本发明属于栽培技术领域,具体涉及一种白及试管苗瓶内复壮的方法。
背景技术:
白及,为兰科白及属多年生草本植物,以块茎入药,具有收敛止血,消肿生肌等功效,然而白及的人工繁殖技术不够成熟,传统分株繁殖方式生长周期长,繁殖系数小,加之野外白及授粉率与种子萌发率低,使得白及市场提供了大量的种苗,并为白及开辟了新的繁殖技术。迄今为止,有关白及的组织培养快繁研究报道较多,但大部分均由愈伤组织分化而来,不能从根本上解决由假鳞茎进行增殖的技术难题,因此,开发一种能解决上述技术难题的方法是非常必要的。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种白及试管苗瓶内复壮的方法。
本发明的目的是这样实现的,所述的白及试管苗瓶内复壮的方法包括以下步骤:
1)将白及成熟未裂开蒴果消毒后,播散于萌发培养基上培养10~20天得到绿色原球茎,继续培养30~40天得到幼苗,再继续培养30~40天至幼苗生长至3~4cm得到预培养苗;
2)将预培养苗进行继代繁殖,即待1代繁殖苗长至培养瓶颈时,将茎叶剪断,仅余0.5~1.5cm,然后转接入装有生根培养基的2代繁殖瓶中,按同样方法进行2代转3代、3代转4代得到生根苗;
3)待生根苗长至8~12cm时,将生根苗置于室温下炼苗8~12天,取出幼苗,将残留培养基清洗干净,移栽至消毒后的腐殖质中培养;
其中,所述的预培养基为ms+活性炭0.5~1.5g/l+香蕉泥40~60g/l+6-ba0.4~0.6mg/l+naa0.01~0.02mg/l,琼脂0.46%,ph值5.4~5.8;
所述的生根培养基为1/2ms+活性炭0.5~1.5g/l+香蕉泥70~90g/l+6-ba0.05~0.15mg/l+naa0.5~1.5mg/l+糖15000mg/l。
本发明处理的白及试管苗的复壮效果较植株生长正常,无论茎和根的生长状况均明显得以提高,通过本发明培养出来的白及试管苗,其生长速度、分蘗能力或假鳞茎大小均具显著性差异。
具体实施方式
本发明所述的白及试管苗瓶内复壮的方法包括以下步骤:
1)将白及成熟未裂开蒴果消毒后,播散于萌发培养基上培养10~20天得到绿色原球茎,继续培养30~40天得到幼苗,再继续培养30~40天至幼苗生长至3~4cm得到预培养苗;
2)将预培养苗进行继代繁殖,即待1代繁殖苗长至培养瓶颈时,将茎叶剪断,仅余0.5~1.5cm,然后转接入装有生根培养基的2代繁殖瓶中,按同样方法进行2代转3代、3代转4代得到生根苗;
3)待生根苗长至8~12cm时,将生根苗置于室温下炼苗8~12天,取出幼苗,将残留培养基清洗干净,移栽至消毒后的腐殖质中培养;
其中,所述的预培养基为ms+活性炭0.5~1.5g/l+香蕉泥40~60g/l+6-ba0.4~0.6mg/l+naa0.01~0.02mg/l,琼脂0.46%,ph值5.4~5.8;
所述的生根培养基为1/2ms+活性炭0.5~1.5g/l+香蕉泥70~90g/l+6-ba0.05~0.15mg/l+naa0.5~1.5mg/l+糖15000mg/l。
所述的清洗是流动水漂洗。
所述的浸泡是用质量百分数10%洗衣粉溶液浸泡8~12min。
所述的冲洗是采用流水冲洗20~40min。
所述的消毒是采用75%乙醇溶液处理3~5s,然后再经0.1%升汞水溶液消毒7~9min。
所述的预培养基为:1/2ms+6-ba6mg/l+naa0.5mg/l+kt2mg/l,ph6.0;
所述的丛芽发生培养基为:1/2ms+6-ba10mg/l+naa0.5mg/l+kt2mg/l,ph5.8;
所述的生根培养基为:1/2ms+6-ba6mg/l+naa0.5mg/l,ph6.0。
实施例1
1)将白及成熟未裂开蒴果消毒后,播散于萌发培养基上培养10~20天得到绿色原球茎,继续培养30~40天得到幼苗,再继续培养30~40天至幼苗生长至3~4cm得到预培养苗;
2)将预培养苗进行继代繁殖,即待1代繁殖苗长至培养瓶颈时,将茎叶剪断,仅余0.5~1.5cm,然后转接入装有生根培养基的2代繁殖瓶中,按同样方法进行2代转3代、3代转4代得到生根苗;
3)待生根苗长至8~12cm时,将生根苗置于室温下炼苗8~12天,取出幼苗,将残留培养基清洗干净,移栽至消毒后的腐殖质中培养;
其中,预培养基为ms+活性炭0.5g/l+香蕉泥40g/l+6-ba0.4mg/l+naa0.01mg/l,琼脂0.46%,ph值5.4;
生根培养基为1/2ms+活性炭0.5g/l+香蕉泥70g/l+6-ba0.15mg/l+naa1.5mg/l+糖15000mg/l。
实施例2
同实施例1,不同之处在于预培养基为ms+活性炭1.5g/l+香蕉泥60g/l+6-ba0.6mg/l+naa0.02mg/l,琼脂0.46%,ph值5.8;
生根培养基为1/2ms+活性炭1.5g/l+香蕉泥90g/l+6-ba0.15mg/l+naa1.5mg/l+糖15000mg/l。
实施例3
同实施例1,不同之处在于预培养基为ms+活性炭1.0g/l+香蕉泥50g/l+6-ba0.4mg/l+naa0.015mg/l,琼脂0.46%,ph值5.5;
生根培养基为1/2ms+活性炭1.0g/l+香蕉泥80g/l+6-ba0.1mg/l+naa1.0mg/l+糖15000mg/l。