本发明属于栽培技术领域，具体涉及一种白及增殖假鳞茎的培育方法。
背景技术：
白及，为兰科白及属多年生草本植物，以块茎入药，具有收敛止血，消肿生肌等功效，然而白及的人工繁殖技术不够成熟，传统分株繁殖方式生长周期长，繁殖系数小，加之野外白及授粉率与种子萌发率低，使得白及市场提供了大量的种苗，并为白及开辟了新的繁殖技术。迄今为止，有关白及的组织培养快繁研究报道较多，但大部分均由愈伤组织分化而来，不能从根本上解决由假鳞茎进行增殖的技术难题，因此，开发一种能解决上述技术难题的方法是非常必要的。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种白及增殖假鳞茎的培育方法。
本发明的目的是这样实现的，所述的白及增殖假鳞茎的培育方法是通过无菌实生苗继代培养，继代培养5次开始增殖后得到白及增殖假鳞茎，且得到的白及增殖假鳞茎在驯化炼苗中的成活率为99％以上。
本发明从假鳞茎发生和增殖的角度出发，通过对无菌实生苗若干代转接培养(或称继代培养)，淘汰由愈伤组织分化而来的幼苗，而通过改变植物激素诱导和保留无菌苗基部的分蘗苗，在4次转接各的每一代均可由假鳞茎来进行增殖。假鳞茎增殖这种途径在以往的报道中很少存在，即使某些研究者进行了类似研究，但其系数很低；而本发明的创新点就在于此：无菌实生苗诱导出来后，进行2代继代培养；从第3代起开始淘汰愈伤组织及其产生的幼苗，连续进行2代，此时的增殖主要依靠分蘗进行；从第5代开始增殖全部通过假鳞茎方式进行，有效增殖系数大大提高，可达4.0以上。此方法尽管在时间上稍显过长，但经过生根培养出来的试管苗棵棵粗状，其假鳞茎在瓶内就已开始迅速膨大并伴随有假鳞茎芽出现；在未来的大棚驯化炼苗成活率亦可达99％以上，大大超过了已有的文献报道。此外，通过本发明培养出来的白及试管苗，比常规种子无菌直播(尽管亦称为组培苗)无论生长速度、分蘗能力或假鳞茎大小均具显著性差异。
具体实施方式
本发明所述的白及增殖假鳞茎的培育方法是通过无菌实生苗继代培养，继代培养5次开始增殖后得到白及增殖假鳞茎，且得到的白及增殖假鳞茎在驯化炼苗中的成活率为99％以上。
所述的白及增殖假鳞茎培育方法具体包括以下步骤：
1)将无菌实生苗接入1代增殖培养基中，于温度20～40℃暗培养50～70天得到1代增殖苗；
2)将1代增殖苗接入2代增殖培养基中，于温度20～40℃暗培养50～70天得到2代增殖苗；
3)将2代增殖苗接入3代增殖培养基中，温度20～25℃、光照度1500～2000lx光照培养30～50天得到3代增殖苗；
4)将3代增殖苗接入4代增殖培养基中，温度20～25℃、光照度1500～2000lx光照培养30～50天得到4代增殖苗；
5)将4代增殖苗接入分蘗培养基中，温度21～23℃、光照度1500～2000lx光照培养20～40天得到目标物白及增殖假鳞茎；
其中，1代增殖培养基为：ms+香蕉泥40～60g/l+蔗糖10～30g/l，ph值5.0～6.0；
2代增殖培养基为：ms+香蕉泥40～60g/l+蔗糖10～30g/l，琼脂0.3～0.5％，ph值5.0～6.0；
3代增殖培养基为：ms+香蕉泥40～60g/l+蔗糖10～30g/l+2,4-d0.05～0.5mg/l+naa0.5～1.5mg/l，琼脂0.3～0.5％，ph值5.0～6.0；
分蘗培养基为：1/2ms+ac0.5～1.5g/l+香蕉泥70～90g/l+6-ba0.01～0.05mg/l+naa0.5～1.5mg/l+蔗糖10～20g/l，ph值6.5～7.5。
所述的1代增殖培养基为：ms+香蕉泥50g/l+蔗糖20g/l，ph值5.8。
所述的2代增殖培养基为：ms+香蕉泥50g/l+蔗糖20g/l，琼脂0.4％，ph值5.5。
