投放8次饲料,投放量为550g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至200g,每天投放10次饲料,投放量为900g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;当鲥鱼长至500g,每天投放12次饲料,投放量为1500g/只,投放饲料的时间为早上9点-晚上7点;

(5)预防病害管理:每间隔25天喷洒一次防病添加液,防病添加液每次的投放量减少1%,初次投放防病添加液的量为5.0毫升/立方米;

所述饲料由以下重量百分数原料制备得到:燕麦粉10%、芝麻粉15%、海鲜粉12%、发酵预混料20%、富硒黑米粉粉5%、茶籽粉10%、富硒黑米粉10%、棉籽粕10%、复合氨基酸3%(5重量份赖氨酸、8重量份色氨酸、8重量份苯丙氨酸、6重量份甲硫氨酸、6重量份苏氨酸、5重量份异亮氨酸、3重量份亮氨酸、3重量份缬氨酸);

所述发酵预混料由以下原料制备得到:俄罗斯饲料菜24重量份、三楞草25重量份、丝克高粱26重量份、花生提取物27重量份、混合发酵菌7重量份;

所述混合发酵菌由以下原料混合得到:活菌数为4亿cfu/g的纤维素酶3重量份、活菌数为7亿cfu/g的地衣芽孢杆菌6重量份、活菌数为5亿cfu/g的黑根霉菌2重量份、活菌数为6亿cfu/g的红球菌4重量份;

所述防病添加液由以下原料制备得到:马钱子提取物38mg/l、麻黄提取物31mg/l、草木樨提取物52mg/l、秦皮壳提取物52mg/l、绿茶提取物43mg/l、石榴皮提取物68mg/l、马齿苋提取物75mg/l、生姜提取物50mg/l;

(5)成鱼打捞:在放养第二年后,将鱼塘的水放至1米深后进行打捞买卖。

相比市场上的鲥鱼硒元素含量提高了1.58μg/只;相比普通养殖方式产量增加67千克/亩。

上述的发酵预混料是由以下方法制备得到的:

s1,将花生去皮取花生仁加入5倍体积的水搅碎打浆10分钟装入锥形瓶中,接着加入0.2%(w/v)的碳酸氢钠溶液调节ph至6得到混合浆液,再加入浆液3%体积的由8重量份纤维素分解酶、6重量份枯草杆菌蛋白酶、5重量份麦芽糖酶、5重量份木聚糖分解酶组成混合分解酶于锥形瓶中62℃下进行以速率为25r/min摇床酶解35分钟,过100目筛后,采用离心机进行转速为2000r/min的离心5分钟即可得到花生提取物;

s2,将新鲜的丝克高粱清洗干净后加入密封高压蒸汽锅,然后通入800℃的蒸汽进行蒸煮10分钟,接着将凉至常温、自然通风晾干水、加入烘干机60℃进行烘干至含水率20%即可;

s3,将三楞草、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1、s2处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵8天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为70℃。

所述防病添加液中,马钱子提取物是由以下方法制备得到的:将马钱子洗净粉碎,加入65%(v/v)乙醇溶液于60℃下进行加热回流提取20分钟,取提取液减压浓缩直至无乙醇味,接着加入10倍体积的醋酸溶液调节ph至5.5,于55℃下,120赫兹高压脉冲电场脉冲处理0.9×10-6s,提取30分钟,得到粗提液,接着使用乙酸乙酯进行分层萃取,取乙酸乙酯部减压浓缩,喷雾干燥即可得到马钱子提取物,提取物中主含有马钱子碱58.34mg/g、士的宁49.37mg/g;

所述麻黄提取物是由以下方法制备得到的:将麻黄洗净后加入适量的硅藻土进行研钵研磨成浆,接着加入65%(v/v)乙醇溶液于50℃下进行加热回流提取10分钟,过滤取滤液,将滤液通过减压浓缩回收乙醇直至无醇味,接着加入稀盐酸调节ph至5.0后过滤取上清液,接着加入纤维素酶于50℃下水浴酶解30分钟,接着加入氢氧化钠调节ph至中性,过滤取沉淀即可得到麻黄提取物,提取物中主含有总生物碱0.515g/g。

