本发明涉及食用菌培养技术领域，具体而言，涉及一种白灵菇枝条菌种的生产和培育方法。
背景技术
白灵菇是一种食用和药用价值都很高的珍稀食用菌，其菇体色泽洁白、肉质细腻、味道鲜美，被誉为“草原上的牛肝菌”和侧耳，颇受消费者的青睐。据科学测定，白灵菇营养丰富，其中蛋白质含量占平菇的20％，含有17种氨基酸，多种维生素和无机盐。同时，白灵菇还具有一定的医药价值，有消积、杀虫、镇咳、消炎和防治妇科阴道肿瘤等功效。
然而，目前白灵菇菌种的生产与培养一般采用琼脂作为培养基载体，其价格成本较高，同时菌丝只能生长在培养基表面，在进行接种的过程中极易受到伤害进而严重影响其在接种之后的成活率以及后期生长繁殖。因此，一种培养成本低、成活率高的菌种培养方法成为迫切需求。
技术实现要素：
本发明旨在克服现有的白灵菇菌种生产和培育技术中的不足，提出了一种白灵菇枝条菌种的生产和培育方法。
本发明提出了一种白灵菇枝条菌种的生产和培育方法，包括如下步骤：
a.将选取的直径相近的枝条截成若干长度一致的木段，并利用环刀在所述木段表面上间隔预设距离进行粗糙处理；
b.将处理好的所述木段装入浸泡容器内，并加入预先制备好的营养液淹没所述木段，最后在真空环境中浸泡2-3小时；
c.将浸泡好的所述木段在预先调制好的热培养基中蘸一下，并将其插入试管中，然后封上所述试管口竖立在灭菌锅中125-130℃下高压灭菌30-45分钟；
d.灭菌完成之后，取出所述试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌条件下对所述木段进行接种；
e.接种完成之后，将所述试管放置在培养箱中，调节温度在21-25℃，c02浓度在3000-3500ppm的环境下。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤a中，所述粗糙处理过程中利用环刀沿所述木段表面横向和/或纵向切割，以在所述木段表面形成凹槽或凹坑增大固着面积。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤b中，所述营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合85℃恒温加热30分钟过滤得到。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤b中，所述木段真空浸泡过程中每个30分钟通过抽气机抽一次气，以加快所述木段吸收所述营养液。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤c中，所述培养基组分重量比为：32-40份木渣、10-15份树皮沫、5-7份麸皮、4-6.5份豆渣、3-5份玉米面、2-3份琼脂、1-2份碳酸钙、1-2过磷酸钙、1-1.5份海藻糖、0.5-1份硫酸镁、0.5-1.5份尿素，其余份为水。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤c中，所述培养基为糊状。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤c中，所述木段整体浸入所述培养基，以在所述木段外表面形成培养基层膜。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤d中，所述培养过程中可对生成长出来的菌丝进行低温刺激，使所述菌丝由营养生长转化为生殖生长。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，在上述步骤d中，所述培养过程中待所述木段上的菌种排满包，枝条种即制备完毕。
