本发明属于作物种质资源学领域，具体涉及一种耐寒性水稻品种的实验室快速筛选方法。
背景技术：
水稻是重要的粮食作物，也是世界上种植最广泛的作物之一。水稻低温冷害是我国水稻产区的主要气象灾害，也是许多国家和地区普遍性的严重灾害，已成为限制其产量水平提高的主要环境因子之一。
耐寒性鉴定对水稻耐寒品种的筛选及耐寒生理研究具有重要意义。要鉴定水稻的耐寒性，首先要给水稻创造一个适当的低温胁迫环境，然后选择恰当的指标来区分品种(系)间的耐寒性差异。水稻生长发育的早期阶段对低温胁迫比成熟期更敏感，因此耐寒性研究的重点大多集中在水稻的发芽期、芽期和苗期。
技术实现要素：
基于上述技术背景，本发明提供了一种耐寒性水稻品种的实验室快速筛选方法，在实验室借助人工调控手段，将待鉴定水稻种子经浸种、低温处理后，观察其幼苗成活状况，从而评价其耐寒性。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种耐寒性水稻品种的实验室快速筛选方法，包括以下步骤：
(1)水稻种子的消毒处理
分别取待检测耐寒性能的完整、饱满的水稻种子各400-500粒分别装入纱网袋中，再用1mol/lhno3浸泡25-35min后，用蒸馏水洗3-4次，然后用10％的h2o2处理10-20min，再用蒸馏水洗3-4次后，晾干，待用；
(2)水稻种子的浸种催芽
将处理好的不同水稻材料完整、饱满的种子从网袋中取450-500粒，置于放有双层滤纸和30-40ml蒸馏水或去离子水的4个带盖培养皿中，每个培养皿中120-130粒种子，并置于30℃的人工气候箱中浸种催芽36-48小时后，立即去除每个培养皿中不发芽或发芽较差的种子，以保证：①4个带盖培养皿中的种子根芽长度基本一致(≥0.5毫米)；②每个培养皿中具有发芽种子100粒；
(3)低温处理
将浸种催芽达到36-48小时并装有100粒发芽种子的4个带盖培养皿取出后，立即置于5℃-7℃低温条件下处理5-7天；
(4)水稻种子芽苗的修复
上述低温条件下处理后，立即将其再取出，重新放入30℃人工气候箱中修复生长5-7天，观察死活苗情况；
(5)水稻活苗的计算
试验设4次重复，计算平均活苗率，平均活苗率越高，表示耐寒性越好；其计算公式如下：
平均活苗率(％)＝[(活苗数1/100)+(活苗数2/100)+(活苗数3/100)+(活苗数4/100)]*100/4。
本发明在实验室借助一定的人工调控手段，将待鉴定水稻种子置于控制的温度条件下经浸种、发芽后，对发芽后水稻种子置于一定低温下处理后，观察其幼苗成活状况，以其为评价指标，从而评价水稻品种的耐寒性；本发明在实验室内鉴定水稻品种干扰因素少，环境条件易控制，在试验中能够设置不同低温梯度，精确地测定不同水稻品种对低温的忍耐限度，该方法具有方便、快捷及所得结果精确可靠等优点，适合对大量的水稻品种材料进行筛选。
具体实施方式
实施例1
1.试验材料
选取早稻竹青、早稻直播稻品种93067、6180、6173。
2.以人工气候箱作为控温设备，试验处理如下：
(1)水稻种子的消毒处理
分别取待检测耐寒性能的完整、饱满的水稻种子各500粒分别装入纱网袋中，再用1mol/lhno3浸泡30min后，用蒸馏水洗3次，然后用10％的h2o2处理20min，再用蒸馏水洗3次后，晾干，待用；
(2)浸泡催芽处理
将筛选出的上述待播种早稻材料种子，实际是利用人工气候箱控制30℃温度下置于4个带盖培养皿中，用去离子水35ml浸种处理，浸泡试验时间设36小时、48小时、60小时、72小时、96小时、120小时。当浸种处理时间达到后，立即将培养皿取出，去除每个培养皿中不发芽、发霉或发芽较差的种子，以保证：①4个带盖培养皿中的种子根芽长度基本一致(≥0.5毫米)；②每个培养皿中具有发芽种子100粒。
(3)低温处理
将上述处理好发芽种子的培养皿，立即置于人工气候箱5℃低温条件冷冻5天；
(4)水稻种子芽苗的修复
上述低温条件下处理后，立即将其再取出，重新放入30℃人工气候箱中修复生长5-7天。观察死活苗情况
(5)水稻活苗的计算
试验设4次重复，每个重复为100粒发芽种子，计算平均活苗率。平均活苗率越高，表示耐寒性越好。其计算公式如下：
平均活苗率(％)＝[(活苗数1/100)+(活苗数2/100)+(活苗数3/100)+(活苗数4/100)]*100/4。
3.结果分析
结合表1对上述不同材料30℃不同浸泡时间处理、5℃耐冷处理后修复的平均活苗率进行分析，结果如下：浸泡催芽36小时的6180为68％，48小时为42.5％，明显大于6173的28.5％和11.5％，更大于竹青早的20.5％和0％及93067的16％和2％。结论：6180耐寒性最好，30℃温度下，36小时至48小时浸泡、5℃处理后的耐冷修复，能较好的分辨出水稻的耐寒性能。
表1不同材料30℃不同浸泡时间处理、5℃耐冷处理后修复的平均活苗率(％)