所述草木樨提取物是由以下方法制备得到的:将草木樨在压力5mpa下进行超微粉碎后过20目筛,加入20倍水回流提取于60℃下提取30分钟得到提取液,然后加入提取液体积1.5倍的石油醚进行萃取,取石油醚部接着用水浴蒸馏回收石油醚,接着加入85%(v/v)乙醇溶液进行醇提2小时,接着用大孔树脂进行吸附分离洗脱,洗脱依次用体积浓度为20%、40%、60%、80%和90%的乙醇-水体系洗脱液进行梯度洗脱,每个梯度的乙醇-水溶液洗脱体积为6bv,洗脱流速为4bv/h,减压浓缩得到膏状物,干燥即可得到草木樨提取物,提取物中主含有香豆素51.37mg/g;

所述秦皮提取物是由以下方法制备得到的:将秦皮洗净后加入白油、硅藻土研磨成浆,然后加入85%(v/v)乙醇溶液回流提取3次,每次提取的温度为℃、提取的时间为40分钟,合并3次提取的提取液,加入活性炭脱色后过滤去除活性炭,接着加水稀释后加入正丁醇振荡摇晃后静置10分钟,接着取正丁醇部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到秦皮提取物主含有香豆素类物质41.20mg/g;所述秦皮:白油:硅藻土的重量比为5:0.01:0.05。

所述绿茶提取物是由以下方法制备得到的:将绿茶干燥在压力5mpa下进行超微粉碎后过100目筛,使用5倍体积、温度为120℃的水恒温浸泡绿茶茶粉10分钟得到汤茶,接着加入醋酸调节ph至3.0,使用75%(v/v)乙醇溶液回流提取取提取液,接着按照体积比为1:1的比例加入乙酸乙酯进行摇荡30分钟后静置萃取,将乙酸乙酯部分用硅胶柱色谱分离,以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂进行梯度洗脱,在40:1洗脱部分,用丙酮进行5次重结晶得到绿茶提取物主含有茶多酚235.26mg/g;

所述石榴皮提取物是由以下方法制备得到的:将石榴皮粉碎后,加入85%(v/v)乙醇溶液在超声波辅助条件下,于90℃下进行回流提取40分钟,一共回流提取3次,合并3次提取液进行减压浓缩、低温蒸干得到原体积1.12倍的浸膏,即可得到石榴皮提取物主含有鞣质类物质145.67mg/g。

所述马齿苋提取物是由以下方法制备得到的:将马齿苋加入8倍的水煎煮55分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.02倍即可得到马齿苋活性成分的马齿苋提取物;

生姜提取物是由以下方法制备得到的:将生姜加入10倍的水煎煮70分钟,过滤取滤液,减压蒸发浓缩至原体积1.15倍即可得到生姜活性成分的生姜提取物。

试验一:

对比例1:发酵预混料的制备方法:s1,与实施例1相同;s2,将三楞草、丝克高粱、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1处理后得到的材料,接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为60℃。

对比例2:发酵预混料的制备方法:s1,将新鲜的花生仁清洗干净进行水提、浓缩得到花生提取物;s2,与实施例1相同;s3,将三楞草、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1、s2处理后得到的材料接着加入混合发酵菌进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为60℃。

对比例3:发酵预混料的制备方法:s1,与实施例1相同;s2,与实施例1相同;s3,将三楞草、俄罗斯饲料菜粉碎后与s1、s2处理后得到的材料进行建堆发酵5天后即可,发酵期间控制发酵堆的中心位置温度为60℃。

对比例4:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、地衣芽孢杆菌,活菌数和重量份数相同;

对比例5:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、黑根霉菌,活菌数和重量份数相同;

对比例6:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、红球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例7:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:地衣芽孢杆菌、黑根霉菌、红球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例8:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、地衣芽孢杆菌、红球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例9:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、黑根霉菌、红球菌,活菌数和重量份数相同;

对比例10:发酵预混料的制备方法基本与实施例1相同,不同点是混合发酵菌由以下原料混合得到:纤维素酶、地衣芽孢杆菌、黑根霉菌,活菌数和重量份数相同;

将实施例1-3、对照组1-10方式处理后的发酵预混料进行cn-残余浓度检测,根据发酵处理前后发酵预混料的含氰量计算降氰率,其中,降氰率%=(反应前发酵预混料中含氰浓度-反应后发酵预混料中含氰浓度)/反应前发酵预混料中含氰浓度,且每次检测均做三次平行检测,取平均值。