进一步地，上述白灵菇枝条菌种的生产和培育方法中，所述低温刺激的需温度较培养温度低3-6℃。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于，本发明提供的白灵菇枝条菌种的生产和培育方法，通过利于经过树枝作为白灵菇菌种培养的载体，一方面在培养基制备的过程中极大地减少了琼脂的用量，有效的节省了资金；另一方面由于菌丝能够生长到枝条内部，有效地降低了接种过程中对菌丝的伤害，确保了菌丝在接种后能够快速地恢复，并进行稳健的生长，进而为高产量奠定了基础。
尤其是，本发明通过对枝条木段表面进行粗糙处理，有效地增大了木段的表面积，一方面极大地节约了其在浸泡过程中吸收营养物质的时间，在确保木段对营养物质有效吸收的同时，加快了白灵菇枝条菌种培育的整个进度；另一方面在培养基蘸取过程中使得木段能够充分的蘸取培养基，并使培养基牢固的附着在木段外表面，形成培养基层，确保后续白灵菇菌种的有效接种与正常生长。
进一步的，本发明通过将木段在特定配置方的营养液中浸泡，一方面使木段的内部结构能够达到最大程度的膨胀化与疏松化，保证了后续培养过程中菌丝能够顺利的进入木段的内部进行生长繁殖；另一方面木段在充分吸收营养液之后能够最大程度的营养化，为后续菌种的生长提供营养物质，确保菌丝的健康成长。
进一步的，本发明通在培养基中加入一定量的琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
进一步的，本发明通过在培养基中添加一定量的尿素，有效地提升了接种之后菌种的成活率，并促进了菌丝的快速生长。
具体实施方式
以下将结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步描述，但要求保护的范围并不局限于此。
实施例一
a.选取直径为1.5cm的新鲜苹果树枝条，去掉表皮截成10cm长的木段，并利用环刀在处理好的木段表面沿长度方向上刻出若干数量的凹槽，相邻两凹槽之间的间隔距离为2mm，以增大木段的表面积，保证后续处理过的方便有效进行。
b.先将上述步骤a中处理好的所有木段装入浸泡容器内，并在浸泡容器内加入预先制备好的营养液，以完全淹没所有木段为准；然后将浸泡容器放入真空锅中利用真空笨进行抽气，以在真空锅中形成真空环境，促使浸泡容器中的木段快速有效地吸收营养液，保证木段在最短时间内吸收到充足的营养液，一般情况下2小时即可达到吸收的饱和状态。营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合，并在85℃恒温下加热30分钟后过滤得到。需要注意的是，在整个浸泡的过程中，每隔半个小时进行一次抽气，以使真空锅内的压强大致保持一致。
c.先进行培养基在的制作，取32份木渣、10份树皮沫、5份麸皮、4份豆渣、3份玉米面、2份琼脂、1份碳酸钙、1过磷酸钙、1份海藻糖、0.5份硫酸镁、0.5份尿素以及40份水，加入锅中边加热边搅拌，直至呈现糊状为止；然后将上述步骤b中浸泡好的木段在整体放入锅内的热培养基中蘸一下，使培养基黏在木段表面，在木段表面形成包覆的培养基层；再将包覆有培养基层的木棒竖直插入试管内，在试管口塞上棉花团封闭试管，并将其竖直立在灭菌锅中在120℃下进行恒温高压灭菌45分钟。需要注意的是，在培养基的配制过程中加入一定量琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
d.在上述步骤c中灭菌完成之后，取出试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌接菌台上对包覆有培养基的木段进行白灵菇菌种的火焰接种，以确保无其他杂菌感染并污染白灵菇菌种及木段。
e.在上述步骤d中对木段接种完成之后，将试管与木段一起放置在培养箱中进行培养，直至木段上的菌种排满包，枝条菌种即制备完毕。培养温度宜控制在21-25℃，c02浓度控制在3000ppm的环境下。尤其需要注意的是，在进行菌种培养过程中在白灵菇菌丝长出来之后，可对其进行低温刺激，使菌丝由营养生长转化为生殖生长，刺激温度控制在培养温度以下3℃即可。
实施例二