所述的3代增殖培养基为：ms+香蕉泥50g/l+蔗糖20g/l+2,4-d0.2mg/l+naa1.0mg/l，琼脂0.4％，ph值5.8。
所述的分蘗培养基为：1/2ms+ac1.0g/l+香蕉泥80g/l+6-ba0.03mg/l+naa1.0mg/l+蔗糖15g/l，ph值7.0。
实施例1
1)将无菌实生苗接入1代增殖培养基中，于温度20℃暗培养70天得到1代增殖苗；
2)将1代增殖苗接入2代增殖培养基中，于温度20℃暗培养70天得到2代增殖苗；
3)将2代增殖苗接入3代增殖培养基中，温度25℃、光照度1500～2000lx光照培养30天得到3代增殖苗；
4)将3代增殖苗接入4代增殖培养基中，温度20℃、光照度1500～2000lx光照培养50天得到4代增殖苗；
5)将4代增殖苗接入分蘗培养基中，温度21℃、光照度1500～2000lx光照培养40天得到目标物白及增殖假鳞茎；
其中，1代增殖培养基为：ms+香蕉泥40g/l+蔗糖10g/l，ph值5.0；
2代增殖培养基为：ms+香蕉泥40g/l+蔗糖10g/l，琼脂0.3％，ph值5.0；
3代增殖培养基为：ms+香蕉泥40g/l+蔗糖10g/l+2,4-d0.05mg/l+naa0.5mg/l，琼脂0.3％，ph值5.0；
分蘗培养基为：1/2ms+ac0.5g/l+香蕉泥70g/l+6-ba0.01mg/l+naa0.5mg/l+蔗糖10g/l，ph值6.5。
实施例2
1)将无菌实生苗接入1代增殖培养基中，于温度20～30℃暗培养50天得到1代增殖苗；
2)将1代增殖苗接入2代增殖培养基中，于温度30～40℃暗培养50天得到2代增殖苗；
3)将2代增殖苗接入3代增殖培养基中，温度20～25℃、光照度1500～2000lx光照培养30天得到3代增殖苗；
4)将3代增殖苗接入4代增殖培养基中，温度20～25℃、光照度1500～2000lx光照培养50天得到4代增殖苗；
5)将4代增殖苗接入分蘗培养基中，温度21～23℃、光照度1500～2000lx光照培养40天得到目标物白及增殖假鳞茎；
其中，1代增殖培养基为：ms+香蕉泥60g/l+蔗糖30g/l，ph值6.0；
2代增殖培养基为：ms+香蕉泥60g/l+蔗糖30g/l，琼脂0.5％，ph值6.0；
3代增殖培养基为：ms+香蕉泥60g/l+蔗糖30g/l+2,4-d0.5mg/l+naa1.5mg/l，琼脂～0.5％，ph值6.0；
分蘗培养基为：1/2ms+ac1.5g/l+香蕉泥90g/l+6-ba0.05mg/l+naa1.5mg/l+蔗糖20g/l，ph值7.5。
实施例3
1)将无菌实生苗接入1代增殖培养基中，于温度20～40℃暗培养60天得到1代增殖苗；
2)将1代增殖苗接入2代增殖培养基中，于温度20～40℃暗培养60天得到2代增殖苗；
3)将2代增殖苗接入3代增殖培养基中，温度20～25℃、光照度1500～2000lx光照培养30～50天得到3代增殖苗；
4)将3代增殖苗接入4代增殖培养基中，温度20～25℃、光照度1500～2000lx光照培养40天得到4代增殖苗；
5)将4代增殖苗接入分蘗培养基中，温度21～23℃、光照度1500～2000lx光照培养30天得到目标物白及增殖假鳞茎；
其中，1代增殖培养基为：ms+香蕉泥50g/l+蔗糖20g/l，ph值5.8；
2代增殖培养基为：ms+香蕉泥50g/l+蔗糖20g/l，琼脂0.4％，ph值5.5；
3代增殖培养基为：ms+香蕉泥50g/l+蔗糖20g/l+2,4-d0.3mg/l+naa1.0mg/l，琼脂0.4％，ph值5.5；
分蘗培养基为：1/2ms+ac1.0g/l+香蕉泥80g/l+6-ba0.03mg/l+naa1.0mg/l+蔗糖15g/l，ph值7.0。