表1

由上表可知,对比例1与实施例1相比降氰率降低了20.9%,说明对甜木薯进行特殊的处理后能降低在发酵后期产生氰化物的含量,即为甜木薯本身的毒素将在发酵前能得到清除,这与试验设想前的预期相符合。对比例2与实施例1相比较降氰率降低了22.7%,证明了经过特殊提取的木瓜提取物中含有动力素(糖、蛋白质)的含量更高,在发酵期提供发酵菌一个良好的生长环境,能充分发挥菌群的分解能力;对比例3与实施例1相比较降氰率降低了了39.6%多,证明混合发酵菌之间具有很好的分解能力,接着为了验证这观点,做了对比例4-10的对比试验,对比例4-6的单一发酵菌液相比实施例1-3降氰能力降低了15%左右;、对比例8-10的量量混合菌液与实施例1-3相比较降氰能力降低了10%左右;由此可见采用本申请的组合发酵菌具有相辅相成相互协同降氰的能力,促使降氰能力大大提高。

试验二:

采用本发明实施例1制备的防病添加液对大头鲤的急性毒理学试验观察

试验在东兰县安篓东二养殖场临床实验室中进行。试验大头鲤购自河池市金城江老姐批发市场,规格40g左右,购回后暂养于水族箱中。试验水温22.0±1℃左右。水体充气,投喂少量饵料。试验维持5-7天。试验采用浸泡法,共设4个浓度梯度药物组(0.5ml/m3、1.0ml/m3、2.0ml/m3、5.0ml/m3)及1个不加药物的空白对照组,每组设3个重复,每个水族箱(0.75m×0.55m×0.6m=0.25m3)放大头鲤20尾,具体见表1。试验开始后,连续观察,记录大头鲤异常及死亡情况。

1对大头鲤的急性毒理学试验分组

表2不同药物浓度下大头鲤死亡情况

结果见表2。对照组及0.05ml/m3药物浓度组,没有大头鲤发现死亡,且活动正常0.10ml/m3组,96h后平均死亡率达到8.33%,0.20ml/m3组,累计平均死亡率26.67%,0.50ml/m3组,累计平均死亡率60.00%。

用bliss法计算本发明实施例1对大头鲤半数致死剂量为ld50=0.34745ml/m3,其回归方程为y(probit)=6.438+3.1321log(d),具体见表3。按特伦堡公式(安全浓度=48hlc50*0.3/(24hlc/48hlc50))计算本申请的药液杀虫剂对大头鲤的安全浓度为0.0955ml/m3,说明本发明实施例1对大头鲤的安全性较高。

表3bliss法计算本发明实施例1对大头鲤半数致死量

试验三:

1.1试验鱼

严重感染指环虫的大头鲤(重量300±20g)购自河池市金城江老街。并按照1:5左右的比例与未感染寄生虫的大头鲤混养感染,感染15-20天后,随机选取110尾鱼,取全鳃镜检观察统计鳃上指环虫数量,试验鱼指环虫感染率为100%,每尾鱼平均感染指环虫约50个,随机分配为11组,每组10尾鱼一个水箱,一个水箱容积为10平方米,装8平米的水。

实验组1-3分别使用实施例1-3制备得到的防病添加液投入,投放的量分别为0.5、2.0、5.0毫升/立方米;

对照组1-8分别使用仅仅单一含有血水草提取物、菜子七提取物、黄皮树提取物、酸橙枳提取物、白茶提取物、飞燕草提取物、连翘提取物、栀子提取物的防病物质投放入水箱,投放的量分别为2.0毫升/立方米。

于48h时取大头鲤全鳃制片、镜检,统计每尾大头鲤在鳃部指环虫存活数量,计算平均杀虫率,并同时进行对照试验。

杀虫率(%)=(对照组的指环虫平均存活数量-试验组的指环虫平均存活数量)/对照组的指环虫平均存活数量×100%

鱼平均死亡率(%)=(投放的鱼数量-镜检时的鱼存活数量)/投放的鱼数量×100%样品最高有效浓度,即最高杀虫率所对应的溶剂提取物浓度。

表4各个组药剂对指环虫的防治效果表

试验结果表明:采用本申请的防病药液对大头鲤的指环虫的疫病具有优异的防治效果,相比较对照组1-8单一使用的提取物相比较不仅具有更高的防治指环虫的效果,且杀虫效果更佳持久,证明了本申请的配方具有相互辅助协同的作用。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明的保护范围应以所附权利要求为准。

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