a.选取直径为3.0cm的新鲜苹果树枝条，去掉表皮截成10cm长的木段，并利用环刀在处理好的木段表面沿圆周方向上刻出若干数量的凹槽，相邻两凹槽之间的间隔距离为2cm，以增大木段的表面积，保证后续处理过的方便有效进行。
b.先将上述步骤a中处理好的所有木段装入浸泡容器内，并在浸泡容器内加入预先制备好的营养液，以完全淹没所有木段为准；然后将浸泡容器放入真空锅中利用真空笨进行抽气，以在真空锅中形成真空环境，促使浸泡容器中的木段快速有效地吸收营养液，保证木段在最短时间内吸收到充足的营养液，一般情况下2小时即可达到吸收的饱和状态。营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合，并在85℃恒温下加热30分钟后过滤得到。需要注意的是，在整个浸泡的过程中，每隔半个小时进行一次抽气，以使真空锅内的压强大致保持一致。
c.先进行培养基在的制作，取40份木渣、15份树皮沫、7份麸皮、6.5份豆渣、6份玉米面、3份琼脂、2份碳酸钙、2过磷酸钙、1.5份海藻糖、1份硫酸镁、1.5份尿素以及14.5份水，加入锅中边加热边搅拌，直至呈现糊状为止；然后将上述步骤b中浸泡好的木段在整体放入锅内的热培养基中蘸一下，使培养基黏在木段表面，在木段表面形成包覆的培养基层；再将包覆有培养基层的木棒竖直插入试管内，在试管口塞上棉花团封闭试管，并将其竖直立在灭菌锅中在130℃下进行恒温高压灭菌30分钟。需要注意的是，在培养基的配制过程中加入一定量琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
d.在上述步骤c中灭菌完成之后，取出试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌接菌台上对包覆有培养基的木段进行白灵菇菌种的火焰接种，以确保无其他杂菌感染并污染白灵菇菌种及木段。
e.在上述步骤d中对木段接种完成之后，将试管与木段一起放置在培养箱中进行培养，培养温度宜控制在21-25℃，c02浓度控制在3500ppm的环境下。尤其需要注意的是，在进行菌种培养过程中在白灵菇菌丝长出来之后，可对其进行低温刺激，使菌丝由营养生长转化为生殖生长，刺激温度控制在培养温度以下5℃即可。
实施例三
a.选取直径为2cm的新鲜苹果树枝条，去掉表皮截成10cm长的木段，并利用环刀在处理好的木段表面沿长度方向上和圆周方向上刻出若干相互交错的凹槽，长度方向相邻两凹槽之间的间隔距离为3mm，圆周相邻两凹槽之间的间隔距离为2cm,以增大木段的表面积，保证后续处理过的方便有效进行。
b.先将上述步骤a中处理好的所有木段装入浸泡容器内，并在浸泡容器内加入预先制备好的营养液，以完全淹没所有木段为准；然后将浸泡容器放入真空锅中利用真空笨进行抽气，以在真空锅中形成真空环境，促使浸泡容器中的木段快速有效地吸收营养液，保证木段在最短时间内吸收到充足的营养液，一般情况下2小时即可达到吸收的饱和状态。营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合，并在85℃恒温下加热30分钟后过滤得到。需要注意的是，在整个浸泡的过程中，每隔半个小时进行一次抽气，以使真空锅内的压强大致保持一致。
c.先进行培养基在的制作，取35份木渣、12份树皮沫、5份麸皮、5份豆渣、4份玉米面、1.5份琼脂、1.5份碳酸钙、1.25过磷酸钙、0.75份海藻糖、0.75份硫酸镁、1份尿素以及32.25份水，加入锅中边加热边搅拌，直至呈现糊状为止；然后将上述步骤b中浸泡好的木段在整体放入锅内的热培养基中蘸一下，使培养基黏在木段表面，在木段表面形成包覆的培养基层；再将包覆有培养基层的木棒竖直插入试管内，在试管口塞上棉花团封闭试管，并将其竖直立在灭菌锅中在125℃下进行恒温高压灭菌40分钟。需要注意的是，在培养基的配制过程中加入一定量琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
