本发明涉及马铃薯苗培育领域，具体是一种马铃薯茎尖剥离快繁技术方法。
背景技术
马铃薯作为一种重要的粮食、蔬菜和工业原料兼用作物，以生长周期短、单位面积产量高、块茎营养成分丰富、用途广泛等特点，已成为世界上仅次于水稻、小麦、玉米的第四大粮食作物。随着农业产业结构的调整，马铃薯的种植面积不断的扩大。随着农业技术的不断进步，目前在马铃薯的培育过程中，马铃薯脱毒技术也得到了广泛的应用。马铃薯脱毒技术是切取马铃薯幼芽尖生产锥，进行组织培养，育成脱毒试管苗，进而结出无病毒的块茎。且把茎尖脱毒、组织培养、无病毒种薯繁育结合起来，能够形成一个完整的快繁技术。但是现有的组织培养基价格较为高昂，使得成本增加。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种马铃薯茎尖剥离快繁技术方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种马铃薯茎尖剥离快繁技术方法，包括如下步骤：
（1）选用无损伤五虫蛀的马铃薯茎块，用0.50-1mg/kg的赤霉素浸泡马铃薯块20min，然后将马铃薯茎块置于温室内的砂床上育芽；当芽长到4-5cm时，剪取1.5-3cm的上端茎尖段，用消毒后的镊子剥去易见的叶片后进行消毒。
（2）用纱布包好上述剥取的茎尖段，然后依次用自来水冲洗20分钟，用70-75%的乙醇消毒10-20s，用1%次氯酸钠消毒5-6min，再用无菌水冲洗3-5次，并用消毒后的滤纸吸干茎尖段的表面水分。
（3）在工作台上对上述步骤（2）处理后的茎尖段进行剥离，在解剖镜先剥掉幼叶，直至露出两个叶原基的生长点时，切下只带有一个叶原基的茎尖。
（4）将剥取的茎尖置于培养基中进行培养，所述培养基以ms培养基较好，附加naa0.01mg/l，ccc50ppm，采用食用糖代替蔗糖来繁殖，糖浓度以20g/l为宜，琼脂浓度夏季为7.0g/l、冬季为6.5g/l；同时在调解ph值时在没有加入母液时调解ph到6.5，当药品全部加入后，再调节ph至5.6-5.8。
（5）步骤（4）中的茎尖萌发至4-6cm时，对茎尖剥离培养的小苗通过切段繁殖，每株的后代一部分保留，一部分进行病毒鉴定，健康的无毒苗按品种归类编号，以备繁殖。
（6）采用切段繁殖的方式进行快速繁殖。
（7）将扩繁后的脱毒试管苗用自来水中西干净后移栽至苗床中进行培养。
（8）再对脱毒苗茎段喷施50-200ppm的吲哚丁酸1次。
（9）在温室培养时，每1h-2h喷水1次，每次时间为5-10min，夜晚不喷水，并采用60-70%的遮阳网进行遮阳。
（10）将茎段培养6-9d，观察生根抬头后，去掉遮阳网，白天技术喷水，且进行全日光照继续培养；茎段生根后，每3-4d喷1次营养液。
（11）继续培养至茎段长至8-10cm，且出现3-5片叶片后，将脱毒苗连根拔起，并移栽到温室中进行原原种生产。
作为本发明的进一步方案：所述苗床采用田间土、草炭、蛭石和珍珠岩以1:1:1:1的质量比混合而成。
作为本发明的进一步方案：所述步骤（6）中光照要求在2000lx-3000lx，光照时间为14h/d-16h/d；组培室的温度白天控制在20-25℃。夜晚控制在15-20℃；湿度控制在70%-80%。
作为本发明的再进一步方案：所述步骤（6）中切段繁殖时的茎节以1节即可，即一叶一节，上端要平其叶片，下端1-2cm的长度，斜插或平放于培养基表面即可。
与现有技术相比，本发明简化且优化了培养基，使得马铃薯繁殖速度增加，操作简单、带病毒少，幼苗成活率高；且设置的蛭石、珍珠岩能够降低幼苗的感染几率。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
一种马铃薯茎尖剥离快繁技术方法，包括如下步骤：
（1）选用无损伤五虫蛀的马铃薯茎块，用0.50-1mg/kg的赤霉素浸泡马铃薯块20min，然后将马铃薯茎块置于温室内的砂床上育芽；当芽长到4-5cm时，剪取1.5-3cm的上端茎尖段，用消毒后的镊子剥去易见的叶片后进行消毒。
（2）用纱布包好上述剥取的茎尖段，然后依次用自来水冲洗20分钟，用70-75%的乙醇消毒10-20s，用1%次氯酸钠消毒5-6min，再用无菌水冲洗3-5次，并用消毒后的滤纸吸干茎尖段的表面水分。
（3）在工作台上对上述步骤（2）处理后的茎尖段进行剥离，在解剖镜先剥掉幼叶，直至露出两个叶原基的生长点时，切下只带有一个叶原基的茎尖。
（4）将剥取的茎尖置于培养基中进行培养，所述培养基以ms培养基较好，附加naa0.01mg/l，ccc50ppm，采用食用糖代替蔗糖来繁殖，糖浓度以20g/l为宜，琼脂浓度夏季为7.0g/l、冬季为6.5g/l；同时在调解ph值时在没有加入母液时调解ph到6.5，当药品全部加入后，再调节ph至5.6-5.8即可；所述ccc的加入使得马铃薯的苗子茎节缩短、长势好、苗壮、叶色深绿、茎秆增粗；naa能够使得根系发达。
（5）步骤（4）中的茎尖萌发至4-6cm时，对茎尖剥离培养的小苗通过切段繁殖，每株的后代一部分保留，一部分进行病毒鉴定，健康的无毒苗按品种归类编号，以备繁殖。
（6）采用切段繁殖的方式进行快速繁殖，所述切段繁殖时的茎节以1节即可，即一叶一节，上端要平其叶片，下端1-2cm的长度，斜插或平放于培养基表面即可。
在繁殖中光照要求在2000lx-3000lx，光照时间为14h/d-16h/d；组培室的温度白天控制在20-25℃。夜晚控制在15-20℃；湿度控制在70%-80%。
（7）将扩繁后的脱毒试管苗用自来水中西干净后移栽至苗床中进行培养；所述苗床采用田间土、草炭、蛭石和珍珠岩以1:1:1:1的质量比混合而成。
（8）再对脱毒苗茎段喷施50-200ppm的吲哚丁酸1次。
（9）在温室培养时，每1h-2h喷水1次，每次时间为5-10min，夜晚不喷水，并采用60-70%的遮阳网进行遮阳。
（10）将茎段培养6-9d，观察生根抬头后，去掉遮阳网，白天技术喷水，且进行全日光照继续培养；茎段生根后，每3-4d喷1次营养液。
（11）继续培养至茎段长至8-10cm，且出现3-5片叶片后，将脱毒苗连根拔起，并移栽到温室中进行原原种生产。
生产10万株脱毒苗的生产成本结果详见下表：
本发明简化且优化了培养基，使得马铃薯繁殖速度增加，操作简单、带病毒少，幼苗成活率高；且设置的蛭石、珍珠岩能够降低幼苗的感染几率。
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下作出各种变化。