d.在上述步骤c中灭菌完成之后，取出试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌接菌台上对包覆有培养基的木段进行白灵菇菌种的火焰接种，以确保无其他杂菌感染并污染白灵菇菌种及木段。
e.在上述步骤d中对木段接种完成之后，将试管与木段一起放置在培养箱中进行培养，直至木段上的菌种排满包，枝条菌种即制备完毕。培养温度宜控制在21-25℃，c02浓度控制在3200ppm的环境下。尤其需要注意的是，在进行菌种培养过程中在白灵菇菌丝长出来之后，可对其进行低温刺激，使菌丝由营养生长转化为生殖生长，刺激温度控制在培养温度以下6℃即可。
实施例四
a.选取直径为1.5cm的新鲜杏树枝条，去掉表皮截成10cm长的木段，并利用环刀在处理好的木段表面沿长度方向上刻出若干数量的凹槽，相邻两凹槽之间的间隔距离为2mm，以增大木段的表面积，保证后续处理过的方便有效进行。
b.先将上述步骤a中处理好的所有木段装入浸泡容器内，并在浸泡容器内加入预先制备好的营养液，以完全淹没所有木段为准；然后将浸泡容器放入真空锅中利用真空笨进行抽气，以在真空锅中形成真空环境，促使浸泡容器中的木段快速有效地吸收营养液，保证木段在最短时间内吸收到充足的营养液，一般情况下3小时即可达到吸收的饱和状态。营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合，并在85℃恒温下加热30分钟后过滤得到。需要注意的是，在整个浸泡的过程中，每隔半个小时进行一次抽气，以使真空锅内的压强大致保持一致。
c.先进行培养基在的制作，取32份木渣、10份树皮沫、5份麸皮、4份豆渣、3份玉米面、2份琼脂、1份碳酸钙、1过磷酸钙、1份海藻糖、0.5份硫酸镁、0.5份尿素以及40份水，加入锅中边加热边搅拌，直至呈现糊状为止；然后将上述步骤b中浸泡好的木段在整体放入锅内的热培养基中蘸一下，使培养基黏在木段表面，在木段表面形成包覆的培养基层；再将包覆有培养基层的木棒竖直插入试管内，在试管口塞上棉花团封闭试管，并将其竖直立在灭菌锅中在120℃下进行恒温高压灭菌45分钟。需要注意的是，在培养基的配制过程中加入一定量琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
d.在上述步骤c中灭菌完成之后，取出试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌接菌台上对包覆有培养基的木段进行白灵菇菌种的火焰接种，以确保无其他杂菌感染并污染白灵菇菌种及木段。
e.在上述步骤d中对木段接种完成之后，将试管与木段一起放置在培养箱中进行培养，直至木段上的菌种排满包，枝条菌种即制备完毕。培养温度宜控制在21-25℃，c02浓度控制在3000ppm的环境下。尤其需要注意的是，在进行菌种培养过程中在白灵菇菌丝长出来之后，可对其进行低温刺激，使菌丝由营养生长转化为生殖生长，刺激温度控制在培养温度以下3℃即可。
实施例五
a.选取直径为3.0cm的新鲜杏树枝条，去掉表皮截成10cm长的木段，并利用环刀在处理好的木段表面沿圆周方向上刻出若干数量的凹槽，相邻两凹槽之间的间隔距离为1cm，以增大木段的表面积，保证后续处理过的方便有效进行。
b.先将上述步骤a中处理好的所有木段装入浸泡容器内，并在浸泡容器内加入预先制备好的营养液，以完全淹没所有木段为准；然后将浸泡容器放入真空锅中利用真空笨进行抽气，以在真空锅中形成真空环境，促使浸泡容器中的木段快速有效地吸收营养液，保证木段在最短时间内吸收到充足的营养液，一般情况下3小时即可达到吸收的饱和状态。营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合，并在85℃恒温下加热30分钟后过滤得到。需要注意的是，在整个浸泡的过程中，每隔半个小时进行一次抽气，以使真空锅内的压强大致保持一致。
c.先进行培养基在的制作，取40份木渣、15份树皮沫、7份麸皮、6.5份豆渣、6份玉米面、3份琼脂、2份碳酸钙、2过磷酸钙、1.5份海藻糖、1份硫酸镁、1.5份尿素以及14.5份水，加入锅中边加热边搅拌，直至呈现糊状为止；然后将上述步骤b中浸泡好的木段在整体放入锅内的热培养基中蘸一下，使培养基黏在木段表面，在木段表面形成包覆的培养基层；再将包覆有培养基层的木棒竖直插入试管内，在试管口塞上棉花团封闭试管，并将其竖直立在灭菌锅中在130℃下进行恒温高压灭菌30分钟。需要注意的是，在培养基的配制过程中加入一定量琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
d.在上述步骤c中灭菌完成之后，取出试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌接菌台上对包覆有培养基的木段进行白灵菇菌种的火焰接种，以确保无其他杂菌感染并污染白灵菇菌种及木段。
e.在上述步骤d中对木段接种完成之后，将试管与木段一起放置在培养箱中进行培养，直至木段上的菌种排满包，枝条菌种即制备完毕。培养温度宜控制在21-25℃，c02浓度控制在3500ppm的环境下。尤其需要注意的是，在进行菌种培养过程中在白灵菇菌丝长出来之后，可对其进行低温刺激，使菌丝由营养生长转化为生殖生长，刺激温度控制在培养温度以下5℃即可。
实施例六
a.选取直径为2cm的新杏果树枝条，去掉表皮截成10cm长的木段，并利用环刀在处理好的木段表面沿长度方向上和圆周方向上刻出若干相互交错的凹槽，长度方向相邻两凹槽之间的间隔距离为3mm，圆周相邻两凹槽之间的间隔距离为2cm,以增大木段的表面积，保证后续处理过的方便有效进行。
b.先将上述步骤a中处理好的所有木段装入浸泡容器内，并在浸泡容器内加入预先制备好的营养液，以完全淹没所有木段为准；然后将浸泡容器放入真空锅中利用真空笨进行抽气，以在真空锅中形成真空环境，促使浸泡容器中的木段快速有效地吸收营养液，保证木段在最短时间内吸收到充足的营养液，一般情况下3小时即可达到吸收的饱和状态。营养液由850ml水、50g豆渣、15g树皮、18份海藻糖、3.5g尿素、3g磷酸二氢钾、2g磷酸氢二钾以及2g硫酸镁混合，并在85℃恒温下加热30分钟后过滤得到。需要注意的是，在整个浸泡的过程中，每隔半个小时进行一次抽气，以使真空锅内的压强大致保持一致。
c.先进行培养基在的制作，取35份木渣、12份树皮沫、5份麸皮、5份豆渣、4份玉米面、1.5份琼脂、1.5份碳酸钙、1.25过磷酸钙、0.75份海藻糖、0.75份硫酸镁、1份尿素以及32.25份水，加入锅中边加热边搅拌，直至呈现糊状为止；然后将上述步骤b中浸泡好的木段在整体放入锅内的热培养基中蘸一下，使培养基黏在木段表面，在木段表面形成包覆的培养基层；再将包覆有培养基层的木棒竖直插入试管内，在试管口塞上棉花团封闭试管，并将其竖直立在灭菌锅中在125℃下进行恒温高压灭菌40分钟。需要注意的是，在培养基的配制过程中加入一定量琼脂和海藻糖，极大地提升了培养基的粘性和附着能力，使得培养基能够有效地附着在并固定在木段上，以便于为后续菌种提供充足的能量。
d.在上述步骤c中灭菌完成之后，取出试管在接菌室内自然冷却至常温，在无菌接菌台上对包覆有培养基的木段进行白灵菇菌种的火焰接种，以确保无其他杂菌感染并污染白灵菇菌种及木段。
e.在上述步骤d中对木段接种完成之后，将试管与木段一起放置在培养箱中进行培养，直至木段上的菌种排满包，枝条菌种即制备完毕。培养温度宜控制在21-25℃，c02浓度控制在3200ppm的环境下。尤其需要注意的是，在进行菌种培养过程中在白灵菇菌丝长出来之后，可对其进行低温刺激，使菌丝由营养生长转化为生殖生长，刺激温度控制在培养温度以下6℃即可。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。